山野豌豆种子发芽试验方法研究

郭明英，尤金成，张木兰，乌 兰，伟 军

山野豌豆(Viciaamoena)为豆科野豌豆属多年生牧草，分布在欧洲、非洲及亚洲各地，我国东北、内蒙古、甘肃、青海、山西、陕西、河北和河南等地均有分布，是一种生物量高、品质优良、叶量丰富、抗旱耐寒、耐践踏并可做绿肥的豆科牧草〔1〕，也是良好牧草，而且全草药用，有清热解毒的功效〔2〕。

山野豌豆在呼伦贝尔各地区均有分布，主要生于山坡、林缘、草地与灌丛中。近年来，学者对山野豌豆染色体数目及核型分析〔3〕、凝胶电泳〔4〕、地上生物量的动态研究〔5〕、化学成分定性分析〔6〕与生物学特性及其利用〔7〕等方面做了大量卓有成效的研究报道，但对山野豌豆种子发芽试验研究方法报道较少。因此，本试验对山野豌豆种子在不同条件下进行发芽试验，为山野豌豆的研究与利用提供相关的科学依据。

1 材料和方法

1.1 材料来源

试验材料于2010年秋从根河市采集野生山野豌豆种子。该地地处于东经 122°12'～122°55'、北纬50°22'～52°30'之间。属寒温带半干旱大陆性气候，年平均气温为－5.5℃，年平均降雨量450mm，6～8月占70%，无霜期在60d左右。

1.2 处理方法

种子发芽试验采用热水、低温、高温、擦破种皮和98%浓硫酸5种处理方法，热水处理时间分别为0h、24h和48h，处理温度80℃;低温处理分别为－20℃、－10℃、5℃和 20℃，处理时间 7d;高温处理时间分别为 0min、10min、20min 和 30min，放在80℃的烘箱中进行处理;擦破种皮处理分别对种子未处理、60目砂纸磨和锉磨处理;98%浓硫酸处理时间分别为0min、10min、20min和30min。处理后用清水洗净种子，以备发芽试验。

发芽试验于2012年3月28日进行，在培养箱25℃恒温条件下，采用培养皿内纸上发芽法，每天换水并观察发芽情况〔8〕。各处理每个培养皿内均放50粒种子，4次重复，发芽后进行统计，计算发芽率。

2 结果与分析

2.1 热水处理不同时间对种子发芽率的影响

由图1得出，热水处理对山野豌豆种子萌发有一定效果，对照种子发芽率28%，而处理24h与48h种子发芽率分别为38%和40%。结果表明:热水处理对于促进山野豌豆种子萌发有一定效果，但不显著。

图1 热水处理不同时间对种子发芽率的影响

2.2 低温处理不同温度对种子发芽率的影响

由图2看出，对照(20℃)种子发芽率28%，而处理－20℃种子发芽率为28%、－10℃与5℃种子发芽率均为32%。结果表明:低温处理对于促进山野豌豆种子萌发几乎没有效果。

图2 低温处理不同温度对种子发芽率的影响

2.3 高温处理不同时间对种子发芽率的影响

由图3可知，对照(0min)种子发芽率28%，而处理10min、20min和30min种子发芽率为28%、32%与24%。结果表明:高温处理对于促进山野豌豆种子萌发效果不大，随着处理时间的延长，发芽率反而降低了。

图3 高温处理不同时间对种子发芽率的影响

2.4 擦破种皮不同处理对种子发芽率的影响

选择不同的擦破种皮的方法，得出的结果明显不同(见图4)，对照(未处理)种子发芽率28%;采用60目砂纸磨破种皮，种子发芽率为48%;用锉磨处理，种子发芽率为72%。结果表明:擦破种皮处理方法对于促进山野豌豆种子萌发效果比较显著，尤其是锉磨处理。

图4 擦破种皮不同处理对种子发芽率的影响

2.5 98%浓硫酸处理不同时间对种子发芽率的影响

从98%浓硫酸处理不同时间对种子发芽率的影响(见图5)来看，对照(0min)种子发芽率28%，而处理10min、20min和30min种子发芽率为88%、94%与90%。结果表明:98%浓硫酸的处理方法对于促进山野豌豆种子萌发效果非常显著，但处理30min，种子发芽率有所降低，但降幅不大，说明用98%浓硫酸处理20min方法最合适。

图5 98%浓硫酸处理不同时间对种子发芽率的影响

2.6 不同处理方法间的比较

不同处理方法对山野豌豆种子发芽率影响结果得出，不同方法对于促进种子萌发效果，具有明显的差异。低温与高温处理对于山野豌豆种子萌发几乎无影响，热水处理有一定效果，但效果不明显，而擦破种皮与98%浓硫酸处理效果显著，特别是98%浓硫酸处理效果最佳。

3 讨论

山野豌豆种子小，种皮坚硬，透水性差，硬实率高达50%～70%，发芽率低，须进行硬实处理。破除种子硬实，可采取预先冷冻 、药剂处理、加热干燥、开水烫种、机械损伤等措施。浓硫酸是处理硬实种子常用的方法，可以使种子的发芽率得到极大的提供，本试验得出的用98%浓硫酸处理可显著提高种子发芽率，与穆春生〔9〕、马正华〔10〕研究结果一致。机械损伤中擦破种皮对提高山野豌豆种子发芽率，也有较好的效果。在山野豌豆生产试验中，其应用性更广一些。可能还有更好的方法，有待进一步研究。

〔1〕陈墨君，贾慎修.中国饲用植物〔M〕.北京:中国农业出版社，2000.662－685.

〔2〕《全国中草药汇编》编写组.全国中草药汇编(上)〔M〕.北京:人民卫生出版社，1992:298.

〔3〕苏坤梅，杨德奎.山野豌豆的染色体数目及核型分析〔J〕. 山东科学，2001，14(3):48－50.

〔4〕扬树青，杨九艳，辛建成，高琳雁.蒙药山野豌豆、多茎野豌豆及大野豌豆的凝胶电泳鉴别〔J〕.中国民族医药杂志，2002，8(2):32.

〔5〕秦建波，穆春生.山野豌豆地上生物量和草层结构及全氮含量的动态变化〔J〕.草业科学，2006，23(8):28－32.

〔6〕杨巧荷，罗素琴，刘乐乐，霍红玉.蒙药材山野豌豆中的化学成分定性分析〔J〕.内蒙古医学院学报，2010，32(5):475－477.

〔7〕宋敏于，洪柱娄，玉洁，陈涛，徐安凯.山野豌豆生物学特性及其利用〔J〕.草业与畜牧，2011，4:5－6.

〔8〕颜启传.种子学〔M〕.北京:中国农业出版社，2001.

〔9〕穆春生，王颖，孟安华.松嫩草地主要豆科牧草种子硬实破除方法研究〔J〕.四川草原，2005，(10):6－8.

〔10〕马正华.西北黄芪和山野豌豆种子活力剂幼苗抗寒生理研究〔D〕.青海大学硕士学位论文，2008.