两种方法检测乙型肝炎病毒的对比分析

邓 俊

（湖南省第二人民医院检验科，长沙 410007）

乙型肝炎（下称乙肝）是世界性传染病，在我国乙肝患者和无症状携带者估计在1.2亿人以上［1］。临床上对乙肝标志物的检测是乙肝流行病学调查、预防和治疗监测的重要指标。临床上多采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对乙肝标志物进行定性检测。随着科学技术的不断发展和方法学的不断改进，乙型肝炎的鉴定有了更多快速、简便和灵敏的检测方法，如化学发光、聚合酶链反应已逐步应用于临床，这些方法将乙肝标志物的检测提升到了定量水平。本院检验科已经采用了ELISA和磁微粒化学发光酶免疫法两种方法对本院门诊及住院患者的血清标本进行乙肝标志物的定性和定量检测。本文通过应用这两种方法对相同临床血清标本的乙肝病毒（HBV）标志物进行检测，从而比较两种方法所测结果是否存在差别，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清标本 选取2011年7月在本院检测HBV项目的门诊和住院患者的血清标本44例。

1.1.2 仪器 日本东曹株式会AIA-1800ST化学发光免疫分析仪、上海雷勃全自动酶标仪MK3、深圳汇松科技PW-960全自动酶标洗版机。

1.1.3 试剂 ELISA试剂采用北京万泰生物药业股份有限公司生产的乙型肝炎酶免测定试剂、化学发光免疫分析仪试剂采用仪式配套的乙型肝炎血清标志物检测试剂。

1.2 方法

1.2.1 ELISA法检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）严格参照试剂说明书操作；结果判断：样品A值小于临界值（cut off）者为阴性，样品A值大于或等于临界值为阳性。本试验选取cut off＝0.105时的检测结果为分析数据。

1.2.2 日本东曹株式会化学发光免疫分析仪使用磁微粒化学发光酶免疫法定量检测HBsAg和抗-HBs。HBsAg≥0.05U／mL为阳性，抗-HBs≥6.4mU／mL为阳性。

1.3 统计学方法 应用SPSS13.0软件，对比ELISA法和磁微粒化学发光酶免疫法检测的HBsAg和抗-HBs结果，运用配对四格表资料的χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

磁微粒化学发光酶免疫法检测HBsAg阳性为5例，占总数的11.36%，ELISA检测 HBsAg阳性为6例，占总数的13.64%，两种方法检测HBsAg结果的符合率为97.73%（43／44）。配对卡方检验（McNemar Test）P 值为1.000＞0.05，显示两种方法所测结果差异无统计学意义。结果见表1。

表1 两种方法检测HBsAg的结果［n（%）］

磁微粒化学发光酶免疫法检测抗-HBs阳性为29例，占总数的65.91%，ELISA检测抗-HBs阳性为24例，占总数的54.55%，两种方法检测抗-HBs结果的符合率为88.64%（39／44）。配对χ2检验（McNemar Test）P值为0.063＞0.05，显示两种方法所测结果差异无统计学意义。结果见表2。

表2 两种方法检测抗-HBs的结果［n（%）］

3 讨 论

HBsAg是HBV感染后第一个出现的血清学标志物，提示机体感染HBV，常见于急性肝炎、慢性肝炎或无症状携带者。是乙型肝炎感染的重要指标之一。抗-HBs是一种保护型抗体，意味着机体对HBV有免疫力，常出现在乙型肝炎急性感染恢复期或者HBsAg疫苗免疫成功以后。文献［2-4］认为：抗-HBs＞10mU／mL时，机体才具有抵御HBV入侵的能力。HBV血清标志物的准确检测对于乙肝的流行病学监测和诊断有着十分重要的作用。所以好的检测方法非常重要。

ELISA操作简单，价格便宜，灵敏度好，适用于大批量标本的检测，但因受到试剂、标本、人工操作和环境等各方面因素的影响［5－6］以及定性的检测水平，已不能满足临床对乙肝标志物准确定量检测的要求。而磁微粒化学发光酶免疫法采用全自动酶免化学发光技术，避免了人工操作带来的误差，并能精准的进行定量检测，很好地填补了ELISA方法的不足。然而，不同检测方法结果的差异会明显地影响HBV感染筛查和临床诊断的准确性［7］。

通过对比两种方法所测结果可以发现，二者所测HBsAg结果符合率很高，44例标本中，只有1例标本结果不同，ELISA所测结果为阳性，而磁微粒化学发光法所测结果为阴性。通过对方法学的分析，ELISA为阳性可能是由于洗板不干净或其他人工操作误差而导致了吸光值偏高，为假阳性结果。抗-HBs虽然符合率相对较低，但比较两种方法所得结果的差异时，可发现ELISA法判为阴性的5个标本，其磁微粒化学发光酶免疫法所测抗-HBs的值分别为9.6mU／mL、8.10 mU／mL、10.50mU／mL、10.50mU／mL和12.30mU／mL，都在10mU／mL左右，数值不是很高。说明两种方法检出差异主要集中在低浓度区。该结论与朱火星［8］的结论相符合。

虽然χ2检验所得结论认为两种方法在检测HBV标志物方面无统计学意义，但在个别样本中还是存在结果的不同，如对低浓度抗-HBs检测时差异有统计学意义。所以在实际工作中，医务工作者需要对有差异的结果进行综合性分析，除进行重复检测以外，为确保结果的准确性，可以通过其他方法如胶体金法、聚合酶链反应法等方法给予辅助判断，从而得到可靠的结果，这样才能更好地为临床服务。

［1］ 蔺承艳，钮琼.HBV血清标志物ELISA检测法中的钩状效应［J］.海南医学，2010，21（5）：114-115.

［2］ 谭璐.化学发光微粒子免疫分析法与酶联免疫法测定乙肝标志物的比较［J］.实用医技杂志，2008，15（3）：294-295.

［3］ 洪俊，绕永彩.全自动发光免疫分析仪在HBV血清标志物检查中的应用［J］.职业与健康，2010，26（3）：276-278.

［4］ 黄道连.ELISA法检测乙型肝炎两对半影响因素分析与对策［J］.检验医学与临床，2007，4（8）：758-759.

［5］ 谢璟，崔江龙，王宏碧，等.ELISA法对乙肝六项检测结果的影响及处理对策［J］.实验与检验医学，2011，29（1）：83-84.

［6］ 王璐.ELISA法检验乙肝标志物影响因素的探讨［J］.医学理论与实践，2012，25（4）：451-452.

［7］ Chen Y，WuW，Li LJ，et al.Comparison of the results for three automated immunoassay systems in determining serum HBV markers［J］.Clin Chim Acta，2006，372（1／2）：129-133.

［8］ 朱火星.化学发光法和酶联免疫法应用于乙肝病毒血清学效果比较［J］.当代医学，2010，16（16）：89-90.