子宫内膜癌中抑癌基因P27蛋白与癌基因P185蛋白的表达及临床意义

钱沁佳

（海南省第三人民医院妇产科，海南三亚570000）

子宫内膜癌是妇科常见恶性疾病，临床诊断除常规检查外，基因检测在临床诊断中也起到积极作用。P27蛋白是细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂因子，其在细胞周期调控中起重要作用，与肿瘤发生、发展的机制相关；P185蛋白是一种癌基因，临床已应用于多种恶性肿瘤诊断［1］。作者为研究应用P27特异性单克隆抗体、P185特异性单克隆抗体联合检测在子宫内膜癌诊断及判断预后的应用价值，对本院2008年1月至2010年3月收治的子宫内膜癌、子宫非典型增生病变及同期正常子宫内膜组织进行检测，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2008年1月至2010年3月收治的子宫内膜癌患者66例（癌症组），年龄42～82岁；子宫非典型增生病变患者29例（增生组），年龄41～83岁；正常子宫内膜组织31例（对照组），年龄39～81岁。

1.2 试剂 S－P免疫组化试剂盒，P27单克隆抗体、c－erbB－2单克隆抗体，均购自福州迈新公司。

1.3 方法

1.3.1 采用S－P免疫组化方法 步骤：（1）石蜡切片4μm厚，脱蜡水化后，用磷酸盐缓冲液（PBS），pH＝7.4冲洗3次，每次5min；（2）加入50μL过氧化酶阻断溶液，室温孵育10min；（3）用PBS冲洗3次，每次5min；（4）加非免疫性动物血清50 μL，室温孵育5min，后用PBS冲洗；（5）加第一抗体50μL（P27抗体或P185抗体），室温孵育60min；（6）用PBS冲洗3次，每次5min；（7）加生物素标记的第二抗体50μL，室温孵育10min；（8）用PBS冲洗3次，每次5min；（9）加链亲和素－过氧化物酶溶液50μL，室温孵育10min；（10）用PBS冲洗3次，每次5min；（11）加新鲜配制的DAB溶液2滴显色；（12）自来水冲洗，苏木素复染，中性树胶封固。

1.3.2 结果判定 光镜随机观察10个高倍视野，计数1 000个细胞，以细胞核／浆（P27）、细胞膜／浆（P185）阳性为棕黄色颗粒。计算阳性细胞百分率，阳性结果分级标准：＜10%为阴性，10%～50%（＋），＞50%（＋＋）。

1.4 统计学处理 采用SPSS12.0统计软件进行分析，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 子宫内膜癌组织中P27蛋白的表达 本组资料中癌症组P27表达与增生组及子宫内膜对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05），对照组与增生组比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

2.2 P185蛋白在子宫内膜癌组织中的表达 癌症组P185蛋白产物阳性表达率为83.3%，增生组阳性表达率为48.3%，对照组阳性表达率仅9.7%，且无强阳性表达。癌症组P185的表达阳性率与增生组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；对照组与癌症组及增生组比较，差异有统计学意义（P＜0.01），见表2。

表1 3组P27蛋白的表达比较

表2 3组患者P185蛋白的表达比较

3 讨 论

抑癌基因和癌基因在肿瘤在发生、发展过程中起到了极大的影响。P27蛋白是细胞G1期负向调节因子，是cdk2／cykclin E复合物的抑制剂，可使细胞周期停滞于G1期。有实验证实，如P27缺失的小鼠易发生垂体肿瘤，表明P27与肿瘤发生有关［3］。近年来有报道称 P27蛋白高表达预后较好［4－7］；本研究发现，P27蛋白阳性着色于细胞质及细胞核，正常子宫内膜亦呈阳性并可作为内对照，本组资料中子宫内膜癌组织P27阳性表达率53%，在非典型增生病变中阳性表达率为75.8%，组间比较差异有统计学意义（P＜0.05），子宫内膜癌与正常子宫内膜对照组比较，两者差异有统计学意义（P＜0.01），表明随P27蛋白含量的减少或缺失，正常细胞向癌细胞转化速度加快，其恶性度增高，预后不良，表明P27对肿瘤发生起着一定的调控作用。P185是编码1255的氨基酸蛋白，其激活方式主要是扩增及产物的过度表达，现较多用于乳腺癌、卵巢癌判定预后的检测，用于消化道癌［8］、甲状腺癌［9］已有报道，本研究与报道相一致。本研究应用P185对子宫内膜癌进行检测，其阳性率83.3%；在非典型病变中阳性率48.3%；对照组阳性率9.7%，这些结果表明随着P185蛋白的扩增或表达过度增高时，恶性度增加，提示预后不良，说明P185对肿瘤发生和调控亦起一定作用。

本组资料中，子宫内膜疾病恶性程度越高，P27蛋白表达阳性水平越低；而子宫内膜疾病恶性程度越低，P185蛋白表达阳性率也越低，正常对照组P185蛋白无强阳性表达，表明子宫内膜癌中P185蛋白与P27蛋白表达表达呈负相关。他们从不同的角度为临床提供了有价值的肿瘤标志物。P27蛋白作为抑癌基因、P185作为癌基因对肿瘤的发生与调控有重要作用，两者的联合检测对子宫内膜疾病的鉴别诊断及治疗起积极意义。

［1］ 张旭，李小毛.Survivin基因在子宫内膜癌中的表达及临床意义［J］.重庆医学，2011，40（19）：1954－1957.

［2］ 谢凤云，谢梅青.GnRH受体在人类子宫内膜的表达及意义［J］.海南医学，2012，23（7）：114－116.

［3］ Dellas A，Jundt G，Sartorius G，et al.Combined PTEN and p27kip1protein expression patterns are associated with obesity and prognosisin endometrial carcinomas［J］.Clin Cancer Res，2009，15（7）：2456－2462.

［4］ 张颖，陈海玲，梁艳红.GLUT1与PCNA蛋白在子宫内膜样腺癌组织中的表达及相关研究［J］.海南医学，2011，22（6）：131－111.

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［6］ 徐丹.子宫内膜癌组织中钙磷脂结合蛋白的表达及其意义［J］.重庆医学，2010，39（4）：401－402.

［7］ 张颖，陈海玲，梁艳红.GLUT1与PCNA蛋白在子宫内膜样腺癌组织中的表达及相关研究［J］.海南医学，2011，22（6）：169－171.