血清HBsAg水平评价替比夫定治疗慢性HBV中的研究

李杰花 顾浩

乙型肝炎血清标志物是乙型肝炎患者的临床诊断标准，其检测方法是临床技术人员一直以来高度重视的方面[1]。慢性乙型肝炎临床疗效的判断通常靠监测患者血清中HBeAg和HBV DNA水平，而某些HBV携带者因前核心和核心启动子区域的变异可能存在HBeAg负性波动，很难确定HBeAg阴性患者与HBV DNA水平的相关性[2]。本研究采用化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)定量检测慢性乙型肝炎患者血清HBsAg水平，从而判断替比夫定的临床疗效。

1 资料与方法

1.1 病例选择 入组标准:(1)符合中华医学会传染病与寄生虫病学会制定的慢性乙型肝炎的诊断标准[3]；(2)年龄 18～69 岁，血清HBeAg阳性；(3)血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平持续升高，且≥2 倍参考值上限；(4)HBeAg阳性患者HBV DNA水平＞2.0×103copy/mL，阴性患者HBV DNA水平＞1.0×103copy/mL；(5)入组前患者未接受过干扰素、核苷类似物抗病毒治疗；(6)近12个月内未接受过免疫调节药物的治疗；(7)患者自愿加入本研究，签订知情同意书。排除标准：(1)不符合入组标准；(2)合并肝硬化、代谢性肝病或自身免疫性肝炎等；(3)同时感染有其他类型的病毒性肝炎，如甲型、丙型或丁型；(4)处于妊娠或哺乳期妇女；(5)预计生存期不能完成研究者。

1.2 研究对象 研究对象来源于 2009年12月～2012年1月期间在我院接受替比夫定治疗的患者80例，男46例。女34例；年龄18～69岁，平均年龄(4.7±8)岁；其中HBeAg阳性患者 48 例、HBeAg阴性患者32例。

1.3 方法 患者均口服替比夫定 600 mg，1 次/d，疗程 1 年。治疗前和治疗后每 3 个月收集 1 次患者血清标本，测定ALT、HBsAg和HBV DNA水平。血清ALT检测采用GS400 全自动生化分析仪和相应的配套试剂;血清HBsAg和HBeAg测定采用CMIA法试剂盒和KS7041502 型化学发光免疫分析仪，操作步骤严格按照说明书进行;HBV DNA测定采用HBV DNA试剂盒和 7300 型实时荧光定量PCR仪。

1.4 统计学方法 数据采用SPSS13.0 进行统计分析，计量资料采用均数±标准差(±s)表示，比较采用t检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 治疗前后患者HBsAg、HBV DNA和ALT水平比较经过 1 年的治疗，患者HBsAg、HBV DNA和ALT水平较治疗前下降，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 治疗前后患者HBsAg、HBV DNA和ALT水平比较（±s）

表1 治疗前后患者HBsAg、HBV DNA和ALT水平比较（±s）

注：与治疗前比较，aP<0.05

时间 HBsAg(IU/mL) HBV DNA（103 copy/mL） ALT(U/L)治疗前 1830±329 6.1±1.2 100±12治疗后 1026±274 a 3.2±1.0 a 32±11 a

2.2 治疗前后患者HBsAg、ALT水平与HBV DNA的相关性 治疗前后患者HBsAg水平与HBV DNA均存在相关性(P<0.05)，而ALT水平与HBV DNA无关联(P>0.05)，见表2。

表2 治疗前后患者HBsAg、ALT水平与HBV DNA的相关性（±s）

表2 治疗前后患者HBsAg、ALT水平与HBV DNA的相关性（±s）

组别 时间 HBsAg(IU/mL)ALT(U/L)HBeAg阴性组HBV DNA（103copy/mL）治疗前 1386±356 5.8±1.1 98±12治疗后 1106±290 3.2±1.0 44±10 HbeAg阳性组治疗前 2413±322 6.2±1.3 104±13治疗后 1000±263 3.0±1.1 29±10

2.3 HBsAg、HBV DNA和ALT与耐药时间的关系80例患者在治疗过程中发现 9 例对替比夫定耐药，在检测过程中，HBsAg与HBV DNA水平在治疗后3个月开始发生反弹，而血清ALT水平在治疗后6个月开始反弹，明显滞后。

3 讨论

慢性乙型肝炎治疗终点:HBeAg阳性患者，血清HBsAg清除(理想终点)或血清学HBeAg转换(满意终点)，HBV DNA检测不到；HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者，HBsAg血清清除，HBV DNA检测不到[4]。替比夫定是天然胸腺嘧啶脱氧核苷的自然L对映体，是人工合成的胸腺嘧啶脱氧核苷类抗HBV药物。替比夫定在细胞激酶的作用下被磷酸化，变为有活性的代谢产物，并与HBV天然底物胸腺嘧啶的 5’-腺苷竞争，从而抑制HBV DNA多聚酶的活性;然后整合到HBV DNA中，终止HBV DNA链的延长，抑制其复制，起到抗病毒的作用。我们采用替比夫定治疗 80 例慢性乙型肝炎患者，其中HBeAg阳性患者48例、HBeAg阴性患者32例，1年后患者血清HBsAg、HBV DNA和ALT水平较治疗前比较，均显著下降。结果表明:替比夫定治疗慢性乙型肝炎，具有较好的病毒学应答和生化应答，减少病毒对肝脏的攻击，改善肝功能和延缓病情进展。

定量检测慢性乙型肝炎患者血清中HBV DNA水平，是判断临床治疗效果和修正抗病毒治疗方案的重要临床指标，虽然实时荧光定量PCR测定HBV DNA水平具灵敏度高和重现性好等特点，但是一般医院实验条件有限，难以开展。有文献报道[5]，HBeAg定量与HBV DNA存在相关性，与HBV DNA复制的关系紧密，但是很难适用于HBeAg阴性患者。我们通过测定并分析患者血清HBsAg、HBV DNA和ALT水平，结果发现治疗前后患者HBsAg水平与HBV DNA均存在正相关性，而ALT水平与HBV DNA无关联。在治疗过程中9例患者对替比夫定耐药，HBsAg与HBV DNA水平在治疗后 3 个月开始发生反弹，而血清ALT水平在治疗后6个月开始反弹。结果提示:患者血清HBsAg水平可反映HBV DNA的复制情况，具有较高的敏感性，可以用于指导临床抗病毒治疗的效果评价。

综上所述，定量HBsAg水平可反映HBV DNA复制情况，为慢性乙型肝炎临床治疗提供客观依据;CMIA测定HBsAg具有简单、方便、快捷、高效、准确和自动化程度高等优势，值得临床推广应用。

[1]卢桂香.不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果评价[J].当代医学，2012，18(8)：152-153.

[2]毛雄英，王卫华，沈广宇，等.引物延伸/变性高效液相色谱检测HBV拉米夫定耐药突变[J].临床检验杂志，2010，28(3)：11-13.

[3]中华医学会肝病学分会、中华医学会感染病学分会.慢性乙型肝炎防治指南[J].中华内科杂志，2006，45(2)：162-170.

[4]刘岩红，钱方兴.HBsAg和HBeAg定量检测对乙型肝炎抗病毒治疗的评估[J].肝脏，2011，16(4)：326-327.

[5]王贵强.应重视HBeAg阴性慢性乙型肝炎的诊断和治疗[J].中华内科杂志，2005，44(9)：643.