富氢盐水对子痫前期大鼠的保护作用探讨

邓琳琳 赵萍

子痫前期是妊娠期特有的一种疾病，属于妊娠高血压疾病的范畴。此病发病率高，并发症多而且严重，是引起母婴死亡的主要原因之一[1]。全身小血管痉挛引起的血管损伤是本病病理变化的基础，因此如何减少血管损伤是预防和治疗子痫前期及其并发症的关键。

氢气一直都被视为是一种生理性惰性气体，直到2007年Nature上有报道明确氢气可以选择性地清除羟自由基和过氧亚硝基阴离子后[2]，越来越多的研究表明氢气除了抗氧化作用外还具有抗炎、抑制细胞凋亡、抗血管增生的作用[3-4]。为探讨氢气是否可以减轻子痫前期患者的血管损伤，本文通过富氢盐水对子痫前期大鼠的影响进行了研究，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物的准备 选择成年性成熟SD雌雄大鼠（购自河南省实验动物中心），体重200～260 g，室温20～25 ℃饲养。完全随机法将雌雄大鼠1：1同笼饲养一晚，次日清晨检查，若发现雌鼠阴道口或盛粪盘内发现阴栓，确定为妊娠第0天。妊娠后孕鼠单笼喂养。

1.2 子痫前期大鼠模型的建立及分组 将确定妊娠的30只大鼠随机分为模型组（A组）、富氢盐水组（B组）和对照组（C组），每组10只。除对照组外其余两组自妊娠第7日起连续5 d腹腔内注射L-NAME 250 mg/（kg·d）建立子痫前期模型。以收缩压升高30 mm Hg，尿蛋白大于等于（+）为建模成功。建模同时， B组给予富氢盐水5 ml/kg腹腔灌注，其他两组则注射等量的生理盐水，持续12 d。

1.3 富氢盐水的制备及使用 根据文献[5]提供的方法，将100 ml软塑包装的生理盐水瓶中空气抽尽，接氢气发生器，用一次性输液针头持续注入超纯氢，制备当日即进行大鼠的富氢盐水腹腔灌注。

1.4 检测方法及观察指标

1.4.1 血压 用大鼠尾套无创血压心率仪进行尾动脉血压测量，每日连续测3次取其平均值。

1.4.2 24 h尿蛋白定量 将大鼠置于代谢笼内，正常饮食，收集24 h尿液，测量尿液体积，并用全自动生化分析仪测定尿蛋白浓度，计算24 h尿蛋白量。

1.4.3 血清VEGF检测 妊娠第12天、第20天，通过大鼠尾静脉穿刺抽血1 ml，2000～3000 r/min离心后留取上清-20 ℃保存。ELISA法检测VEGF含量（试剂盒购于上海沪宇生物有限公司）。

1.5 统计学处理 采用SSPS 11.0软件包进行分析，计量资料以（±s）表示，采用t检验，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 血压及24 h尿蛋白含量 A组和B组平均动脉压显著高于C组（P<0.001），富氢盐水治疗后，B组血压未发生明显变化（P>0.05），尿蛋白量明显降低（P<0.001），但仍高于健康孕鼠（P<0.01）。见表1。

2.2 血清VEGF含量 富氢盐水治疗后，B组血清VEGF明显升高，高于模型组水平（P<0.05），但是与正常孕鼠相比仍然偏低（P<0.01）。见表1。

表1 各组大鼠血压和24小时尿蛋白含量测定结果

3 讨论

子痫前期的发病机制至今尚不明确，因此减轻临床症状、减少并发症成为降低其危害的关键。大家公认子痫前期主要病理改变是血管内皮细胞的损伤，最终引起血管内皮的氧化应激增强，炎性介质释放增多，导致组织损伤[6]。

氢气溶解度达到饱和的生理盐水即为富氢盐水（氢浓度约为0.6 mmol/L）[7]，研究发现，它可以减少缺血缺氧脑组织的氧化应激反应，减少相关炎性因子。近来越来越多的实验证实，氢气可以通过抗氧化、抗炎、抑制细胞凋亡对器官或组织的缺血再灌注进行保护[8-9]。

VEGF是内皮细胞特异性有丝分裂原，被认为是最重要的血管生成因子。它可以刺激血管内皮细胞的生长和趋化，从而促进新生血管的形成。研究表明，子痫前期患者血清和胎盘中的VEGF均明显降低[10]。利用富氢盐水对子痫前期模型大鼠进行治疗，可明显降低其尿蛋白含量，升高血清VEGF，证明富氢盐水可以通过提高VEGF的水平来保护子痫前期大鼠的血管，减轻蛋白的渗出。另一方面，由于富氢盐水可以帮助血管内皮进行修复，因此，对于子痫前期所引起的并发症同样有辅助治疗作用。

但是值得一提的是，目前富氢盐水的制作技术尚未成熟，临床应用也受到了相应的限制，氢离子是否会对子代产生不良影响还未知，因此将富氢盐水应用于对妊娠期高血压疾病患者的治疗还需要更多的努力。

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