非小细胞肺癌患者胸腔积液中VEGF联合CYFRA21-1、CEA检测的临床意义

朱颖 文昱婷 杨旸 杨健 张秀伟

近年来，肺癌的发病率居高不下，恶性胸腔积液主要是由肿瘤侵犯胸膜所致，故及时诊断并治疗十分重要，然而对于临床医师来说，恶性胸腔积液的诊断仍是棘手的难题。早期诊断与肺癌的治疗及预后关系密切，且不同的病理类型对治疗的反应各不相同。寻找胸腔积液中高敏感性、高准确性的标志物来早期诊断良恶性胸水仍然是临床研究的热点。本研究联合检测胸水中血管内皮生长因子(VEGF)、细胞角蛋白片段21-1(CYFRA21-1)和癌胚抗原(CEA)水平，初步探讨其在非小细胞肺癌(NSCLC)早期诊断中的临床价值。

1 材料和方法

1.1 一般资料 选取2011年1月至2012年6月在我院确诊恶性胸腔积液48例，其中男32例，女16例，年龄51～89岁，平均(68.1±3.5)岁，均经胸腔积液脱落细胞学、纤维支气管镜病理活检或经皮肺穿刺细胞学等方法得到病理学证实。组织学分型:腺癌41例，鳞癌7例。均为初诊患者。所有病例排除其他癌症，采取标本之前未行抗癌治疗。

1.2 试剂和仪器 VEGF试剂盒购自美国ADL公司;CYFRA21-1试剂盒购自芬兰Wallac AB公司;CEA试剂盒为瑞典IDL Biotech AB公司产品。酶标仪为美国Biotek synergy2多功能酶标仪。

1.3 方法 常规无菌条件下穿刺抽取NSCLC患者胸水，留取样本10 ml，1500 r/min离心10 min，分离上清液，置于－40℃冰箱保存待测。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定胸水中 VEGF、CYFRA21-1、CEA水平，具体操作严格按照试剂盒说明书进行。

1.4 统计学分析 本组数据统计使用SPSS 16.0，计数资料采用卡方检验或Fisher精确概率法，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 48例NSCLC患者中，胸水中VEGF、CYFRA21-1和CEA水平检测阳性率分别为52.1%(25/48)、31.3%(15/48)和66.7%(32/48)。

2.2 联合检测胸水VEGF、CYFRA21-1和CEA阳性表达情况与NSCLC患者临床病理关系 48例NSCLC患者胸水中，VEGF单阳性表达在不同年龄、性别和细胞分化程度的患者中无统计学差异，但是与肿瘤临床分期、是否发生淋巴结转移和远处转移有关(P＜0.05)。VEGF+CYFRA21-1或VEGF+CEA联合检测阳性率则与肿瘤细胞分化程度、临床分期及有无淋巴结转移和远处转移等方面均有显著相关性(P＜0.05或P＜0.01)。见表1。

表1 VEGF、CYFRA21-1和CEA联合检测阳性率比较(n，%)

3 讨论

恶性胸腔积液是由恶性肿瘤胸膜转移或原发于胸膜的恶性肿瘤所致，是NSCLC常见的并发症之一。胸水细胞学检查对其诊断特异性较高，但敏感性低，阳性率在30%左右［1］，胸膜活检存在创伤性，具有较大的盲目性，阳性率一般为40% ～75%［2］，而胸腔镜检查创伤大，且对胸腔积液的早期诊断价值还有待商榷，均不能满足临床的需要［3-4］。恶性胸腔积液的产生，通常意味着疾病的严重性和患者较短的生存期，因此，尽早明确诊断可为治疗赢得时间。CEA是常用的肿瘤标记物，在临床广泛应用，但也存在敏感性较低的缺点，研究和寻找有关恶性胸腔积液诊断新的手段和方法已成为当前肿瘤临床和基础研究的重点。

肿瘤血管新生是肿瘤生长和转移的基础，血管通透性的增加是胸腔积液形成的主要机制之一，VEGF是肿瘤组织中促进血管病理性形成的介导物，具有强大的促进血管内皮细胞分化、增殖，诱导新生血管形成，并可促进微血管通透性增强，与肿瘤细胞的分化、生长及浸润密切相关，其水平越高，提示肿瘤越趋于恶性［5］。现已经证实，在肺癌等多种肿瘤组织中有VEGF及其受体的表达，瘤体组织VEGF表达水平与其微血管密度及恶性程度成正相关，并明显高于非肿瘤组织。VEGF与肺癌的血管形成、癌细胞增殖、病变侵袭程度、远处转移及预后关系密切［6］。对多种肿瘤的研究已表明，有VEGF mRNA高表达的病人5年存活率低，认为与多种组织类型的肿瘤细胞分泌VEGF，通过旁分泌生长刺激来引发内皮细胞增殖及血管形成，使得肿瘤进展有关［7］。

细胞角蛋白(CKs)是分布于上皮细胞的中间纤维，其表达方式反映了上皮细胞分化的不同途径，主要应用于胃肠道、乳腺、前列腺及肺的恶性肿瘤。近年来，CKs作为检测循环癌细胞的指标，越来越得到人们的重视。CYFRA21-1是细胞角蛋白19的片段，为细胞骨架标记物，当肿瘤细胞发生溶解或坏死时，将细胞角蛋白释放入体中，其浓度及敏感性随病情进展而升高。在NSCLC患者中，各种类型的肺癌CYFRA21-1均可升高，尤其是鳞癌升高更显著［8-9］。

本文研究结果显示，NSCLC患者胸水中VEGF、CYFRA21-1和CEA的阳性检出率分别为52.1%、31.3% 和 66.7% ，与国内外报道接近［6，8］。

相关研究表明，在肺癌组织中 VEGF和 CYFRA21-1均高表达，与肺癌临床分期有关，可作为预测肺癌预后的一项指标。在胸腔积液中，VEGF与CYFRA21-1表达也相应增高，但两者联合检测对NSCLC恶性胸腔积液的临床研究较少。本研究通过VEGF联合CYFRA21-1、CEA检测在NSCLC患者胸水中的表达，发现其阳性表达率在NSCLC患者的不同细胞分化程度、临床分期及淋巴结转移和远处转移等方面均有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)，为临床寻找新的快速、有效的诊断指标，为提高NSCLC恶性胸腔积液的早期诊断和病情判断提供了参考，同时进一步证明了这些指标单一和联合应用时与NSCLC临床分期及预后的相关性。

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