妊娠期高血压疾病患者胎盘中MMP-9、TIMP-1和EMMPRIN的表达及意义

徐 虹，刘 芳

（1.浙江省绍兴县中心医院妇产科，浙江绍兴312030；2.浙江省绍兴市人民医院病理科，浙江绍兴312000）

·论 著·

妊娠期高血压疾病患者胎盘中MMP-9、TIMP-1和EMMPRIN的表达及意义

徐 虹1，刘 芳2

（1.浙江省绍兴县中心医院妇产科，浙江绍兴312030；2.浙江省绍兴市人民医院病理科，浙江绍兴312000）

目的研究妊娠期高血压疾病患者胎盘中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）9、基质金属蛋白酶组织抑制剂（tissue inhibitor of matrix metalloproteinase，TIMP）1以及细胞外基质金属蛋白酶诱导剂（extracellularmatrixmetalloproteinase inducer，EMMPRIN）的表达，探讨其与疾病的关系。方法采用免疫组织化学SP法和二步法对40例正常足月妊娠妇女以及55例妊娠期高血压疾病患者（其中妊娠期高血压患者15例，轻度子痫前期患者25例，重度子痫前期患者15例）胎盘中MMP-9、TIMP-1、EMMPRIN的表达进行检测。结果MMP-9的表达，轻度子痫前期组明显低于正常妊娠组，重度子痫前期组低于高血压组，轻度子痫前期组低于正常妊娠组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。TIMP-1的表达，子痫前期组高于正常妊娠组和高血压组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。EMMPRIN的表达，子痫前期组明显低于正常妊娠组，重度子痫前期组低于轻度子痫前期组及高血压组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论妊娠期高血压疾病患者胎盘中滋养细胞MMP-9、EMMPRIN表达下降，TIMP-1表达升高，且其表达水平的高低可能与病情严重程度有关。

高血压，妊娠性；胎盘；基质金属蛋白酶9

妊娠高血压疾病是妊娠期特发的疾病，严重危及母婴安全，其病因和发病机制至今尚不明确。近年来研究［1］认为，妊娠期高血压疾病与胎盘生理性血管重铸障碍有关。在胎盘的形成过程中，降解细胞外基质是滋养细胞向母体子宫内膜有节制的浸润的重要环节，降解细胞外基质的一类重要酶便是基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）。本研究通过检测MMP-9、基质金属蛋白酶组织抑制剂（tissue inhibitor of Matrix metalloproteinase，TIMP-1）和细胞外基质金属蛋白酶诱导剂（extracellular matrix metalloproteinase inducer，EMMPRIN，又称CD147）在正常妊娠和妊娠高血压疾病患者胎盘组织中的表达，探讨这3种因子与该疾病的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料：收集2010年8月—2011年8月浙江省绍兴县中心医院住院行剖宫产术的妊娠高血压疾病患者55例（诊断标准按照人民卫生出版社出版的第7版《妇产科学》［2］），其中，妊娠高血压患者15例，轻度子痫前期患者25例，重度子痫前期患者15例。同时收集同期住院的正常孕妇40例为对照组。2组孕妇均为初产、单胎，其年龄及平均孕周等一般情况差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 标本采集：胎盘娩出后，立即取胎盘母面两母体叶之间组织约1.5cm3大小，避开出血及钙化区，立即置于福尔马林液中固定，石蜡包埋，5μm连续切片。

1.3 指标检测：采用免疫组织化学二步法测定胎

盘组织中MMP-9、TIMP-1的表达，鼠抗人MMP-9免疫组织化学单克隆抗体和兔抗人TIMP-1免疫组织化学多克隆抗体购自福州迈新生物技术开发有限公司。采用SP法检测EMMPRIN，鼠抗人EMMPRIN免疫组织化学单克隆抗体购自SANTA CRUZ生物技术公司。

1.4 结果判定：在显微镜下全面观察每张切片，以细胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性细胞，并摄影保存，利用Image pro-plus6.0图像分析软件，进行图像分析。以胎盘组织中滋养细胞作为目标染色区域，测定这个区域的累积吸光度和这个区域的面积，两者相除，即得平均吸光度。将平均吸光度作为评估蛋白表达的强度。每例对象选1张切片，每张切片随机选3个视野，每个视野测定3次，取均值。

1.5 统计学方法：应用SPSS16.0统计软件进行数据处理，计量资料以±s表示，分别采用单因素方差分析和q检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

MMP-9、TIMP-1、EMMPRIN的表达，主要分布在滋养细胞和绒毛间质血管壁中。MMP-9的表达，子痫前期组明显低于对照组，重度子痫前期组低于高血压组，轻度子痫前期组低于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。TIMP-1的表达水平，子痫前期组高于对照组和高血压组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。EMMPRIN的表达水平，子痫前期组明显低于对照组，重度子痫前期组低于轻度子痫前期组及高血压组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 各组产妇胎盘滋养细胞MMP-9、TIMP-1、EMMPRIN的表达水平Table 1 The expression of MMP-9，TIMP-1 and EMMPRIN in placenta of each group（x¯±s）

3 讨 论

妊娠高血压疾病的病因研究，近来多认为系胎盘源性，继发于胎盘着床过浅，即滋养细胞侵蚀过浅导致的胎盘灌注不足、缺血［3］。人类胎盘的形成是滋养细胞黏附于蜕膜化的子宫内膜，与子宫螺旋小动脉接触，继而侵入血管腔，分化并替换血管内皮细胞，促成血管低阻高流量的形态变化，从而保证胎儿的营养需要，即所谓的“螺旋小动脉生理重铸”。有研究［3］表明，妊娠高血压疾病患者螺旋动脉生理变化仅限于动脉的蜕膜段，30%～50%胎盘蜕膜段螺旋动脉内甚至没有滋养细胞的侵入，由此致子宫动脉管径较小，胎盘灌注不足，从而发病［4］。有学者［5］认为正常妊娠有赖于促进侵蚀性基因和抑制侵蚀性基因对滋养细胞的调控平衡，如果平衡被打破，则导致滋养细胞侵蚀能力下降，子宫螺旋小动脉重铸障碍，胎盘缺血缺氧，最后导致妊娠高血压疾病。

组织或细胞的侵蚀性主要表现为降解细胞外基质的能力大小，MMP是一组结构和功能相关的锌离子依赖性内肽酶，至少由20种能降解细胞外基质的酶类组成。它几乎能降解细胞外基质的所有成分，如胶原蛋白、蛋白多糖、纤维结合蛋白等。MMP-9是MMP家族中的重要一员，它主要参与降解Ⅳ型胶原，而Ⅳ型胶原是细胞外基质最主要的成分，所以，MMP-9是常被用来作为组织细胞侵蚀性的标志物之一。本研究结果发现MMP-9在子痫前期组的表达明显低于正常妊娠组，重度子痫前期组的表达明显低于高血压组，这表明妊娠期高血压疾病患者胎盘中滋养细胞MMP-9表达下降，其表达的高低还可能与病情严重程度有关。

TIMP是近年来发现的MMP的天然抑制剂。迄今发现有TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3、TIMP-4共4种。TIMP-1与MMP-9有很强的亲和力，它能与MMP-9以1∶1的比例形成复合物，从而抑制其活性。最早的Kolben等［6］用 ELISA法检测胎盘提取液中TIMP-1含量明显高于正常孕妇。本研究子痫前期组TIMP-1的表达水平高于正常妊娠组，这与国内张弘等［7］的研究相一致，表明妊娠期高血压疾病患者胎盘中滋养细胞TIMP-1表达升高。

EMMPRIN则是一类属于免疫球蛋白的超家族跨膜糖蛋白，它是一种多功能蛋白，不仅能上调MMP的表达，还能促进血管生长，参与免疫调节和组织重建等［8］。本研究中EMMPRIN在子痫前期组的表达明显低于正常妊娠组，重度子痫前期组的表达低于高血压组，这表明妊娠高血压疾病患者胎盘中滋养细胞EMMPRIN表达下降，其表达的高低可能与病情严重程度有关。

综上所述，妊娠高血压疾病的发生可能与滋养细胞侵蚀性相关蛋白MMP-9、TIMP-1、EMMPRIN的表达水平高低有关，而且表达水平的高低可能与病情的严重程度有关。

［1］林其德.妊娠高血压综合征病因学研究进展和展望［J］.中华妇产科杂志，2003，38（8）：471-473.

［2］乐杰.妇产科学［M］.7版.北京：人民卫生出版社，2008：92-99.

［3］GALLERY ED，CAMPBELL S，ILKOVSKI B，et al.A novel in vitro co-culture system for the study of maternal decidual endothelial cell-trophoblast interaction in human pregnancy［J］.Br JObstet Gynaecol，2001，108（6）：651-653.

［4］MERVIEL P，EVAIN-BRION D，CHALLIER JC，et al.The molecular basis of embryo implantation in humans［J］.Zentralbl Gynakol，2001，123（6）：328-329.

［5］DE JAGER CA，LINTON EA，SPYROPOULOU I，et al.Matrix metalloprotease-9，placental syncytiotrophoblast and the endothelial dysfunction of pre-eclampsia［J］.Placenta，2003，24（1）：84-91.

［6］KOLBEN M，LOPENS A，BLASER J，et al.Proteases and their inhibitors are indicative in gestational disease［J］.Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol，1996，68（1/2）：59-65.

［7］张弘，林其德，乔宠.子痫前期患者滋养细胞浸润相关基因mRNA及蛋白表达的研究［J］.中华妇产科杂志，2006，41（8）：509-513.

［8］KAZUKI N，HIROSHI I，KAORI K，et al.Emmprin：matrix metalloproteinase modulator and multifunctional cell recognition molecule that plays a critical role in cancer progression［J］.Pathology International，2006，56（7）：359-367.

（本文编辑：赵丽洁）

EXPRESSION OF MATRIX METALLOPROTEINASE 9，TISSUE INHIBITOR OF MATRIX METALLOPROTEINASE 1 AND EXTRACELLULAR MATRIX METALLOPROTEINASE INDUCER IN PLACENTA W ITH HYPERTENSIVE DISORDER COMPLICATING PREGNANCY

XU Hong1，LIU Fang2
（1.Department of Obstetrics and Gynecology，Shaoxing County Hospital，Zhejiang Province，Shaoxing 312030，China；2.Department of Pathology，Shaoxing People's Hospital，Zhejiang Province，Shaoxing 312000，China）

Objective To study the expression and significance of matrix metalloproteinase（MMP）-9，tissue inhibitor of matrix metalloproteinase（TIMP）-1 and extracellular matrix metalloproteinase inducer（EMMPRIN）in placenta with hypertensive disorder complicating pregnancy.M ethods Immunohistochemical method was used to detect the expression of MMP-9，TIMP-1 and EMMPRIN in placenta from 40 cases normal term pregnancy women and 55 cases of pregnancy women with hypertensive disorder complicating pregnancy（including 15 cases of pregnancy women with hypertension，25 cases of pregnancy women withmild preeclampsia and 15 cases of pregnancy women with severe preeclampsia）.Results The Expression of MMP-9 in placenta of preeclampsia was significantly lower than that in normal term pregnancy，which in severe preeclampsia group was significantly lower than in hypertension group，and in mild preeclampsia group was significantly lower than in the normal group（P＜0.05）.Expression of TIMP-1 in placenta of preeclampsia was significantly higher than normal term

hypertension，pregnancy-induced；placenta；matrixmetalloproteinase 9

R714.246

A

1007-3205（2013）03-0284-03

2012-07-31；

2012-08-21

徐虹（1976-），女，浙江绍兴人，浙江省绍兴县中心医院主治医师，医学硕士，从事妇产科疾病诊治研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2013.03.013

pregnancy and hypertension group（P＜0.05）.Expression of EMMPRIN in placenta of preeclampsia was significantly lower than that in normal term pregnancy，which in severe preeclampsia group was significantly lower than that in mild preeclampsia group and hypertension group（P＜0.05）.Conclusion

The lower expression of MMP-9 and EMMPRIN，and higher expression of TIMP-1 in placenta may contribute to the development of hypertensive disorder complicating pregnancy.