人参煎剂对一次力竭游泳小鼠血清IFN－γ、IL－4表达的影响

马闪闪 马贤德 孙宏伟 陈文娜 陈殿学

辽宁中医药大学，辽宁 沈阳 110847

竞技运动和全民健身是我国体育事业的发展战略，尤其在08年北京奥运会之后，运动和健康成为全民关注的热点话题之一。但是，由于人们对运动科学缺乏足够的认识，很多情况下，运动不但没有增强人们的体质反而对机体的免疫功能造成了不良的影响。例如，运动员在大负荷训练和比赛期间很容易因免疫抑制患各种感染疾病;“全民健身”热潮中，人们对运动量和形式缺乏科学合理的安排，损害免疫系统;当前社会生活节奏加快，长时间高强度紧张工作使机体免疫系统处于抑制状态，从而对某些疾病易感。研究表明:一次高强度长时间运动引起免疫系统功能的暂时性抑制［1］。因而，预防运动性免疫抑制和促进运动后免疫功能恢复是运动免疫学研究的焦点之一。运动免疫增强营养补剂的合理使用在一定程度上解决了这一难题，国内外越来越多的学者把运动营养补剂的开发重点转移到我国传统中药。

人参属于传统滋补强壮类中药，具有大补元气、固脱生津的功用，在提高机体免疫力方面有着独特的疗效［2］。本实验尝试用人参煎剂调节力竭运动后的免疫抑制症状，在运动后不同时间测量血清IFN－γ和IL－4水平，观察小鼠免疫功能的变化，探讨人参煎剂能否改善一次力竭运动导致的免疫抑制，为人参煎剂在竞技体育和全民健身中发挥有效的免疫调节作用提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 洁净级健康昆明种小鼠96只，雌雄各半，体重 (20±2)g，购于辽宁中医药大学动物中心，分笼饲养，自然光照，自由饮水进食。

1.1.2 人参煎剂制备 人参选用辽宁桓仁产6年生晒参，切片，浸泡1小时，传统方法煎煮3次，过滤、合并、浓缩至50%浓度，装入玻璃瓶中，低温冷藏备用。

1.2.3 实验试剂和仪器 电子天枰，型号JY5002，上海精密科学仪器有限公司生产;酶标仪，型号Anthos2010，奥地利Anthos Labtec Instruments生产;超速离心机，型号DU PONT/SORV－LL，OTD－558，美国生产;小鼠 IL－4 ELISA试剂盒，购自上海越研生物科技有限公司，生产批号DRE61041;小鼠IFN－γ ELISA试剂盒，购自上海越研生物科技有限公司，生产批号DRE61042。

1.2 试验方法

1.2.1 分组方法 96只鼠随机分为以下几组:模型组(M)40只，模型+人参组 (MG)40只，按照取材时间不同平均分成5组，即力竭游泳后即刻组 (M1、MG1)、6h组(M2、MG2)、24h组(M3、MG3)、48h组 (M4、MG4)、72h组(M5、MG5)。另设空白对照组(B)、人参对照组(G)，每组8只。

1.2.2 给药方法 小鼠适应性喂养一周后，G和MG组灌服人参煎剂0.3ml/d/只，B和M组灌服等量生理盐水，连续14天。

1.2.3 造模方法 最后一次给药结束后1h，M和MG小鼠进行一次无负重游泳直至力竭。游泳池水深约30cm，温度控制在 (32±2)℃。当小鼠浮在水面不动时，轻轻搅拌周围水面，迫使小鼠持续运动，游泳完毕后用纱布吸干小鼠身上的水，再用吹风机吹干，避免小鼠感冒。

力竭判断标准参照Dawson法:游泳动作缓慢，明显失调，沉入水中10s不能露出水面，捞出后翻正反射消失［3］。1.3 血清IFN－γ和IL－4含量测定 具体操作方法参照试剂盒说明书。

1.4 数据统计 实验数据用SPSS19.0进行统计处理，组内比较采用单因素方法分析，组间比较采用独立样本T检验，统计结果用“均数±标准差 (±s)”表示。

2 结果与分析

表1 各组小鼠血清IFN－γ、IL－4及IFN－γ/IL－4的表达比较

2.1 小鼠血清IFN－γ水平变化 与B比，M1、M2、M3、M4、MG1、MG2、MG3降低 (P＜0.01或P＜0.05)。可见，一次力竭游泳使小鼠血清IFN－γ含量降低，M组小鼠72h恢复至正常水平，MG组小鼠48h恢复至正常水平。

在相同时间点:MG小鼠血清IFN－γ含量普遍比M高，MG4小鼠血清IFN－γ含量明显高于M4，P＜0.05。可见，人参煎剂可提力竭高运动后小鼠血清IFN－γ水平。

2.2 小鼠血清IL－4水平变化 与B比，M2明显增高，P＜0.05。可见，一次力竭游泳后6h小鼠血清IL－4含量一过性增高，并很快恢复。

在相同时间点:M小鼠血清IL－4含量普遍高于MG，其中M2与MG2差异明显，P＜0.05。可见，人参煎剂可维持小鼠血清IL－4在正常水平表达。

2.3 小鼠血清IFN－γ/IL－4比值变化 与B比:M1、M2、M3、M4、MG1、MG2比值降低 (P＜0.01或 P＜0.05);MG4、MG5比值增大，分别为P＜0.05和P＜0.01。可见，M小鼠一次力竭游泳后72h恢复正常值;MG小鼠24h恢复正常值，48h和72h比值大于B组。人参煎剂可促进小鼠IFN－γ/IL－4恢复正常水平，恢复速度明显快于M组小鼠。

在相同时间点比较:M组各时间点IFN－γ/IL－4比值均高于MG组 (P＜0.01或P＜0.05)。可见，灌服人参煎剂可使小鼠IFN－γ/IL－4比值增大。

3 讨论

免疫功能是人体重要的防御机能，也是人体体质的代表性指标之一，运动对免疫功能有十分重要的影响，但并不是所有的运动都能增强人体的免疫功能。国内外大量文献表明［3－5］，急性大强度运动和力竭性运动都会使机体的免疫功能不同程度抑制，从而对某些疾病易感。因此，对运动后免疫抑制调理的研究是当今运动免疫学研究的焦点之一。目前常用的调理措施有［6－7］:①营养调理，包括基本营养素和功能因子两大类。②自我保护调理，主要措施有多样化平衡膳食、生活规律、睡眠充足、防止过度训练等。③传统中医药调理。中药对免疫系统具有双向调节作用，并且中药的“整体调节作用”能调动机体的免疫功能和激发免疫应答，被越来越多应用于运动营养补剂的开发研究。本实验的目的是探讨人参煎剂能否缓解力竭性运动导致的运动性免疫抑制，能否促进免疫功能尽快恢复正常状态，为改善力竭运动导致的免疫功能抑制寻找科学有效的调理方法，同时为人参在运动营养方面的开发提供科学依据。

在免疫系统中，IFN－γ和IL－4是一对相互调节的重要细胞因子，IFN－γ是Th1细胞分泌的标志性细胞因子，IL－4是Th2细胞分泌的标志性细胞因子，IFN－γ和IL－4既相互抑制又自身促进，除了维持自身的平衡和稳定，对维持Th1/Th2的平衡也起重要作用［5］。本实验结果表明，一次力竭游泳可使小鼠血清IFN－γ含量降低，IL－4含量一过性升高，IFN－γ与IL－4比值下降，Th1/Th2向Th2漂移，与Simth［8］报道的“过度运动时，机体免疫功能受到抑制，Th1/Th2比值下降”一致。在免疫功能恢复过程中，灌服人参煎剂的小鼠在力竭游泳后各项指标恢复速度更快，从而缩短了由于力竭运动造成的的免疫抑制时间。其中，MG组小鼠IFN－γ/IL－4比值在力竭游泳后48h和72h高于B和G组，这可能与运动后机体的超量恢复有关，有待于进一步研究探讨。从相同时间点取材结果来看，G和MG组小鼠免疫功能明显好于B和M组小鼠，这表明人参煎剂有效地缓解了由大运动量所致的免疫功能低下状况。

综上所述，由本实验可得出以下结论:人参煎剂可促进小鼠血清IFN－γ和IL－4含量恢复至正常水平，缩短力竭运动后的免疫抑制时间并预防力竭运动造成的免疫功能低下，对力竭运动造成的免疫功能低下具有有效的预防和调节作用。

［1］徐勇灵，林建棣.运动影响免疫系统的机制及其研究的展望［J］.解放军体育学院学报，2003，22(2):77－79.

［2］张均田.人参研究的最新进展［J］.江苏大学学报 (医学版)，2009，19(3).

［3］周晶.枸杞多糖对力竭游泳运动小鼠免疫功能的影响［J］.辽宁中医药大学学报，2009，11(8):234－236.

［4］Knowle SR，KeepingH，Graeber T，et al.Cytokine Control of PMNP hagocytosis:Regulatory Effects of Hypoxemia and Hypoxemia Reoxygena－tion［J］.Am J Physiol，1997，272(4Pt1):1352－1364.

［5］徐唯.运动导致IFN－γ/IL－4失衡与上呼吸道感染 (URTI)［J］.现代预防医学，2009，36(16):3097－3098.

［6］王瑞元.运动生理学［M］.北京:人民体育出版社，2007:471－472.

［7］张爱芳.实用运动生物化学［M］.北京:北京体育大学出版社，2007: 396－398.

［8］Lakier Smith L.Overtraining，excessive exercise，and altered immunity:is this a T helper－1 versus T hel－per－2 lymphocyte response?［J］.Sports Med，2003，33(5):347－364.