一次性力竭运动后12h内大鼠肝脏NO含量的变化

李晒晒，张荷玲

1 前言

一氧化氮(NO)在生物体内具有重要作用，其本身是一种难溶于水的脂溶性气体，在哺乳动物体内大部分细胞中都可以合成，如神经细胞、内皮细胞、肝细胞等[1-2]。NO参与生物体内多种重要的生理过程，可以维持生物体内细胞与组织正常生命活动，其生理作用主要表现为松弛血管平滑肌、抑制血小板凝集、防止心肌肥厚等[3-5]。但如果NO生成过多或过少都会影响其对机体的正常生理效应。如果体内NO过多，可能会诱发人类某些疾病，如糖尿病、中风、循环性休克等。若NO过少，也会使生物体内某些生理功能丧失，从而产生一系列疾病，如高血压、冠心病、急性心肌梗死等[6-8]。不同类型的运动会使机体各细胞组织内NO含量产生不同的影响[9-11]。肝脏是人体的化学加工厂，是人体最大的消化腺，参与人体消化、免疫、解毒等过程，对人体代谢机能、免疫机能等都有着非常重要的作用。因此通过研究力竭运动后大鼠肝脏NO含量的变化，根据NO的生理病理作用，可以为运动训练提供理论依据。

2 材料与方法

2.1 材料

2.1.1 模型建立、饲养与分组

由北京维通利华生物科技有限公司提供152只雌性清洁级SD大鼠，200-220克左右，每八只一笼进行饲养，适应性喂养三天。自由饮食和饮水，自然光照，每两天换一次垫料。饲养温度为(24±2℃)，相对湿度65%±5%。全部饮食高脂饲料。高脂饮食喂食8周后，选出24只符合标准的肥胖抵抗大鼠，随机分组，每组6只，建立肥胖抵抗大鼠游泳模型。适应性游泳三天，每天15分钟。第四天进行一次性力竭运动。每组分别于一次性力竭运动实验结束后即刻，休息2h后，休息6h后，休息12h后取材。

常规饲料59%、20%猪油、10%鸡蛋黄、9.5%蔗糖和1.5%食盐。常规饲料采用山西医科大学实验动物中心的基础饲料。

实验大鼠分组分为对照组和实验组。对照组分为正常对照组，实验组分为力竭即刻组、力竭2h组、力竭6h组、力竭12h组。

2.1.2 运动训练方式

对照组不运动，运动组适应性游泳三天，每天15分钟。第四天进行一次性力竭运动(力竭标准：大鼠下沉10秒不能浮上水面为力竭)。即刻组力竭后即刻处死。其余组力竭后按实验方案禁食相应时间处死。

游泳池为圆形塑料桶，水温为32±2℃，每八只大鼠在一桶内进行自由游泳。游泳时间为每天中午12:30-14:00，每周游泳六天，每次90分钟。所有大鼠先进行适应性游泳运动三天，依次为15分钟，30分钟，60分钟，第四天开始正式的游泳运动。

每周测量体重、体长、腹围。计算Lee’s指数=体重(g)^(1/3)x1000/体长(cm)。

2.2 实验方法

将力竭运动后处死的大鼠进行解剖，取出其肝脏进行福尔马林固定，之后做石蜡切片，通过免疫组化方法对切片进行染色，在光学显微镜40倍镜下观察切片，对肝脏NO含量进行半定量分析。

3 研究结果

图1 肥胖抵抗组大鼠肝脏中NO变化随处死时间的变化

分组平均值±标准差正常对照组21.833±1.2583力竭即刻组17.300±3.0537 ∗力竭2h组10.625±1.0308 ∗力竭6h组14.875±0.6292 ∗力竭12h组19.833±0.2887

注：*表示P<0.05与正常对照组比较有显著性差异。

图1显示肝细胞NO含量随恢复时间的变化规律：随着一次性力竭恢复时间的增长，肥胖抵抗组大鼠肝脏中NO含量先减少而后逐渐恢复到运动前水平。

表1显示：与正常对照组相比，力竭即刻组、力竭2h组与力竭6h组的NO含量下降且均有显著性差异(P<0.05)；力竭12h组与正常对组相比，NO含量虽然低于正常对照组，但没有显著性差异。说明力竭运动后肝脏NO含量明显降低，且随着恢复时间的变化，NO含量先下降后上升，休息12h后，与正常对照组无显著性差异，说明已经恢复到正常水平。

4 分析讨论

研究显示，NO在调节肝脏内血流、物质代谢、氧化损伤过程中发挥着重要的作用[12]。力竭运动后即刻肝脏NO含量显著下降，24h恢复后NO含量恢复到正常水平[13]。有学者认为，力竭性运动影响NO含量变化的机制可能是：NO的过度生成会引起细胞毒性作用，NO显著减少可能是对机体的一种保护作用[14]。

作为一种血管舒张因子，NO可使血管舒张，增加器官血流量。器官血流量在很大程度上影响运动能力的高低，因此NO对运动员的运动能力有着非常重要的作用。但多数研究者认为，NO在运动过程中血管舒张的作用并不是决定性的，但在恢复期却有着非常重要的作用[15]。

本实验结果显示：一次性力竭运动能够改变大鼠肝脏NO的含量：力竭即刻到力竭后2小时期间大鼠肝脏内的NO含量急剧减少，这可能与NO对机体的保护作用有关；而力竭后6小时到力竭后12小时大鼠肝脏内的NO逐渐恢复到运动前水平，则可能与NO具有扩张血管并维持正常的血流的功能有关。

NO可以通过多种机制在肝脏中发挥其病理生理作用，通过研究力竭运动后大鼠肝脏NO含量的变化，可以为更多运动训练提供理论依据。

5 结论

一次性力竭运动后即刻大鼠肝脏NO含量显著下降，并在12h后恢复到正常水平，力竭运动对肝脏NO含量带来明显影响。这可能与运动后的血液重新分配有关。