李青 董兆稀 赵冰清
摘要目的探讨白首乌粗多糖对小白鼠的抗疲劳及耐缺氧、耐高温能力的影响。方法从白首乌(耳叶牛皮消)中提取粗多糖,将动物随机分为4组,每组10只,分别为对照组,高、中、低剂量组,连续给小鼠灌胃8d后,观察不同剂量对小鼠负荷游泳时间、耐缺氧时间、耐高温时间的影响。结果白首乌粗多糖能显著地延长小鼠负荷游泳时间、耐缺氧时间及耐高温时间。结论白首乌粗多糖对小白鼠抗疲劳及耐缺氧、耐高温能力具有明显的作用。
关键词白首乌;多糖;抗疲劳;耐缺氧;耐高温
中图分类号R2855 文献标识码A 文章编号10002537(2012)05007604
白首乌(CynanchumauriculatumRoyleexWight)系萝摩科(Asclepiadaceae)马利筋亚科(Asclepioideae)鹅绒藤属(Cynanchumlinn)植物,又名耳叶牛皮消、飞来鹤(《植物名实图考》)、老牛冻(湖南,四川[1]).在我国资源丰富,山东、江苏等地有人工栽培,其块根药用,具有补肝肾、强筋骨、益精血、健脾消食、解毒疗疮等功效[12].白首乌总苷对预防动脉粥样硬化斑块形成有一定的作用[34].研究表明,白首乌具有养血益肝、固肾益精、乌须黑发和延年益寿的功效[2,5].现代研究发现白首乌中含有多种有效成分,具有抗肿瘤、保肝护肝降血脂等多方面的药理活性[68].国外的研究也证实了这些药理活性[910]. 1材料和试剂
1.1实验动物
昆明种雄性和雌性小鼠各半(120只,体重(20±2)g),湖南农业大学动物饲养基地提供.
1.2实验试剂与设备
实验所用试剂与设备的名称、厂商及型号见表1.
1.3实验数据处理软件
对所有实验数据进行统计学处理,以均数±标准差(±s)表示,用t检验来分析组间差异的显著性.
2实验方法
2.1多糖的提取分离
2.1.1前处理取白首乌饮片,使用植物粉碎机将其粉碎,得到白色白首乌粉末.将所得白首乌粉末装入圆底烧瓶,按料液体积比1∶3加入85%无水乙醇,90℃水浴加热1h,提取2次,过滤,将所得滤渣风干,得到黄色干粉.
2.1.2提取称取适量上述白首乌黄色干粉,置于圆底烧瓶中,按料水质量比1∶20加入蒸馏水,在100℃的热水浴中冷凝回流浸提2h.冷却后使用离心机3000r/min离心10min,将所得上清液合并.将上清液倒入圆底烧瓶,于90℃温度下使用旋转蒸发仪浓缩.浓缩所得试液加入3倍体积95%乙醇溶液,静置1h后,使用离心机3000r/min离心10min,弃去溶液,将沉淀抽滤.抽滤所得沉淀干燥后即得白首乌粗多糖.
2.2药理实验
2.2.1动物分组120只小白鼠,分为三大组,高剂量组,剂量为150μg/g;中剂量组,剂量为100μg/g;低剂量组,剂量为50μg/g.给药方式为灌胃给药.每一大组小白鼠40只,雌雄各半,体重(20±2)g.并将小白鼠随机分为对照组和3个实验组,每组10只,实验组按剂量用生理盐水稀释,白首乌粗多糖按25μL/g量给药;对照组按等量生理盐水灌胃.此4组连续灌胃8d,于末次灌胃2h后进行实验.
2.2.2负荷游泳实验小白鼠40只,雌雄各半,随机均分4组,每组10只按高剂量组、中剂量组、低剂量组连续给小鼠灌胃8d,实验组按剂量用生理盐水稀释白首乌粗多糖,以25μL/g灌胃,1次/d;对照组按等量生理盐水灌胃.于完成灌胃的小白鼠尾部束一重物(约2g)放入一水深20cm,水温(30±1)℃的玻璃缸内,以小鼠体力耗竭(小鼠头部沉入水中10s不能浮出水面)为指标,记录小鼠生存时间.
2.2.3耐缺氧实验小白鼠40只,雌雄各半,随机均分4组,每组10只按高剂量组、中剂量组、低剂量组连续给小鼠灌胃8d.实验组按剂量用生理盐水稀释白首乌粗多糖,以25μL/g灌胃,1次/d;对照组按等量生理盐水灌胃.将小鼠放入250mL的广口瓶内,每瓶1鼠,瓶内装有10g无水氯化钙,用凡士林涂抹瓶口,盖严密封,立即记时,以呼吸停止(小鼠胸部不起伏)为指标,记录小鼠存活时间.
2.2.4耐高温实验小白鼠40只,雌雄各半,随机均分4组,每组10只按高剂量组、中剂量组、低剂量组连续给小鼠灌胃8d.实验组按剂量用生理盐水稀释白首乌粗多糖,以25μL/g灌胃,1次/d;对照组按等量生理盐水灌胃将小鼠放入50±1℃的恒温箱中的玻璃缸内,以小鼠呼吸停止(小鼠胸部不起伏)为指标,记录小鼠存活时间.
2.2.5统计学处理数据以均数±标准差(±s)表示,用t检验来分析组间差异的显著性.P<0.05认为有统计学意义.
3实验结果
3.1负荷游泳实验
将实验所得高中低剂量组与对照组数据进行比较,得出白首乌粗多糖对小白鼠负荷游泳能力的影响结果,见表2.
4结果与讨论
白首乌多糖对小白鼠的实验研究表明:白首乌多糖能明显提高小白鼠耐力,延长耐缺氧、负荷游泳和耐高温时间,且中剂量组、高剂量组与对照组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01),其作用与剂量大小有关.高、中、低3个剂量组中,存在剂量效应关系,以高剂量组效果最为明显.结果表明,白首乌粗多糖具有抗疲劳、耐缺氧等作用,显示其对延长小白鼠的寿命有着积极意义.今后的研究中,如果能进行增强小白鼠记忆能力等指标的药理实验研究,在白首乌多糖抗衰老作用研究中必将有新的发现.
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