浒苔多糖的提取工艺研究

周秋梅 陈小燕 段定 曾华婷 陈洪

【摘 要】采取水提醇沉法探讨浒苔中多糖的提取工艺，研究温度、时间、料液比三因素对多糖提取的影响。通过单因素和正交试验得到浒苔多糖提取最佳工艺组合为：温度100℃，时间5h，料液比（g/ml）1：40。

【关键词】浒苔多糖；提取工艺

中图分类号： TQ461 文献标识码： A 文章编号： 2095-2457（2018）01-0051-002

【Abstract】The extraction process of polysaccharides from Enteromorpha prolifera was studied by water extraction and alcohol precipitation method.The effects of temperature，time and solid-liquid ratio on the extraction of polysaccharides were studied.The optimal combination of polysaccharides from Enteromorpha polysaccharides was obtained by single factor and orthogonal experiments as follows：temperature 100℃，time 5h，ratio of material to liquid（g/ml）1：40.

【Key words】Enteromorpha polysaccharides；Extraction process

浒苔（Enteromorpha）属于绿藻门、绿藻纲、石莼目、石莼科浒苔属藻类植物，是重要的经济海藻，也是一种海洋中药。浒苔在农业、食品、化工、医药等行业被广泛应用[1]。充分开发利用丰富的浒苔资源是改善生态环境和海藻综合利用的重要课题。浒苔多糖的提取方法有多种[2]，但水提醇沉法是多糖提取的传统方法，该方法所使用的试验设备简单，操作方便，准确度高，成本低廉，一次性投入较小，容易实现工业化生产。本实验中采用水提醇沉法探讨了浒苔多糖的提取工艺，通过单因素和正交试验，比较提取时间、料液比和温度对多糖提取率的影响，确定了浒苔多糖提取的最佳工艺，为开发和利用浒苔多糖提供理论参考。

1 实验部分

1.1 材料、仪器及试剂

材料：浒苔，浙江宁波，干燥野生浒苔。

试剂：葡萄糖、重蒸酚、95%乙醇、浓硫酸等。

仪器：AUY120型电子天平，SHZ-DⅢ型循环真空泵，UV-2012PCS紫外分光光度计，DF-1O1S型集热式恒温磁力搅拌器。

1.2 试验方法

1.2.1 浒苔多糖提取工艺流程：

浒苔5.0g干燥粉碎→水提→抽滤得滤液→真空浓缩→加95%乙醇醇沉→抽滤得滤液→真空浓缩→浒苔多糖→用蒸馏水稀释至料液比对应体积→澄清液（备用）

1.2.2 提取液多糖含量测定

多糖含量测定采用苯酚-硫酸法[3]。

以葡萄糖为标样，以葡萄糖质量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线，用上法测定，得回归方程为y=17.123x+0.0065，r=0.9997。

1.2.3 浒苔多糖提取率的测定及计算

取备用的澄清液1ml于10ml容量瓶中加蒸馏水定容，取1ml稀释液，于490nm处测定其吸光度，根据以下公式计算出多糖提取率。式中：C为根据标准曲线回归方程计算得到的样品多糖浓度（mg/ml），V为提取液总体积（ml），M为浒苔质量（g），10为1ml提取液稀释倍数，1000为mg与g的单位换算率。

多糖提取率=■×100%

2 结果与讨论

2.1 浒苔多糖提取单因素实验

2.1.1 温度对浒苔多糖提取率的影响

料液比（g/ml）1：50，时间4h，探讨提取温度为60、70、80、90、100℃，5个不同水平对浒苔多糖提取率的影响。多糖提取率（%）分别为1.182，1.378，1.843，2.016，2.085。由此可知，多糖提取率随着温度的上升而增加，当温度达到100℃时多糖提取率为2.085，此时提取率比60℃时提高了76.40%，可见温度对多糖提取率有显著的影响，温度100℃时提取率最佳。随温度的增加，提取率虽有提高，但逐渐放缓，且温度增加会增加成本。综合考虑，本实验选择温度（℃）80、90、100为正交试验因素。

2.1.2 时间对浒苔多糖提取率的影响

料液比（g/ml）1：50，温度100℃，探讨提取时间（h）为1、2、3、4、5 五个不同水平对浒苔多糖提取率的影响。多糖提取率（%）分别为1.534，1.538，1.964，2.125，1.673。由此可知，提取时间在4h时提取率达到最大值2.125，此时提取率比1h时提高了38.53%；此后，随时间的延长，多糖提取率呈下降趋势，可能是高温下长时间提取会造成多糖的分解，导致多糖提取率的减少，时间4h时提取率最佳。

2.1.3 料液比對浒苔多糖提取率的影响

温度为100℃，时间为4h，探讨料液比（g/ml）为1：20、1：30、1：40、1：50、1：60五个不同水平对多糖提取率的影响。多糖提取率（%）分别为1.671，1.801，1.646，2.011，1.78。由此可知，料液比（g/ml）1：50提取率最佳。

2.2 浒苔多糖提取的正交实验结果

正交试验是在单因素实验的基础上，选择提取温度（A）、时间（B）、料液比（C）为考察因素，以多糖提取率为指标，采用正交试验法确定浒苔多糖提取的最佳工艺。

由表2可知，采用水提醇沉法浸提浒苔多糖，影响多糖提取率的因素主次顺序依次为A（提取温度）>B（提取时间）>C（料液比）。根据极差分析得到浒苔多糖提取最优方案为A3B3C1。

3 结论

影响多糖提取率的因素主次顺序依次为提取温度、提取时间、料液比，其中，提取温度对浒苔多糖提取率的影响显著。浒苔多糖最佳提取工艺为：提取温度100℃，提取时间5小时，料液比（g/ml）1：40。

【参考文献】

[1]单俊伟，刘海燕.浒苔的研究与资源化利用进展[J].现代农业科技，2016（15）：258-260.

[2]唐志红，于志超.浒苔多糖超声波提取工艺的研究[J].现代食品科技，2011，27（01）：56-59.

[3]张青，张天民.苯酚-硫酸比色法测定多糖含量[J].山东食品科技，2004（7）：17-18.