山楂叶黄酮类化合物对小鼠血清及肝组织SOD、MDA水平的影响

高天曙，王宏贤

(1．河南省中医院，河南郑州 45000;2．河南中医学院第一附属医院，河南郑州 450000)

山楂叶是蔷薇科植物山楂的干燥叶。研究［1］表明，山楂叶具有活血化瘀，扩张及软化血管，降低血压、胆固醇等多种作用，而黄酮类化合物是以洋芹素和木犀草素为苷元的一系列苷类，是山楂属植物最主要的化学成分。有文献［2］报道，山楂叶黄酮类化合物具有清除羟自由基和超氧自由基、提高机体抗氧化能力、维持体内氧化—抗氧化系统平衡作用。本实验采用超声乙醇法提取山楂叶黄酮类化合物(以下简称HLF)，研究了其对小鼠血清及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平的影响，以期为山楂叶的临床及保健应用提供实验依据。

1 材料与方法

1．1 动 物

普通级昆明种小鼠50只，鼠龄3个月，体质量(25±2)g，购自郑州大学第一附属医院实验动物中心(医动字号2011-036号)。小鼠分笼饲养，自由饮水及进食，房间湿度50%左右，温度(25±1)℃，实验室适应性饲养1周后用于实验。

1．2 药品、试剂与仪器

山楂叶均自野外采摘。将采摘收集的新鲜山楂叶用自来水清洗晾干后，放置于恒温干燥箱60℃下干燥、粉碎成40目干粉备用。SOD、MDA试剂盒，购自南京建成生物工程有限公司，批号091223。岛津UV-2001型紫外可见分光光度计，产地日本;METTLER AE 240万分之一精密天平，梅特勒—托利多上海仪器有限公司产品。

1．3 HLF 的提取

精密称取山楂叶干粉20 g，置于250 mL具塞锥形瓶中，加入800 g/L乙醇50 mL，避光浸泡30 min，450 W超声提取30 min，过滤，滤液用800 g/L乙醇定容至50 mL，即得。

1．4 动物分组、造模与给药

将适应性饲养1周后的小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、HLF低剂量组(400 μg/g)、HLF 中剂量组(800 μg/g)及 HLF高剂量组(1 200 μg/g)5组，每组10只。模型对照组和各剂量药物组小鼠每天颈背部皮下注射50 g/L D-半乳糖0．5 mL，空白对照组注射等量生理盐水，连续给药15 d。各剂量药物组每天灌胃给以HLF(0．02 mL/g)，空白对照组及模型对照组灌胃给以等量生理盐水，连续给药15 d。

1．5 检测指标

末次给药24 h后处死动物，分别取小鼠血液及肝组织(制备10 g/L肝组织匀浆)。小鼠血清及肝组织SOD、MDA水平检测严格按照试剂盒说明进行。

1．6 统计学方法

采用SPSS 13．0统计分析软件处理。计量资料数据以均数()±标准差(s)表示，组间比较采用t检验。以P＜0．05为差别有统计学意义。

2 结果

2．1 HLF对小鼠肝组织SOD、MDA水平的影响

与空白对照组对比，模型对照组SOD活力下降，MDA水平升高，差别有统计学意义(P＜0．01或P＜0．05)，提示造模成功。与模型对照组对比，HLF高、中、低剂量组小鼠肝组织中SOD活性增加，MDA水平降低，差别有统计学意义(P＜0．01或 P＜0．05)。见表1。

表1 各组小鼠肝组织SOD、MDA水平对比 ±s

表1 各组小鼠肝组织SOD、MDA水平对比 ±s

注：与模型对照组对比，*P ＜0．05，＊＊ P ＜0．05。

组 别 动物数 SOD/(U·mL-1) MDA/(μmol·L-1)空白对照组 10 97．56±5．29＊＊ 6．36±0．52＊＊模型对照组 10 39．32 ±10．18 8．85 ±0．42 HLF 低剂量组 10 76．29 ±11．26* 6．21 ±0．36＊＊HLF中剂量组 10 85．36±12．07＊＊ 6．83±0．31＊＊HLF高剂量组 10 90．05±13．95＊＊ 6．73±0．31＊＊

2．2 HLF对小鼠血清SOD、MDA水平的影响

与模型对照组对比，HLF高、中剂量组小鼠血清SOD水平显著提高，MDA水平降低，差别有统计学意义(P＜0．01)，而低剂量组血清SOD、MDA水平与模型对照组对比，差别无统计学意义(P＞0．05)。见表2。

表2 各组小鼠血清SOD、MDA水平对比 ±s

表2 各组小鼠血清SOD、MDA水平对比 ±s

注：与模型对照组对比，*P ＜0．05，＊＊ P ＜0．01。

组 别 动物数 SOD/(U·mL-1) MDA/(μmol·L-1)空白对照组 10 796．38 ±16．25* 671．36 ±41．52*模型对照组 10 439．19 ±25．18 520．85 ±35．42 HLF 低剂量组 10 472．15 ±25．26* 528．39±41．36 HLF中剂量组 10 636．36±31．07＊＊ 736．15±35．31＊＊HLF高剂量组 10 683．56±28．96＊＊ 775．73±42．31＊＊

3 讨论

在正常生理情况下，生物体内的氧化—抗氧化系统保持着动态平衡。自由基是最外层轨道上未配对电子的原子、分子、离子或基团，具有较强的氧化能力［3］。在正常情况下，体内所需要利用的自由基通常维持在一个有利无害的较低水平的动态生理浓度，对生物体细胞并无损害，并且生物体内同时存在着一个内源性的自由基清除系统，如SOD。SOD具有较强的抗氧化作用［4］，能够清除体内过剩的氧自由基及其衍生物，从而有效地防止或减轻体内自由基所导致的氧化损伤。但在病理情况下，如脑出血、脑梗死等，机体短时间内大量生成的自由基，超出了SOD的清除能力，必然使自由基生成与清除之间的平衡乃至机体氧化—抗氧化系统的动态平衡遭到破坏。大量自由基的强氧化作用使生物膜中的多不饱和脂肪酸形成脂质过氧化物MDA。MDA水平变化情况能反映出生物体内脂质过氧化的程度，间接地反映出机体细胞受自由基攻击和细胞损伤的严重程度。SOD是机体最重要的抗氧化酶，具有有效清除氧自由基、保护细胞膜结构和功能完整使其免于氧化损伤等作用。因此，SOD和MDA的水平变化能够反映出体内自由基的生成与清除，氧化—抗氧化系统平衡的动态变化情况［5］。

本实验结果表明，HLF能够显著提高模型小鼠血清及肝组织SOD活性，降低模型小鼠血清及肝组织中MDA水平，提示HLF具有提高抗氧化能力、减轻自由基损伤、促进体内氧化—抗氧化系统平衡恢复等作用，在临床、保健等方面值得进一步研究与应用。

［1］张远荣，蒋企洲．山楂叶黄酮的抗氧化作用［J］．药学与临床研究，2011，19(3)：287．

［2］叶希韵，王耀发．山楂叶总黄酮对血管内皮细胞氧化损伤的保护作用［J］．中国现代应用药学杂志，2002，19(4)：267．

［3］马新方，李勇．鱼腥草多糖体内抗氧化活性研究［J］．中医研究，2011，24(2)：20．

［4］吴丹，陈凯，王冬梅．脑梗塞病人血浆SOD和MDA水平测定分析［J］．承德医学院学报，2006，23(4)：423．

［5］马琳，张丽娥，刘勇，等．脑梗塞患者血浆β-内啡肽及血清 MDA、SOD 的变化［J］．西安医科大学学报，2000，21(3)：238．