在头戴式放大镜直视下小鼠气管插管方法的建立

曹 婕，高润娣，李和权，周建英

(浙江大学医学院附属第一医院呼吸内科，浙江杭州 31003)

最近，我们建立了一种在头戴式放大镜直视下进行的小鼠气管插管的方法。本文拟简要描述该方法的操作要点和过程，以期与广大同道共同学习、分享和探讨。

1 材料与方法

1.1 动物 NIH小鼠30只，♂，年龄6～8周，体质量(23±2)g，购自浙江大学动物中心，本院实验动物中心饲养，环境温度25℃，湿度70%。

1.2 材料 0.04 mol·L－1戊巴比妥钠溶液、美蓝、头戴式放大镜、冷光源射灯、24号静脉留置针(BD公司)以及自行制作的小鼠固定及口腔撑开装置。如Fig 1所示。

1.3 方法

1.3.1 小鼠气管插管的制作 取24号静脉留置针，用锉刀磨掉金属针芯的针头(以免插管时损伤气管)并将其适当弯曲，即可用作小鼠气管插管。

1.3.2 在头戴式放大镜下施行小鼠气管插管 按50 mg·kg－1的剂量腹腔注射0.04 mol·L－1戊巴比妥钠溶液，5～7 min后观察夹趾反射，如阳性则追加10% ～20%初始剂量。如Fig 2所示，仰卧位固定小鼠并使其颈部尽量后仰伸展，依靠钩住小鼠门齿的橡皮筋打开上、下颌，并以带橡皮筋的小铁钩将小鼠口腔左右两侧拉开。操作者佩戴头戴式放大镜，左手持直头镊牵拉小鼠舌头，右手按压小鼠胸廓以充分暴露声门(Fig 3)。透过头戴式放大镜，操作者可清晰地观察到小鼠的声门随呼吸而开启、闭合。在小鼠吸气的瞬间，操作者迅速将自制的气管插管插入气道约3 cm，之后，退出针芯并用胶带将套管固定。

Fig 1 The main instruments used for endotracheal intubation of mice

Fig 2 The body position and the oral distraction method of mouse during endotracheal intubation

Fig 3 Intubating the trachea of mouse under direct vision through head-wearing kind magnifying glass

2 结果

2.1 气管插管成功率

2.1.1 插管成功的标准 若插管成功:可见置于气管插管管口的细棉丝可受小鼠呼吸气流的影响而飘动;封堵管口30 s左右小鼠即出现躁动、口唇紫绀等缺氧表现;将0.5 ml美蓝经套管注射，处死小鼠后解剖可见蓝色物质浸染气管和肺部。

2.1.2 结果 根据上述方法判断，所有小鼠插管均成功;小鼠处死后解剖可见气管下端至肺部均有蓝色物质均匀浸染，见Fig 4。

Fig 4 The picture of trachea and lungs after injection with methylene blue through catheter

2.2 并发症的发生情况 所有小鼠在插管过程中均未出现呼吸急促、口唇紫绀等征象，解剖后检查也未见气管损伤、肺部出血等情况。B组小鼠经多次插管操作仍能健康生长，与C组比较未发现生长迟缓、体重明显减低等情况。

3 讨论

在开展肺部疾病药理学研究时，常常因为制备动物模型、测定气道压力以及气道给药等各种需要而施行气管插管术。小鼠是最常用的医学实验动物，但很难通过口腔直视气管的开口［1］，而盲插法易误入食管。因此，大部分研究者采用手术暴露颈部气管的方式［1－2］。这种方法虽然直观、易操作，但损伤较大，难以重复。

近年来，国内外均有非手术小鼠气管插管方法的报道，如自制喉镜检查片引导下气管插管法［3－4］以及关节镜下气管插管法等［5－6］。我们也曾报道在体视显微镜下施行小鼠气管插管［7］，该方法成功率高，重复性好，但其操作费时(约15 min)、需要较长时间(2～3周)的技能学习。因此，我们对该法进行了改良，主要包括:(1)术时小鼠采用仰卧位更易于固定以及小鼠声门的观察。(2)利用橡皮筋的弹性从上、下、左、右4个方向撑开小鼠的口腔以充分暴露声门。(3)改用头戴式放大镜，术者在操作过程中能自行调整其附带光源的照射角度，利于充分、快速地看清声门位置和运动。

综上所述，在头戴式放大镜直视下进行的小鼠气管插管的方法操作简单、易学、可重复性强，值得推广应用。

［1］刘利辉，叶玲玉，谭渊明，等.一种简捷可靠的小鼠气管插管新方法［J］.中国医师杂志，2006，8(8):1019－20.

［1］Liu L H，Ye L Y，Tan Y M，et al.A novel method for easy and reliable endotracheal intubation in the mouse［J］.J Chin Physician，2006，8(8):1019－20.

［2］赵晓辉，吴 楠，周 健，等.PTCA导丝逆行引导小鼠气管插管术［J］.中国比较学杂志，2006，16(6):365－6.

［2］Zhao X H，Wu N，Zhou J，et al.PTCA wire-assisted retrograde endotracheal intubation in mice［J］.Chin J Comparative Med，2006，16(6):365－6.

［3］Brown R H，Walters D M，Greenberg R S，Mitzner W.A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice［J］.J Appl Physiol，1999，87(6):2362－5.

［4］Spoelstra E N，Ince C，Koeman A，et al.A novel and simple method for endotracheal intubation of mice［J］.Lab Anim，2007，41(1):128－35.

［5］Vergari A，Polito A，Musumeci M，et al.Video-assisted orotracheal intubation in mice［J］.Lab Anim，2003，37(3):204－6.

［6］Vergari A，Gunnella B，Rodolà F，et al.A new method of orotraeheal intubation in mice［J］.Eur Rev Med Pharrnacol Sci，2004，8(3):103－6.

［7］吴 月，王 硕，王 晴，等.在体视镜下施行无创伤性小鼠气管插管方法的建立［J］.中国病理生理杂志，2009，25(8):1662－4.

［7］Wu Y，Wang S，Wang Q，et al.A stereoscopic non-invasive method for endotracheal intubation of mice［J］.Chin J Pathophysiol，2009，25(8):1662－4.