自制凝血质控品的研究与评价

蒋国英 周丽杰 余苗苗

常规的凝血四项检查包括凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)。其是术前出血倾向筛查和抗凝治疗监测的常用指标。凝血检查受多方面因素影响，如试剂的来源及批号、仪器的性能、检测的环境等均可影响检验结果。室内质量控制是保证结果准确的重要手段。做好室内质量控制的关键就是要拥有良好的质控品。针对目前凝血质控品多为进口，价格昂贵，且供应周期长等不足，我们研究用自制的凝血质控品代替进口的正常范围的质控品，用于实验室的日常室内质控工作中，取得了良好的效果。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 STAGO全自动血凝分析仪及其配套的试剂盒，质控物。

1.2 质控血浆的制备 选当日凝血检验结果正常的血浆标本(除去溶血、黄疸、脂血、浑浊者)，充分混匀，留3 ml用于定值，其余按0.5 ml/支，分装到无菌带盖的小塑料子弹头试管里，标明批号，-20℃冰箱保存。必须在抽血后4 h内完成。

1.3 方法

1.3.1 自制凝血质控品批内精密度的测试 取自制质控品3 ml于STAGO全自动血凝仪上对PT、APTT，FIB、TT各项目连续测定20次，计算均值()，标准差(s)、变异系数CV%

1.3.2 自制质控品日间精密度及稳定性测试 每天从冰箱内取同批次的自制凝血质控品37℃水浴速溶，稳定30 min后同凝血标本、进口质控品一同测试，连续测定30 d，计算自制凝血质控品和进口质控品的均值()、标准差(s)、变异系数CV%。

1.4 统计学方法 采用Excel软件作质控图和SPSS 11.5统计软件作相关统计，数据以均数()，标准差(s)，变异系数(CV%)表示。

2 结果

2.1 批内精密度测试结果 CV%分别是:PT为2.18%，FIB为2.32%，APTT为3.04%，TT为2.65%。说明自配质控品性质稳定可靠，表明仪器测定结果的精密度良好。见表1。

2.2 日间精密度测定及稳定性测试结果 进口质控品各项凝血指标的CV%范围为2.76%%～3.84%，自制质控品各凝血指标的CV%范围为3.91%～4.14%，对比可见，自制凝血质控品日间精密度及稳定性良好，符合室内质控要求。见表2。

表1 批内精密度测试结果

表2 日间精密度测定及稳定性测试结果

3 讨论

室内质量控制是保证凝血实验检测准确的重要手段。凝血功能检测时须做室内质控，只有质控结果在允许范围内，方可测定标本和发出检验报告［1］。目前国内质控血浆多为进口冻干血浆，且价格较昂贵，因此研究自制凝血质控物非常有必要。

在研究中，我们用每天都用进口质控品监测每天实验的准确性，确保自制凝血质控品的准确性。本文研究表明我科的自制正常范围凝血质控品有良好的准确性及稳定性。各项凝血指标的批内精密度CV%，PT为2.18%，FIB为2.32%，APTT为3.04%，TT为2.65%，批内日间精密度CV%，PT为3.91%，APTT为4.12%，FIB为3.04%，TT4.14%，均符合凝血质控要求［2］。有文献报道［3］，用浮动均值法对凝血3项作质量控制探讨，表明正常患者的混合血浆凝血3项指标均值变化较小，与参比血浆质控图变化趋势完全一致。

血浆中的大部分凝血因子在保存过程中，会逐渐失活，使PT、APTT、FIB及TT检测结果随标本保存时间而延长。有报道认为由于凝血因子Ⅷ极不稳定，即使是-20℃保存，其凝血活性也将减少50%［4］。自制凝血质控品在-20℃保存条件下，PT、APTT、FIB及TT检测结果随标本保存时间而延长，但在一个月内可相对稳定。所以我们建议将自制凝血质控品放于-20℃冰箱中时，保存期限定为一个月。

我们在自制凝血质控品时要注意采集人数尽可能多(至少20人)，采集的血浆应摈弃溶血、黄疸、脂血、浑浊者，不能用孕妇和口服避孕药的正常女性血浆，因为这些情况下可使检测受影响或使凝血因子的活性升高。自制凝血质控品在使用时要注意不要反复冻融，每支只能使用一次。在融化时不能在室温中自然融化，这样会使纤维蛋白原析出和凝血因子消耗。应迅速置37℃水浴中5 min，轻轻摇动，使其迅速融化，于室温稳定30 min再进行检测［5］。

用混合血浆作为凝血质控品代替进口正常值质控品，有效克服了冻干质控物每次复溶所带来的瓶间差，减少了室内质控的不精密度，提高了检测的准确性，真正做到室内质控工作监测实验条件改变的目的［6］。自制的凝血质控品具有不同于进口质控品的性质、成本低、制作简单，应用方便，并具有与患者标本相似的介质效应，减少了误差，适宜推广应用，尤其适合中小医院实验室。我们将自制质控品应用于凝血常规的室内质量控制监测中，能够及时发现引起结果误差的原因(如试剂、仪器、标本等)，并及时改正，确保凝血的结果准确可靠，为临床诊断和治疗提供可靠的依据。自制凝血质控品是良好的室内质控品，值得推广应用。

［1］彭明婷，谷小林.Sysmex CA-50型血凝仪的性能评价.中华检验医学杂志，2000，23(5):315-317.

［2］苍金荣，王华，任建康.凝血/止血检测的质量保证.现代检验医学杂志，2003，35(6):208.

［3］丛玉隆，王俊艳，殷宗建.患者血浆浮动均值法用于PT、APTT、FIB质量控制探讨.临床检验杂志，2002，20(6):354-355.

［4］丛玉隆.血栓与止血试验诊断的现状及发展.中华检验医学杂志，2000，24(1):5-7.

［5］孔立新.凝血检验室内质控血浆的制作与评价.临床检验杂志，2006，24(2):146.

［6］Westgard JO，Burnett RW.Precision requirements for cost effective operation of analytical processes.Clin chem，1990，36(9):1629-1632.