荧光光度法测定啤酒中的甲醛

肖春妹，王荣福

（1.泉州师范学院，福建 泉州 362011；2.中国石油四川石化有限责任公司，四川 成都 611930）

荧光光度法测定啤酒中的甲醛

肖春妹1，王荣福2

（1.泉州师范学院，福建 泉州 362011；2.中国石油四川石化有限责任公司，四川 成都 611930）

考察了乙酸铵、乙酰丙酮的浓度、pH值等因素对甲醛与乙酰丙酮及乙酸铵特性反应的影响，得到最佳反应条件.在此基础上建立了荧光光度法测定啤酒中的甲醛含量新方法，实验结果表明：该方法具分析时间短、精密度和回收率高，可用于啤酒中痕量甲醛的分析.

甲醛；荧光光度法；啤酒

在传统的啤酒生产过程中，糖化时加入适量甲醛可有效地减少麦汁中多酚和花色苷含量，使啤酒非生物稳定性大为改善，并增加了啤酒的透明度和稳定性，而且也使麦汁及啤酒的还原性下降,提高啤酒的保质期[1]，故成品啤酒中存在着少量甲醛.由于啤酒行业的竞争过于激烈，某些厂家为了增加啤酒的感观等，在制作过程中也加入少量甲醛，可能导致甲醛残留超出国家标准限制.因此，检测啤酒中甲醛的含量一直是啤酒行业乃至社会都非常关注的问题.本文根据甲醛与乙酰丙酮反应产生的黄色物质在激发下可发射荧光的性质来测定啤酒中甲醛的含量[2].

1 实验方法

1.1 主要仪器

荧光光度计，Cary/Eclipse，东南化学仪器有限公司；数字酸度计，pHS-3C，杭州东星仪器设备厂.

1.2 主要实验药品

甲醛，上海联试化工试剂有限公司；乙酰丙酮，国药集团化学试剂有限公司；柠檬酸铵，天津基准化学试剂有限公司；乙酸铵，上海试剂四厂；钼酸铵，上海试剂四厂；冰乙酸，上海联试化工试剂有限公司；乙醛，上海试剂一厂，等试剂.

1.3 溶液的配置

1.3.1 碘量法标定HCHO所需的溶液的配置，参考文献[3].

1.3.2 荧光光度法测定HCHO的浓度所需的溶液的配置

铵盐的配置 [NH4+]=0.5mol/L钼酸铵溶液50mL;[NH4+]=6mol/L柠檬酸铵溶液 50mL；[NH4+]=6mol/L乙酸铵溶液250mL，按常规方法以相应的盐和二次蒸馏水溶解配制.

2.0 ug/mLHCHO标准溶液250mL:取已经标定的HCHO标准溶液（1.706g/L）0.29mL准确释成250mL.

0.05 mol/L的乙酰丙酮(现配现用)100mL:移取密度为0.972-0.974g/mL的乙酰丙酮0.52mL，用100mL容量瓶定容.

1：4乙酸水溶液（体积比）：移取10mL乙酸稀释成50mL.

浓度是HCHO的10倍的乙醛溶液：取0.1mL乙醛（40.0%）准确稀释成25mL；再取其中的2.9mL稀释成250mL溶液.

1.4 啤酒样品的提取

取瓶装啤酒一瓶，放置冰箱中，冰至10-15℃，取出，开盖后快速过滤到烧杯中，除去啤酒中的CO2.准确移取过滤后的啤酒试样100mL于250mL圆底烧瓶中，加25mL蒸馏水，几粒沸石.用普通蒸馏装置缓缓蒸馏，用100mL容量瓶接收（外加冰水浴）约95mL，取下容量瓶，放置至室温，用蒸馏水定容至刻度.则该样品中的HCHO含量就是啤酒中的HCHO含量.

2 结果与讨论

2.1 荧光最佳激发波长和发射波长的确定

乙酰丙酮和甲醛在乙酸铵—乙酸体系中与NH4+反应生成的黄色产物具有荧光性质，其激发光谱和发射光谱见图1，由图可以看出最佳激发波长为424nm，最佳发射波长为515nm.因此，本实验采用激发光谱波长为424nm，发射光谱波长为515nm.

2.2 铵盐的确定

钼酸铵、柠檬酸铵和乙酸铵这三种铵盐都能跟乙酰丙酮、甲醛反应，都能较快生成黄色物质.实验表明，钼酸铵溶解度很小，且随pH值降低,反应体系中就会有钼蓝生成,干扰产物的颜色，因此不宜选择钼酸铵；柠檬酸铵在浓度较高时也有干扰峰出现,因此不宜选择柠檬酸铵.乙酸铵的溶解度大，[NH4+]可达6mol/L，且乙酸与乙酸铵能形成缓冲体系,保证了pH值稳定，从而使体系稳定.从图2可以看出，随乙酸铵加入的量的增加，产物的荧光强度也随着增大，在5.0mL以上的乙酸铵时，荧光强度维持恒定，因此实验中乙酸铵的最佳加入量是5.0mL.

2.3 乙酰丙酮浓度对If值的影响

在424nm激发波长下，固定HCHO、乙酸铵，改变乙酰丙酮的加入量，测定其荧光强度，从图3可以看出，随着乙酰丙酮的加入量的增加，荧光强度最终趋于稳定.

2.4 体系pH值对荧光强度的影响

在424nm激发波长下，固定HCHO、乙酸铵、乙酰丙酮，改变乙酸加入量.测定体系的不同pH值和荧光强度值，从图4可看出，随着pH值的增加，荧光强度先增加，然后降低，在pH=6.0时, 荧光强度值最大.

2.5 啤酒样品的测定

2.5.1 标准曲线的线性关系

在以上最佳的实验条件下，测定一系列不同HCHO浓度(Y)的体系的荧光强度值(X)，得到的标准曲线Y=0.11503X-0.31715，r=0.999，表明有良好的线性关系.

2.5.2 精密度得测定

对5个不同品牌的啤酒样品分别重复测定5次，测得RSD为0.23～3.20%，表明有良好得精密度.

2.5.3 回收率的测定

往已测定的啤酒中加入已知浓度的HCHO，测定其回收率，结果如表1所示，其平均回收率为99.0%.

表1 回收率的测定

3 结论

考察了乙酸铵的浓度、乙酰丙酮的浓度和体系的温度、pH值等因素对甲醛测定的影响，确定了体系反应的最佳条件.在该条件下，建立了啤酒中甲醛得测定方法，实验结果表明，该方法具有分析时间短，精密度和收回率高，可用于啤酒中痕量甲醛的分析.

〔1〕管敦仪.啤酒工业手册[M].北京：轻工业出版社,1985.7，10-11.

〔2〕罗斌.啤酒中甲醛残留测定方法之探讨[J].江西化工,2002（4）.

〔3〕华中师范大学,东北师范大学，等.分析化学实验[M].北京：高等教育出版社,2001.96-100.

TS262.5

A

1673-260X（2012）06-0108-02