王继红
[摘要] 目的 探析泌尿生殖道念珠菌病患者的菌种及药敏。 方法 对笔者所在医院2009~2011年接诊的100例泌尿生殖道念珠菌病患者的临床分析。 结果 通过科玛嘉念珠菌显色培养基的检测方法发现临床的96株菌均为白色念珠菌菌株,依据本试验中受试的菌株均在孵育24 h后判读结果,这一点可以充分的证实,科玛嘉念珠菌显色培养基以及微生物自动鉴定系统YBC酵母菌在白色念珠菌鉴定方面的实践应用价值和效果。 结论 在临床应用时应首选酮康唑、5-氟胞嘧啶和氟康唑几种药物,而其他药物因易出现不同程度的耐药趋势,故应谨用。
[关键词] 生殖道;念珠菌病;抗真菌;药敏试验;菌群分布
[中图分类号] R695???[文献标识码] B???[文章编号] 2095-0616(2012)15-116-02
Analysis of culture and drug sensitivity of 100 patients with genitourinary candidiasis
WANG?Jihong
Department of Dermatology, the Veteran Cadre's Rehabilitation Hospital of Henan,Zhengzhou 450003, China
[Abstract] Objective To analyze culture and drug sensitivity of the patients with genitourinary candidiasis. Methods 100 patients with genitourinary candidiasis collected in our hospital from 2009 to 2011 were analyzed. Results 96 strains of bacteria were all the candida albicans with the use of CHROMagar Candida. Though the results were judged after culture hatching for 24 hours,it may be confirmed richly that the using value and result of CHROMagar Candida and automatic identification system for microorganisms identificating candida albicans. Conclusion Ketoconazole, 5-fluorocytosine and fluconazole are the choice drug. other drugs should be used with caution because they occur easily different degrees of drug resistance.
[Key words] Genitourinary; Candidiasis; Antimycotic; Drug sensitive test; Bacterial distribution
生殖道念珠菌病主要分2种,一种是女性外阴念珠菌性病毒感染引发的炎症,一种是男性龟头念珠菌性炎症。目前,随着抗生素、各类激素,以及各种免疫性抑制药物在临床上的普遍应用,加之免疫缺陷性病毒(HIV)感染者的愈日剧增,同时伴随着抗真菌药物广泛应用于医疗实践,对这类病菌的组成结构造成了很大影响。当前,很多医院采用芽管试验和厚壁孢子试验的方法来鉴别白色念珠菌与非白色念珠菌的区别,然后利用科玛嘉念株显色培养基和微生物自动鉴定系统YBC酵母菌鉴定卡进一步分离菌株的菌种。
1?资料与方法
1.1?一般资料
选择笔者所在医院2009~2011年接诊的泌尿生殖道念珠菌病患者100例,年龄20~72岁,平均(35.0±4.2)岁;女52例,均出现以下症状:分泌物多呈豆渣状和乳液样,其中42例出现不同程度外阴瘙痒、阴部灼热以主白带增多症状;10例出现尿痛和尿频以及性交疼痛现象;男48例,共同症状是阴部瘙痒和小便滞留,其中36例龟头部位散布着明显的小丘疹并位有瘙痒症状;12例表现为尿道灼热瘙痒,同时伴有尿急和尿频现象。
1.2?主要检测仪器
VITEK微生物自动鉴定系统;广东省医疗器械厂生产的LRH-150B型生化培养基;上海团结仪器厂生产的BX-40型微分干涉显微镜。
1.3?菌株来源
试验菌株:从女性患者的阴道分泌物及男性龟头炎患者的包皮鳞屑中鉴别和分离出念珠菌。质控菌株:ATCC-90028。利用药敏试剂盒检测并区分出二性霉素B、5-氟胞嘧啶和氟康唑3种药物对于质控菌株ATCC-90028IC。二性霉素B 1.00 mg/L,此3个值均落在M27-A质控和参考菌株MIC值(rag/L)分布范围内。氟康唑0.5 mg/L;5-氟胞嘧啶0.5 mg/L。
1.4?试验方法
首先提取女性患者阴部分泌物作为标本基础,再提取男性患者龟头处或者冠状沟处表层皮损处的鳞屑,并作为待检样本保存。将收取的标本置于光学显微镜下,仔细观察变化,当出现大量的卵圆形孢子和假菌丝现象时,即可作为判断SDA在标本中出现接种现象的依据,之后,即可对全部阳性菌落的分离和纯化进行选择。采用玉米吐温80培养基,在室内温度达到25℃时将阳性菌落转种植,孵育24~48 h后观察厚壁孢子试验鉴别白色念珠菌和非白色念珠菌。37℃孵育2 h后将阳性菌落转换成人血清,然后利用40倍光学显微镜进行芽管变化观察。选择科玛嘉念珠菌显色培养基鉴定菌种。以VITEK微生物自动鉴定系统YBC酵母菌鉴定卡作为菌种鉴定标准。等测定后分离出来菌株、质控菌株,采用药敏试剂盒测定在两性霉素B、咪康唑、酮康唑、氟胞嘧啶、伊曲康唑、特比奈芬和氟康唑中的MIC值。
2?结果
科玛嘉念珠菌显色培养基菌种鉴定结果:86例为白色念珠菌,14例为非白色念珠菌。微生物自动鉴定系统YBC酵母菌鉴定卡菌落鉴定结果:92例为白色念珠菌,5例为近平滑念珠菌和3例隐球菌。白色念珠菌占念珠菌的86%,白色念珠菌占生殖道念珠菌病分离菌株的92%。
52例女性患者中,病原体为白色念珠菌共49例,占全部患者的94.23%;48例男性患者中,病原体为白色念珠菌共46例,所占比例95.83%。
86株白色念珠菌根据测出的MIC及判读标准可计算出对药物的敏感株数。见表1。
3?讨论
对于外阴阴道念珠菌病的病原体,有85%~90%的学者认为主要是白色念珠菌。本试验中生殖道念珠菌病患者临床分离株中发现,女性患者白色念珠菌为94.23%,男性患者白色念珠菌为95.83%,试验结果均明显高于其他报道。试验结果表明,白色念珠菌是生殖道念珠菌病患者的主要病原体。
对于试验的鉴定方法很多,笔者采用的是比较常用的科玛嘉念珠菌显色培养基的检测方法。该检测方法效果很好,可以通过研究结果来证明。通过科玛嘉念珠菌显色培养基的检测方法发现临床的96株菌均为白色念珠菌,依据本试验中受试的菌株均在孵育24 h后判读结果,可以充分证明了利玛嘉念珠菌显色培养基、微生物自动鉴定系统YBC酵母菌鉴定卡对白色念珠菌进行鉴定的实践效果。
酮康唑、氟康唑、5-氟胞嘧啶、咪康唑、特比和两性霉素B距今观察还都没有产生耐药菌株,只是伊曲康唑、5氟胞嘧啶、对咪康唑以及对特比奈芬时,才会出现其中一小部分的耐药症状。
通过试验,可以看出所有参与试验菌株对酮康唑都比较敏感,而在临床应用上,不良反应也较为明显,尤其是对肝脏有较大毒性。菌株表现较为敏感的是氟康唑,敏感度高于同类口报药物伊曲康唑,但耐药性伊曲康唑却高于氟康唑。而对特比奈芬菌株的敏感度也较高,接近90%,但相对于其他6种药物,特比奈芬的耐药性明显较高,达10%之多,所以在临床运用时要慎重。因此,在临床应用上,可将酮康唑、5-氟胞嘧啶以及氟康唑作为首选药物,其他出现耐药性药物需谨用。
[参考文献]
[1] McCutchan JA,Ronald AR.Evaluation of new antiinfective drugs for treatment of vaginal infections[J].Clin Infect Dis,2008,15(1):125-129.
[2] 刘郁晖.外阴阴道念珠菌病的真菌学研究及治疗[J].实用妇产科杂志,2010,16(4):190-191.
[3] 陈明.念珠菌性龟头包皮炎的菌种分布与发病机理的研究[J].白求恩医科大学学报,2011,27(1):87-88.
[4] 熊杰.一种酵母菌快速鉴定方法的评价[J].成都军区医院学报,2008,10(2):26-27.
(收稿日期:2012-05-25)