宫颈癌中PPARγ的表达及其意义

梁少强 涂青松 黄荣 蒋军 姜武忠 袁君 曾晓红 何瀚 周菲菲

[摘要] 目的 研究宫颈癌组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ的表达及其意义。 方法 采用免疫组织化学SABC法，检测40例宫颈癌组织、10例宫颈炎组织和10例非典型增生宫颈组织切片中的PPARγ的表达，结合病理学分型、临床分期、放疗敏感性探讨其意义。 结果 PPARγ在3组中均有一定程度的表达，但宫颈癌组织中PPARγ的表达明显高于宫颈炎组织及非典型增生宫颈组织，差异有统计学意义（P＜0.05）；PPARγ分别与宫颈癌临床分期、放疗敏感性和骨、肺、肝等远处转移和5年生存期有关，差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论 宫颈癌组织中PPARγ的表达均显著增高，对判断宫颈癌预后及指导临床治疗有重要的参考意义。

[关键词] 宫颈癌；过氧化物酶体增殖物激活受体γ；免疫组织化学法

[中图分类号] R34；R711.74???[文献标识码] A???[文章编号] 2095-0616（2012）15-18-03

The expression and significance of PPAR γ in cervical cancer

LIANG?Shaoqiang1??TU?Qingsong2??HUANG?Rong1??JIANG?Jun1??JIANG?Wuzhong1??YUAN?Jun2ZENG?Xiaohong1??HE?Han1??ZHOU?Feifei1

1.Department of Radiotherapy, Tumor Hosipital of the First People's Hospital of Foshan,Foshan 528000 China;2.Department of Radiation Oncology,Xiangya Hospital of Central South University,Changsha 410008,China

[Abstract] Objective To investigate the expression and clinical significance of PPARγ in cervical carcinoma. Methods Expressions of PPARγ in 40 cases of formalin-fixed,paraffin-embeded cervical carcinoma tissues,0 cases of cervicitis tissues and 10 cases of cervical intraepithelial neoplasia tissues, were examined using Strept-Avidin-Biotin Complex (SABC) immunohistochemical method. Results PPARγ was mainly localized in the nucleus and cytoplasm of the tumor cell. It was expressed in each group with different levels,but the expression rate of PPARγ in cervical carcinoma was significantly higher than those in cervicitis tissues and cervical intraepithelial neoplasia tissues (P＜0.05). It was well associated with the clinic stages,radiosensitivity,5-year survival time and meta-stasis(lymph node,skeleton,liver,lung,etc) of the carcinoma (P＜0.05). Conclusion High level expressions of PPARγ may serve as meaningful indicators for prognosis and clinical therapy of the cervical carcinoma.

[Key words] Cervical carcinoma;Proxisome proliferator-activated receptor γ;Immunohistochemistry

过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator-activated receptor γ， PPARγ）是过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）的一种类型，属于配体依赖型转录因子，近年研究发现其可诱导细胞分化、凋亡，抑制肿瘤生长[1]。笔者采用免疫组织化学法检测宫颈癌组织中PPARγ表达的水平，并进行临床追踪随访，旨在探讨PPARγ在宫颈癌转移和预后中的作用。

1?资料与方法

1.1?一般资料

收集笔者所在科室2008年1月～2012年1月经病理确诊为宫颈癌患者的瘤体活检组织标本40例，均为鳞癌。年龄31～74岁，平均（51.2±2.8）岁；按1994年FIGO分期：Ⅰ期4例、Ⅱ期18例、Ⅲ期14例、Ⅳ期4例；病理分级：低分化7例，中分化27例，高分化6例。宫颈炎组织标本10例，宫颈非典型增生组织标本10例，两者均来自同时期的活检宫颈组织。

1.2?方法

试剂：兔抗人PPARγ多克隆抗体（IgG）；抗原修复液Ⅰ及通用型SABC染色试剂盒和DAB显色试剂盒均购自武汉博士德生物工程有限公司。采用常规免疫组织化学SABC法。切片常规脱蜡脱水，3%过氧化氢乙醇溶液阻断内源性过氧化物酶的活性，微波抗原修复（92-980C） 15 min，正常非免疫动物血清，室温下孵育10 min，滴加一抗PPARγ，工作浓度均为1︰100，40℃冰箱中过夜，滴加生物素标记的第二抗体，置入370℃恒温箱中孵育30 min，加入链酶亲和素-生物素-过氧化物酶溶液，室温下孵育10 min，DAB显色，苏木素复染，中性树胶封片，设阴性对照（以PBS代替一抗）以及阳性对照（已知的乳腺癌阳性反应组织）。

1.3?结果判断

免疫组化染色的结果参考Krajewska等标准判断，采用双盲法在显微镜下进行评分。先按阳性细胞比例将无、1%～25%、26%～50%、51%～75%及76%～100%依次计为0～4分；再按染色强度将无、弱、中、强分别计为0～3分，最后综合两部分得分。如某片有25%弱阳性（1×1）、50%中等阳性（2×2）及25%强阳性（1×3），则总分为1+4+3=8。HIF-1α阳性染色主要为细胞胞浆染成棕黄着色，胞浆也可有少许染色，单纯细胞核着色而浆无着色或细胞核、浆均无着色为阴性，评分方法同上。

1.4?统计学处理

采用SPSS13.0统计软件包统计分析，计量资料采用（）表示，使用t检验、单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2?结果

2.1?宫颈癌组织PPARγ的表达

PPARγ在宫颈鳞癌组织、宫颈炎组织和宫颈非典型增生组织中的表达分别为（8.18±1.70）、（6.60±0.70）和（4.90±1.37），其中以宫颈癌组的平均得分最高，宫颈炎组的平均得分最低，3组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。宫颈癌组PPARγ表达与其他各组间差异有显著性差异，宫颈炎组与宫颈癌组及宫颈非典型增生组之间差异也有显著性差异， 宫颈炎组和宫颈非典型增生组之间差异亦有显著性差异。

2.2?宫颈癌组织PPARγ的表达与临床的关系

PPARγ分别与宫颈癌临床分期、放疗敏感性和骨、肺、肝等远处转移和5年生存期有关（P＜0.05）。见表1。

3?讨论

过氧化物酶体增殖物激活受体是一类配体依赖型转录因子，属于核受体大家族[2-3]。近年研究发现，在乳腺癌、食管癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、脑瘤等恶性肿瘤中，PPARγ的表达增高，其被激活后还具有能抑制肿瘤发生发展的作用，其机制可能是：PPARγ激活后可抑制cyclinD1、cyclinB、cyclinE、CDK4和CDK2表达，并上调CDKIP21和P27蛋白表达，阻滞细胞分裂增殖，诱导细胞凋亡，从而抑制肿瘤细胞生长[4-5]。

本研究结果显示：宫颈癌组中PPARγ的表达明显高于宫颈非典型增生组和宫颈炎组（P＜0.05），且随着宫颈组织异型程度的增高PPARγ表达有上升趋势，PPARγ的表达可能是宫颈炎发展到宫颈非典型增生乃至宫颈癌的分子标志，其过表达可能是宫颈癌发生过程的早期事件之一[6-7]。

宫颈癌组PPARγ阳性染色主要定位在肿瘤细胞胞核，胞浆也有少许染色，在3组中平均评分最高（8.18±1.70）。Panigraphy D等[8]报道，高水平的PPARγ蛋白表达可能是乳腺癌细胞区别正常乳腺细胞的标志之一，本研究结果与上述报道一致。随着FIGO分期的升高，PPARγ的表达均降低，且Ⅳ期患者PPARγ表达的平均得分最低（6.75±0.96），表明PPARγ在晚期病例中的表达与肿瘤的浸润、发展有密切关系[9]。

经长期随访证实：有远处转移患者宫颈癌组织中PPARγ表达显著低于无远处转移宫颈癌组织的平均得分（8.78±1.76），且生存期小于5年者PPARγ表达的平均得分（7.43±1.28）也同样低于生存期大于5年者的平均得分（8.58±1.77），表明PPARγ具有抑制肿瘤浸润发展及远处转移的作用，是临床判断宫颈癌转移复发的重要生物学指标。40例宫颈癌患者接受放射治疗后，21例完全缓解和19例部分缓解，完全缓解者标本中PPARγ表达的平均得分（8.86±1.62）高于部分缓解的平均得分（7.42±1.47），提示PPARγ可能通过调节一系列的下游基因降低凋亡阈值及抑制细胞增殖，促进放疗所致宫颈癌细胞凋亡，提高放疗的敏感性，对临床如何提高放疗的敏感性有实际的指导意义[10]。

综上，通过研究宫颈癌患者活检标本中PPARγ的表达情况，对于早期诊断、预测远处转移的出现趋势及放疗敏感性、临床预后的评估都将有指导作用和实用意义。

[参考文献]

[1] Isseman I，Green S.Activation of a member of the steroid hormone receptor superfamily by peroxisome proliferators[J].Nature，1990，347（629）：645-650.

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[3] Farrow B，Evers BM.Activation of PPAR gamma increases PTEN expression in pancreatic canner cells[J].Biochem Biophy Res Commun，2003，301（1）：50-53.

[4] 叶劲军，陆谔梅，黄键，等.PPARγ在子宫颈癌和子宫颈上皮内瘤样变中的表达及意义[J].肿瘤预防与治疗，2010，6（3）：199-202.

[5] Margeli A，Kouraklis G，Theocharis S.Peroxisome proliferators activated receptor-c(PPAR-c) ligands ligands and angiogenesis[J].Angiogenesis，2003，6（3）：165-169.

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[7] 黄雅，冯玉昆，李建军，等.Brn-3a、PPAR-γ在宫颈癌及癌前病变中的表达[J].昆明医学院学报，2008，29（1）：90-94.

[8] Panigraphy D，Singer S，Shen LQ，et al.PPARr ligands inhibit primary tumor growth and metastassis by inhibiting angiogenesis[J].Clin Invest，2002，110（7）：923-932.

[9] 关永红，邹颖刚，于晓艳.PPAR-γ在子宫颈癌组织中的表达及意义[J].中国实验诊断学，2010，14（8）：1203-1204.

[10] 陆谔梅，叶劲军，黄健，等.PPARγ和P27在宫颈癌组织中的表达及其临床意义[J].临床肿瘤学杂志，2011，16（5）：433-436.

（收稿日期：2012-07-16）