电针膀胱特定穴对急性尿潴留后家兔的膀胱内压和膀胱组织ATP的影响*

吴聪英，程莉莉，睢明河

（北京中医药大学，北京 100029）

在针灸临床中，特定穴的应用广泛，且临床效果较好。在治疗脏腑疾病中，用下合穴、背俞穴、募穴较多。下合穴作为特定穴之一，备受历代医家的重视，临床上多用于治疗六腑疾病。《灵枢· 四时气》篇中曰:“邪在腑，取之合。”《灵枢·邪气脏腑病形》云:“荥输治外经，合治内府”，“治内府奈何取之于合”［1］。募有汇聚之意。杨上善《明堂》注:“募，犹盛也。”《类经》谓:“为脏气结聚之所，故曰募。”《标幽赋》曰:“岂不闻脏腑病，而求门、海、俞、募之微。”历代医家临床运用俞募穴积累了丰富经验，予今日临床以借鉴［2］。背俞穴是内脏与体表联系的部位，具有反映内脏疾病和治疗相应内脏病变的功能。腹为阴，脏腑深居腹中，其病曰阴病;背为阳，俞穴所在，调治之曰治阳。《素问·阴阳应象大论》云:“阴病治阳。”《素问·长刺节论》云:“迫脏刺背，背俞也。”正是背俞治疗相应脏腑疾病的明证［3］。急性尿潴留是常遇到的泌尿外科急症，严重危害着人类健康。针刺疗法是治疗该疾病常用的一种非药物疗法，对多种原因造成的急性尿潴留均有一定疗效，且无副作用。但在针灸治疗该疾病时，所选穴位差异较大，如何优选穴位成为一个值得研究的课题。本实验通过建立家兔急性尿潴留模型，电针膀胱下合穴委中、募穴中极和背俞穴膀胱俞，比较对膀胱内压［4］及膀胱组织 ATP 浓度［5］影响的差异，从而优选出治疗急性尿潴留等膀胱疾病的优势穴位，以指导临床应用。

1 材料与方法

1.1 实验动物与分组

健康清洁级成年雄性家兔48只，体重为（2.0±0.2）kg，由北京兴隆动物养殖厂【动物许可证号:SCXK（京）2011－0006】提供。实验过程中对动物的处置符合实验动物伦理学标准。家兔于兔笼内适应性饲养1周，清洁饮水，自由摄食，光照与黑暗为12 h交替，室温为20℃ ～22℃，相对湿度为60%。按随机数字表将家兔随机分为6组，分别为:正常组、模型组、电针非经非穴组、电针委中组、电针中极组、电针膀胱俞组，每组8只。

1.2 主要试剂与仪器

乌拉坦由北京环亚泰克生物医学技术有限公司提供，BL－420+型生物机能信号采集系统由成都泰盟公司研制，YP100型压力换能器由北京新航兴业科贸有限公司研制，BT223S型电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司），韩氏电针仪LD202H型由北京华卫公司研制，5415R高速离心机由德国Eppendorf公司研制，华佗牌一次性针灸针（直径0.25 mm×13 mm，苏州华佗医疗器械有限公司生产）。

1.3 动物模型的建立

参照Chien等［6］所建立的膀胱过度充盈模型进行。将家兔用20%乌拉坦（5 ml/kg）耳缘静脉麻醉，将其仰卧位固定于兔台上，用10#导尿管由尿道插入膀胱（6～7 cm），用4号丝线环绕尿道结扎，导净尿液，再以同样灌注速度用37℃温生理盐水充盈膀胱，灌注量达到测定膀胱容量的2倍，保持2 h后模型形成。造模后的膀胱内压较造模前降低50%以上，表示造模成功。

1.4 取穴方法

委中:膝关节屈面正中凹陷处［7］。中极:腹正中线上，耻骨联合上1寸（兔的胸腹前正中线上取剑突与耻骨联合上缘为13等分，每等分为1寸）［7］。膀胱俞:第2骶椎棘突下旁开1.5 cm处［7］。非经非穴:腓骨小头后下方，因为这个部位既不属于任一条经，也不是任一穴位，且方便操作，所以用来做本实验的对照穴位。

1.5 各组处理方法

正常组:只按同样方法麻醉，不造成急性尿潴留模型。模型组:家兔造成急性尿潴留模型后，不给予电针。委中组:家兔造成急性尿潴留模型后，立即针刺双侧“委中”，针刺深度为5 mm，并组成一回路连接于LD202H型韩式电针仪，采用疏密波，刺激频率为2 Hz，强度以针柄轻微抖动为宜（电流强度约0.5 mA），电针时间为20 min。中极组:家兔造成急性尿潴留模型后，立即针刺“中极”，并与中极和曲骨的中点组成一回路，电针方法同上。膀胱俞组:家兔造成急性尿潴留模型后，将家兔改为侧卧固定，立即针刺双侧“膀胱俞”，并组成一回路，电针方法同上。非经非穴组:家兔造成急性尿潴留模型后，立即针刺双侧“非经非穴（腓骨小头后下方）”，并组成一回路，电针方法同上。

1.6 指标检测

1.6.1 膀胱内压测定 各组膀胱内压测定时刻:正常组只测量1次即膀胱初始内压;模型组分别于造模前（即灌注2倍膀胱容量时即刻）、造模后（即灌注2倍膀胱容量2 h后还未排尿时）测量膀胱内压;电针组分别于造模前、后及电针前（即灌注2倍膀胱容量2 h及排尿后）、后测量。方法:用37℃温生理盐水，通过三通管一端的输液器，以大约3 ml/min的速度向膀胱内注生理盐水，三通管另一端与压力换能器相连，再与BL－420+型生物机能信号采集系统相连，同时观察膀胱内压的变化。

1.6.2 膀胱组织三磷酸腺苷（ATP）的取材及检测

各组家兔处理结束后，耳缘静脉注射空气10 ml处死家兔，立即剖腹取出膀胱，用生理盐水冲洗后称重，按照1∶4比例加入生理盐水匀浆，制成20%浓度的匀浆液，将匀浆液通过高速离心机离心，离心速度为3000 R/min，时间为15 min，取上清液。采用酶联免疫分析法（ELISA）检测膀胱组织ATP浓度。

1.7 统计学处理

2 结果

2.1 各组膀胱内压的比较

表1 各组造模前、后膀胱内压的比较（cmH2O，±s）

表1 各组造模前、后膀胱内压的比较（cmH2O，±s）

注:与造模前比较，△P ﹤0.01。

组别 n 造模前 造模后模型组 8 29.12 ±3.33 7.55 ±1.72△非经非穴组 8 27.47 ±2.47 9.82 ±1.08△委中组（BL 40） 8 23.79 ±3.40 7.82 ±1.21△中极组（RN 3） 8 32.35 ±3.55 14.53 ±3.01△膀胱俞组（BL 28） 8 23.41 ±3.35 9.99 ±0.95△

如表1所示，与造模前比较，造模后膀胱内压明显降低，差异有统计学意义（P﹤0.01），且造模后的膀胱内压较造模前均降50%以上，提示造模成功。

表2 各组电针前、后膀胱内压比较（cmH2O，±s）

表2 各组电针前、后膀胱内压比较（cmH2O，±s）

注:与电针前比较，★P﹤0.05;与委中组比较，△P﹤0.05;与中极组比较，*P ﹤0.05。

组别 n 电针前 电针后 d=（电针后－电针前）8 5.26 ±0.95 5.82 ±1.12 0.55 ±0.35委中组（BL 40） 8 4.84 ±0.68 5.60 ±0.74★ 0.77 ±0.27中极组（RN 3） 8 6.62 ±0.68 7.82 ±0.69★ 1.19 ±0.42膀胱俞组（BL 28） 8 6.63 ±0.84 9.18 ±0.98★ 2.54 ±0.66非经非穴△＊

如表2所示，与电针前比较，电针后委中组、中极组和膀胱俞组的膀胱内压变化均明显升高（P＜0.05）;与委中组和中极组比较，膀胱俞组的家兔膀胱内压变化差（电针后－电针前）明显较大（P＜0.05）。说明膀胱俞对急性尿潴留模型家兔膀胱内压的影响最大，委中组和中极组次之，非经非穴最差。

表3 各组膀胱ATP浓度比较（nmol/L，±s）

表3 各组膀胱ATP浓度比较（nmol/L，±s）

注:与正常组比较，*P﹤0.01;与模型组比较，☆P﹤0.01;与非经非穴组比较，△P﹤0.01;与委中组比较，◇P﹤0.01;与中极组比较，□P ﹤0.01。

组别 ATP浓度（nmol/L）26.36 ±1.92模型组 10.00 ±0.86*非经非穴组 8.47 ±1.40委中组（BL 40） 33.87 ±2.35☆△中极组（RN 3） 31.96 ±1.91☆△膀胱俞组（BL 28） 9.98 ±2.77正常组◇□

2.2 各组膀胱组织ATP的比较

由表3可以看出，与正常组相比，模型组的家兔膀胱组织ATP含量明显较低（P﹤0.01），说明造模后家兔膀胱组织ATP含量会降低;与模型组相比，委中组和中极组的家兔膀胱组织ATP含量明显偏高（P﹤0.01）;与非经非穴组比较，委中组和中极组的家兔膀胱组织ATP含量明显偏高（P﹤0.01）;与委中组和中极组比较，膀胱俞组的家兔膀胱组织ATP含量明显较低（P﹤0.01）。

3 讨论

急性尿潴留是指膀胱内充满尿液，且尿量超过正常膀胱容量，由于某种原因不能将尿液排出体外。膀胱内压是膀胱逼尿肌收缩构成膀胱壁的主动张力，在主观意识的控制下，逼尿肌产生强有力的收缩，在下尿路通畅的情况下产生并维持排尿，测定膀胱内压［4］可以了解逼尿肌的收缩功能和下尿路的通畅情况。ATP是嘌呤能神经的递质，通过与其受体结合参与多种功能调节。研究表明［5］急性尿潴留时，膀胱组织ATP浓度会发生改变，测定膀胱组织ATP浓度可以反映膀胱组织的ATP活性。因此本实验选取膀胱内压和膀胱组织ATP活性作为本实验的检测指标，检测电针膀胱特定穴对膀胱内压和膀胱组织ATP的影响。

治疗腑病当首选其下合穴——委中，古籍中记载委中治疗膀胱腑病较多。如《灵枢·邪气脏腑病形》篇云:“膀胱病者，小腹偏肿而痛，以手按之，即欲小便而不得，肩上热，若脉陷，及足小指外廉及胫踝后皆热，若脉陷，取委中央。”《甲乙经》及《千金方》记载委中主:“少腹坚肿。”《外台》记载:“遗溺，嵌急身热，少腹坚肿，少腹实热，小便难。”委中现代主要用于治疗泌尿系统疾病，有遗尿、尿潴留、癃闭［8］。针刺委中穴对膀胱压力有一定调整作用，一般可使膀胱内压力有不同程度下降，对松弛性膀胱或尿潴留者，可有治疗作用［9］。中极穴为膀胱募穴，又是足少阴肾经、足太阴脾经、足厥阴肝经与任脉的会穴，主治小腹、肝肾及前阴等疾患。实验研究表明，针刺中极可使紧张性膀胱内压降低，使弛缓性膀胱内压升高，具有双向调节的作用，也就是说既可以治疗癃闭，又可以治疗遗尿［10］。膀胱俞为膀胱背俞穴，为足太阳膀胱经穴，通过经络可使膀胱及尿道肌产生兴奋，有收缩作用，尿液自动排出［11］。

本实验结果显示，电针膀胱的不同特定穴对膀胱内压的影响不同，电针委中、中极和膀胱俞均使膀胱压力升高，膀胱俞优于中极和委中，中极与委中差异无统计学意义。电针膀胱的不同特定穴对膀胱组织ATP浓度的影响也不同，中极与委中对膀胱组织ATP浓度的影响明显大于膀胱俞，但二者之间无显著性差异。因此，从膀胱内压来看，膀胱俞效果较好，有利于急性尿潴留的及时排尿;而委中和中极有利于膀胱组织ATP浓度的升高，对ATP活性下降的膀胱组织有明显的改善作用。

本实验对膀胱的特定穴与膀胱的相关性作了探索性研究，也为针灸治疗急性尿潴留机制研究打下基础，同时为临床治疗急性尿潴留优选穴位提供了实验基础。

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