不同加工方法对川明参多糖及欧前胡素含量的影响

雷晓莉，张梅

川明参Chuanminshen viloaceum Sheh et Shan.为伞形科川明参属植物，其干燥根为四川常用道地中药材，具有润肺化痰、和胃、生津、解毒等功效，主治肺热咳嗽、热病伤阴，为滋阴要药[1]。其主产区分布在四川金堂、巴中、苍溪、中江等地。作为可药食两用的药材，川明参的市场需求量较大。但是目前川明参药材质量参差不齐，不同的产地加工方法是影响其药材质量的重要环节，近年来已引起了人们的广泛重视。为了解各种加工方法对川明参药材质量的影响，作者在前期工作基础上[2～4]，采用分光光度法和高效液相色谱法对不同加工方法所制得的川明参药材中多糖和欧前胡素含量进行测定，为建立川明参科学的加工方法提供实验依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器

LC-10AT型高效液相色谱仪（日本岛津）；UV1100可见紫外分光光度计（中国上海天美科学仪器有限公司）。

1.2 试药

欧前胡素（中国药品生物制品检定所，批号：110826-200511）；D-无水葡萄糖对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110833-200302）；甲醇（色谱纯，美国Fisher公司）；高纯水（实验室自制）；其余所用试剂均为分析纯。

1.3 药材

2011年购自四川苍溪县龙山镇，由成都中医药大学中药资源教研室裴瑾教授鉴定为伞形科川明参属植物鲜品川明参Chuanminshen violaceum Sheh et Shen.的根。将川明参根部洗净，等分为6份，每份随机抽取川明参根条20支，重复2次，分别按照以下方法进行加工。①直接晒干；②除去外皮后晒干；③煮后晒干；④除去外皮煮后晒干；⑤蒸后晒干；⑥除去外皮蒸后晒干；⑦传统加工品（市售成品）。

2 实验方法

2.1 水溶性多糖含量测定[2]

2.1.1测定条件 参考雷晓莉[2]的方法，采用苯酚-硫酸法对川明参多糖含量进行测定。

2.1.2 对照品溶液的制备 取105ºC烘干至恒重的无水葡萄糖25 mg，精密称定。置25 mL的容量瓶中，加少量蒸馏水溶解，定容至刻度，摇匀，配成1 mg mL-1的葡萄糖储备液，作为对照品溶液。

2.1.3 供试品溶液的制备 分别精密称取①—⑦号川明参样品细粉约0.5 g，加蒸馏水回流提取3次，每次90 min，合并三次提取液，过滤，滤液浓缩至50 mL。取浓缩液5 mL加入30%三氯乙酸溶液1 mL，振荡混合均匀后，4℃下静置过夜，离心（4000 r min-1），弃去沉淀，收集上清液。取上清液1 mL于50 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，即得样品溶液。

2.1.4 线性关系考察 分别精密吸取0.5 mL，1 mL，1.5 mL，2 mL，2.5 mL对照品溶液于50 mL容量瓶中，稀释至刻度，再各取2 mL于10 mL具塞试管中，加1.5 mL 5%苯酚试剂，混匀，精密加入6 mL浓硫酸，振摇后放置5 min，置沸水浴中加热20 min，立即转入冰水浴中冷却至室温，以蒸馏水为空白，在490 nm波长处测定吸光度。以吸光度对葡萄糖含量进行回归，得回归方程Y=10.871X+0.1683（r=0.9994）。

2.1.5 样品的含量测定 分别取样品溶液按照上述方法显色后测定吸光度。根据标准曲线方程计算样品中水溶性多糖的含量，结果见表1。

2.2 欧前胡素含量测定[3]

2.2.1 色谱条件 色谱柱：Phenomenex Luna C18 色谱柱(250 mm × 4.6 mm，5μm)；流动相：甲醇-水（65:35）；流速：1.0 mL min-1；检测波长：246 nm；柱温：30 ℃；进样量：10 μL；理论塔板数按欧前胡素峰记不低于2000。

2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取欧前胡素对照品适量，用甲醇溶解稀释至每1 mL分别含欧前胡素80.4μg的溶液。

2.2.3 供试品溶液的制备 精密称取①—⑦号川明参样品粉末（60目）约2 g，加甲醇20 mL 回流提取2次，每次2 h。提取液过滤，合并后蒸干，残渣加甲醇溶解后，定容至5 mL，即得供试品溶液。

2.2.4 线性关系考察 取对照品溶液，分别进样4 μL，8 μL，12 μL，16 μL，20 μL，24 μL，按上述色谱条件，测定欧前胡素峰面积积分值，得回归方程为：Y=79055X-766677（R2=0.9992）。

2.2.5 样品的含量测定 分别吸取供试品溶液各1 μL，注入高效液相色谱仪，按选定色谱条件测定，采用外标一点法计算川明参药材中欧前胡素含量，结果见表2。

3 实验结果及分析

3.1 对药材水溶性多糖含量的影响

采用不同方法初加工后川明参药材中水溶性多糖含量的变化，结果见表1。

表1 产地加工对药材水溶性多糖含量的影响（x±s,n=3）

从表中可以看出，直接晒干者水溶性多糖含量最高，其次是去皮晒干者，最低者为除去外皮煮后晒干者，水溶性多糖含量仅为10.29%，最高者是最低者的2.77倍。除去外皮的药材水溶性多糖含量明显低于不去皮者；经过煮制或者蒸制的药材水溶性多糖含量较低，与其他加工方法之间存在较大差异。

3.2 对药材欧前胡素含量的影响

采用不同方法初加工后川明参药材中欧前胡素含量的变化，结果见表2。

表2 产地加工对药材欧前胡素含量的影响（x±s,n=3）

从表中可以看出，直接晒干者欧前胡素含量最高，其次是蒸后晒干者，最低者为除去外皮蒸后晒干者，最高者是最低者的8.4倍。除去外皮的药材欧前胡素含量明显低于不去皮者，传统加工品与其他加工方法之间存在显著性差异。

4 讨论

4.1 川明参常用产地加工方法为：新鲜川明参→硫磺熏软→水中浸泡→去皮→沸水煮制→晾晒。这种传统的加工方法得到的川明参色白，质硬，外观较好。但其中有效成分损失较大，多糖含量仅为8.55%，欧前胡素含量为0.0003 mg g-1。究其原因，川明参多糖是水溶性成分，传统加工过程中药材与水接触时间较长，这可能是导致川明参多糖损失较大的直接原因。此外去皮操作也造成了多糖和欧前胡素的直接损失，带皮川明参中多糖含量、欧前胡素含量明显高于去皮川明参，川明参皮中二者含量的高低还有待于进一步研究。

4.2 研究结果表明，直接晒干的川明参中多糖和欧前胡素含量最高，但是川明参含糖量高，黏性较重，直接晾晒不易干燥完全，在此过程中可能存在一定程度的代谢活动，造成药材某些成分的分解，同时也会因水分较多使药材产生霉烂现象。如采用沸水浸烫或高温短时间蒸制，可立即破坏根中的各种代谢酶类，避免成分分解，同时还能缩短干燥时间，便于药材贮存，且有效成分损失相对较少。因此综合考虑各种因素，对川明参药材采用不去皮蒸制的方法不失为一种相对较好的产地加工方法。

[1] 四川省中药材标准[M].四川:四川省卫生厅,1987:11.

[2] 雷晓莉,宋芳芳,彭成,等.不同产地川明参药材中多糖含量测定[J].中药与临床,2011.2(1):49.

[3] 李宏,赵波,刘静,等.RP-HPLC测定川明参药材中香豆素含量[J].成都医学院学报,2010,5(2):122.

[4] 童富淡,胡家恕,宋勤.不同方法加工杭白芍的芍药苷含量和FTIR光谱特征[J].中国药学杂志,2006,41(16):1262.