口服阿苯达唑三种不同溶液抗小鼠旋毛虫成囊期幼虫的效果观察＊

李润花，赵文婧，裴彦江，李起超，殷国荣

旋毛形线虫（Trichinella spiralis），简称旋毛虫，其成虫和幼虫分别寄生于同一宿主的小肠和肌肉内，由其引起的旋毛虫病（trichinosis）是一种严重的人兽共患寄生虫病。成囊期幼虫（肌肉期幼虫）可在宿主肌肉中存活数年，既是主要致病期，又是唯一传播虫期。近年来，烧、烤、涮等饮食方式的多样化，已发生多起旋毛虫病暴发，旋毛虫病发病率有逐年上升的趋势［1］。

阿苯达唑对旋毛虫的幼虫和成虫均有效，已成为治疗旋毛虫病的首选药物［2］。但是，阿苯达唑治疗同一种寄生虫病的疗效存在很大差异，这是由于阿苯达唑的低水溶性及肠道的低吸收率所致［3］。动物研究表明，提高阿苯达唑生物药效率的主要策略是应用共溶剂或表面活性剂以增加水溶性和脂溶性。将阿苯达唑与共溶剂（二甘醇单乙醚）结合可使小鼠体内阿苯达唑的相对生物药效率增加1.8倍［4］。与商品片剂相比，用花生油－吐温80或羟丙基－β－环糊精作为赋形剂可提高阿苯达唑生物药效率4.3～9.7倍［5］。大豆油可增加阿苯达唑溶解度，其相对生物药效率比片剂提高了1.6倍［6］。

本研究比较了吐温－80、羧甲基纤维素和羟丙基－β－环糊精作为阿苯达唑片剂的溶剂对其抗小鼠旋毛虫成囊期幼虫效果的影响。

1 材料与方法

1.1 阿苯达唑及溶剂 阿苯达唑（Albendazole，ABZ）片剂，购自中美天津史克制药有限公司，批号10110360。吐温－80，天津市光复精细化工研究所。羧甲基纤维素（Carboxymethyl cellulose，CMC）、羟丙基－β－环糊精（hydroxypropyl-β-cyclodextrin，HP-β-CD），购自美国Sigma公司。

1.2 实验动物及虫株 8周龄BALB/c小鼠32只（SPF级），体重20～24g，购自中国医学科学院实验动物研究所。旋毛形线虫（T.spiralis），山西医科大学医学寄生虫学研究所小鼠保种。

1.3 动物感染与治疗 将小鼠随机分为4组，每组8只。每鼠口饲感染成囊期幼虫50条，感染后第14 d，顿服300mg/kg，吐温－80和3%乙醇溶液配制成阿苯达唑混悬液［7］，驱除肠道成虫。驱虫后第29 d，分别用不同溶剂的阿苯达唑治疗，连续6d，剂量均为200mg/（kg·d）。对照组不治疗。吐温组：阿苯达唑用7%吐温－80和3%乙醇溶解；羧纤组：用1%羧甲基纤维素和3%乙醇溶解；羟环组：用7%羟丙基－β－环糊精3%乙醇溶解。45℃磁力搅拌10h，以使阿苯达唑充分溶解。

1.4 疗效观察 治疗后第14d处死小鼠，压片法镜检计数膈肌和腓肠肌成囊期幼虫。按照李润花等［8］制定的判断存活和死亡成囊期幼虫的标准，确定幼虫的存活或死亡。以每克肌肉中成囊期幼虫的总虫数、活虫数和死亡虫数为疗效评价指标，计算减虫率、活虫率和死虫率。总虫数＝镜检虫数÷肌肉重量（克）；减虫率＝［（对照组平均虫数－治疗组平均虫数）÷对照组平均虫数］×100%；死虫率＝死亡虫数÷总虫数×100%。

1.5 统计学分析 数据采用（±s）表示，使用SPSS11.5统计学软件处理。多个样本均数比较用方差分析及LSD-t检验，P＜0.05为差异显著。

2 结 果

2.1 小鼠健康状况 实验期间，各组小鼠采食、饮水正常，健康状况良好，未见药物不良反应。

2.2 成囊期幼虫的虫荷及减虫率、死虫率 与对照组相比，3个治疗组膈肌和腓肠肌中成囊期幼虫总虫数和存活虫数均显著减少（P＜0.05、P＜0.01），死亡虫数显著增加（P＜0.05、P＜0.01），疗效最高的为羟环组。将吐温组阿苯达唑的相对药效率设为1.0，以减虫率计算，羧纤组和羟环组对膈肌和腓肠肌中成囊期幼虫相对药效率分别为吐温组的1.55、1.33和1.95、1.83倍；而以死虫率计算，该数据分别为1.93、1.82和2.45、3.22倍（表1、2）。

3 讨 论

薛剑等实验表明，连续7d口服阿苯达唑200 mg/（kg·d）治疗小鼠旋毛虫成囊期幼虫，总虫数显著少于对照组（P＜0.01），膈肌减虫率为71.8%［7］。本研究中吐温组的阿苯达唑剂量及配制方法与薛剑等的实验相同，但膈肌和腓肠肌的减虫率仅为28.13%和42.95%。出现这种差异的原因虽然与本研究给药时间较短（6d）有关，但主要原因是薛剑等的实验是采用胃蛋白酶消化法回收肌肉中的幼虫，只有当幼虫的活力较强时，才能被回收，亦即死亡和受损幼虫都不可能被回收计数，因而治疗组回收的幼虫较少。而本研究是采用肌肉压片法计数肌肉中的幼虫，无论是活的或死亡的幼虫都被计算到总虫数中，故而治疗组的减虫率相对较低。支持这一观点的直接证据是，本研究治疗组膈肌的活虫数显著减少，而死虫数显著增加。

表1 口服不同溶剂对阿苯达唑抗小鼠膈肌旋毛虫成囊期幼虫的效果Tab.1 Effect of 3different oral liquid formulations of albendazole against Trichinella spiralis encapsulated larvae in diaphragmatic muscle in mice

表2 口服不同溶剂对阿苯达唑抗小鼠腓肠肌旋毛虫成囊期幼虫的效果Tab.2 Effect of 3different oral liquid formulations of albendazole against Trichinella spiralis encapsulated larvae in gastrocnemius muscle in mice

本研究的主要发现是，口服相同剂量阿苯达唑，用1%羧甲基纤维素和3%乙醇（羧纤组）或7%羟丙基－β－环糊精3%乙醇溶解阿苯达唑（羟环组），膈肌和腓肠肌的减虫率、死虫率均显著高于7%吐温－80和3%乙醇（吐温组）溶解，阿苯达唑的相对药效也显著提高。这些数据表明，用羧甲基纤维素和羟丙基－β－环糊精溶解阿苯达唑可有效提高其生物药效率。

已有研究表明，在小鼠旋毛虫感染模型比较了阿苯达唑－环糊精混合剂（ABZ-CDC）和阿苯达唑－羧甲基纤维素混悬液（ABZ-CMC）的生物药效率和驱肠虫效能。ABZ-CDC的驱肠虫效能和活性代谢物（ABZSO）血浆浓度显著高于 ABZ-CMC［9］。García等研究表明，口服溶于羟丙基－β－环糊精（HP-β-CD）的阿苯达唑溶液的生物药效率和驱虫效果优于羧甲基纤维素（CMC）阿苯达唑混悬液［10］。Casulli等也证实，HP-β-CD可有效提高阿苯达唑的生物药效率和抗旋毛虫成囊期幼虫的效果［11］。

表面活性剂吐温－80可增加阿苯达唑的脂溶性，乙醇也为脂溶性溶剂，CMC则常作为片剂的黏合剂、崩解剂或混悬剂的助悬剂，HP-β-CD可增加阿苯达唑的水溶性。本研究表明可增加水溶性的HP-β-CD（7%）与增加脂溶性的乙醇（3%）制备的阿苯达唑溶液的生物药效率和抗旋毛虫成囊期幼虫效果显著高于吐温－80与乙醇溶剂，也优于CMC与乙醇溶剂。

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