血浆纤维蛋白原、IL-17水平与脑梗死病程相关性的研究

唐万兵 李梅笑 李观强 武 胜 万彦彬 韦 深 蔡洁丹

1.广东省深圳市龙岗区人民医院检验科，广东深圳 518172；2.广东省深圳市龙岗区人民医院神经内科，广东深圳 518172；3.广东省深圳市龙岗区人民医院影像科，广东深圳 518172

近年来，脑梗死的发病率出现增高趋势，其病程涉及到炎症反应、凝血障碍等因素，是一个复杂的病理生理过程。纤维蛋白原是凝血因子Ⅰ，它的含量与凝血酶活性有关；IL-17是一种新近命名的Th17细胞来源的强有力的炎症细胞因子，主要由CD4+T细胞分泌，与广泛存在的IL-17受体结合产生促炎症反应，是近年来人们研究的热点。本课题研究IL-17水平变化来评估它们与脑梗死病程的关系，为预防及治疗脑梗死提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择本院2010年10月～2011年12月神经内科住院的50例急性脑梗死患者，男32例，女18例，年龄36～85岁，平均（67.2±16.9）岁，发病时间 30 min～8 h，平均 4 h，发病为首次或上次未留后遗症，无短暂缺血发作，无心脏病和肾脏等病史，并经头颅CT或MRI检查确诊；健康对照组20例，为我院体检中心体检者，均排除脑血管病、心肌梗死、周围血管病、甲状腺疾病、结核、肝肾脏疾病等。分组：50例脑梗死患者发病24 h内，根据头部CT或MRI病灶大小，梗死体积按Pullicino公式（长×宽×层数/2）计算，分为大梗死组（病灶体积＞10 cm3）8 例，中梗死组（病灶体积 4～10 cm3）15 例，小梗死组 （病灶体积＜4 cm3）27例。分型：50例脑梗死患者发病24 h内，根据1995年全国第4届脑血管病学术会议制定的脑卒中患者临床神经功能受损程度按照入院时NIHSS中风评分，分为重型组（30～42 分）10 例，中型组（15～29 分）14 例，轻型组（0～14分）26 例。

1.2 方法

1.2.1 标本采集和处理 脑梗死组分别在发病后24 h内静脉采集柠檬酸钠（1∶9）抗凝管3 mL，充分混匀以3 000 r/min离心15 min，FIB必须在2 h内检测完毕。IL-17如不能立即检测，吸取足量血浆后放-70℃冰箱待检，复融后30 min内检测。

1.2.2 试剂与仪器 上海锦珈生物科技有限公司的人IL-17 ELISA试剂盒，试剂号：DRE10416。-70℃SANYO冰箱，PW-812自动洗板机，RT-6000型酶标仪 （性能评价符合要求），Sysmex CA-6000全自动血凝仪及Dade Behring试剂。

1.2.3 实验方法 IL-17采用双抗体夹心ELISA法，严格按照试剂说明书操作，以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的IL-17浓度由酶标仪根据其OD值自动计算，再乘以稀释倍数；FIB结果由全自动血凝仪检测。

1.3 统计学方法

采用SPSS 11.5软件进行统计学分析，计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，多组间的比较用单因素方差分析，组间的比较采用LSD-t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组间FIB、IL-17的检测结果及与梗死体积的相关性

大梗死组发病24 h内FIB、IL-17水平明显高于对照组（P＜0.01）；中、小梗死组发病24 h内FIB、IL-17水平高于对照组（P＜0.05）；大梗死组FIB、IL-17水平高于小梗死组（P ＜ 0.05）；脑梗死体积与 FIB 水平呈正相关（r=0.316），与IL-17水平呈正相关（r=0.331）。见表1。

表1 各组间FIB、IL-17的检测结果及与梗死体积的相关性 （x±s）

2.2 各型间FIB、IL-17的检测结果及与NIHSS评分的相关性

重型组发病24 h内FIB、IL-17水平明显高于对照组（P＜0.01）；中、小型组发病24 h内FIB、IL-17水平高于对照组（P ＜ 0.05）；重型组 FIB、IL-17水平高于轻型组（P ＜ 0.05）；脑梗死神经功能受损程度NIHSS评分与FIB水平呈正相关（r=0.338），与 IL-17 水平呈正相关（r=0.325）。见表 2。

表2 各型间FIB、IL-17的检测结果及与NIHSS评分的相关性（x±s）

3 讨论

脑梗死是目前严重威胁中老年人健康的主要疾病之一，目前，其发病机制尚不清楚。有关脑梗死进展方面尚缺乏有效的预测手段。目前对脑梗死的诊断和临床观察多依赖头部CT、磁共振、脑电图及脑血流图检查，对脑梗死诊断及预后判断方面有意义的临床检验指标很少[1-2]。

纤维蛋白原在凝血酶的作用下，释放出纤维蛋白肽A和纤维蛋白肽B后，生成纤维蛋白单体，沉积于血管壁，损伤血管内皮细胞而促进动脉硬化，刺激平滑肌细胞增生迁移，增加血液黏稠度和影响白细胞及游离脂肪酸，从而促使血栓形成。本研究结果显示：大梗死组、重型组发病24 h内FIB水平明显高于对照组（P＜0.01），中梗死组、小梗死组、中型组、轻型组发病24 h内FIB水平高于对照组（P＜0.05）。大梗死组与小梗死组比较，重型组与轻型组比较，FIB水平增高（P＜0.05）。FIB水平与梗死体积呈正相关（r=0.316），与脑梗死神经功能受损程度NIHSS评分呈正相关（r=0.338）。大量研究表明，脑梗死患者发病前血液呈高凝状态[3-5]。FIB的高浓度水平会直接导致血液的高黏、高凝状态，增强红细胞和血小板的聚集性，影响组织器官的血液灌注，甚至促使血栓形成。高FIB浓度是脑梗死发生及预后不良的原因之一。

IL-17的基因位于人染色体6p12，该蛋白含有155个氨基酸，分子质量为35 ku，是一个由二硫键连接的同源二聚体组成的糖蛋白，IL-17主要由记忆性T淋巴细胞分泌，在天然免疫和宿主防御中发挥作用调控粒细胞生成，对细胞外病原体的入侵产生阻断作用，同时和自身免疫性疾病关系密切[6-8]。本研究结果显示：大梗死组、重型组发病24 h内IL-17水平明显高于对照组（P＜0.01），中梗死组、小梗死组、中型组、轻型组发病24 h内IL-17水平高于对照组（P＜0.05）。大梗死组与小梗死组比较，重型组与轻型组比较，IL-17水平增高（P＜0.05）。 IL-17水平与梗死体积呈正相关（r=0.331），与脑梗死神经功能受损程度NIHSS评分呈正相关 （r=0.325）。国内外的研究证实，大鼠大脑中动脉闭塞后1 h IL-17即轻度增高，缺血后6 d时达高峰，IL-17 mRNA表达上调可诱导 IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α 和 ICAM-1 表达[9-10]。 随着脑微血管栓塞，炎症加重，IL-17应激性增高，与多种细胞因子产生协同作用以放大炎症反应，使脑部缺血、缺氧、神经元损伤加重。IL-17水平越高，脑梗死病情也越严重，预后也越差。

综上所述，脑梗死患者血浆纤维蛋白原、IL-17水平与病程密切相关，早期治疗并改善患者高凝状态，有效阻断IL-17会减少损伤性细胞因子的产生，减轻梗死后脑组织损伤有极其重要的意义。在发病的早期检测血浆纤维蛋白原、IL-17水平有助于脑梗死的预防、诊断及预后的评估。

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