桑叶的化学成分研究

杨艳

（云南省大理州人民医院，云南大理 671000）

桑叶（Folium Mori）为桑科植物桑（Morus alba L.）的干燥叶，其味苦、甘，性寒，归肺、肝经，具有疏散风热、清肺润燥、平肝明目、凉血的功能[1]。现代药理学及化学分析研究表明桑叶具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗病毒等多种活性物质，还具有抗肿瘤、抗病毒、抗丝虫等作用[2-4]。另外，桑叶内含丰富纤维素，具有导泻通便、保护肠黏膜和减肥的作用[5]。

该试验以桑叶为研究对象，运用物理、化学等方法综合分析桑叶的化学成分，旨在为桑叶的广泛应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试材料。试验用桑叶购自大理市三月街药材市场，经大理州药检所中药室鉴定为桑叶。

1.1.2 主要试剂。薄层层析用硅胶GF254、柱层析用硅胶（100-200目）均由青岛海洋化工有限公司生产；Sephadex LH-20由瑞典 Amersha Pharmacia Biotech公司生产；薄层色谱硅胶及硅胶柱其他所用试剂均为分析纯。

1.1.3 主要仪器。RD1型熔点测定仪（温度计未经校正）由天津国铭医药设备有限公司生产；GCMSQP2010型气质联用仪由日本岛津公司生产；Varian UNITY INOVA-400型高分辨核磁共振仪（TMS内标）由美国瓦里安公司生产。

1.2 方法

1.2.1 提取与分离。干燥桑叶5 kg，95%乙醇回流提取3次，每次2 h，回收乙醇至无醇味，水混悬，搅拌，放置过夜。混悬液先后分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取得到3个部位。石油醚部位，经反复硅胶柱层析，氯仿-醇进行梯度洗脱，反复聚酰胺层析，氯仿-甲醇进行梯度洗脱，以及 Sephadex LH-20柱层析，氯仿-甲醇洗脱，分离得到化合物1（120 mg）、2（90 mg）、3（21 mg）。乙酸乙酯萃取部分回收有机溶剂至干后，上Lipophilic Sephadex柱，用氯仿将叶绿素洗脱后，用甲醇冲柱，取甲醇洗脱部分浓缩至干，再反复经硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析，得化合物 4（12 mg）、5（23 mg）、6（34 mg）。

1.2.2 分析方法。通过与标准品对照、理化性质检测及相关波谱学方法分析，对提取和分离出的化合物进行结构鉴定。

2 结果与分析

化合物1：白色针状结晶，mp：139～140℃。不溶于水、甲醇、丙酮，易溶于石油醚、乙醚、氯仿。经TLC试验，用不同的展开系统：氯仿︰甲醇（9︰1）、石油醚︰乙酸乙酯（6︰1）、石油醚︰丙酮（8︰1），试样与 β-谷甾醇对照品的Rf值相同；以10%H2SO4-EtOH液显色，均呈紫红色斑点。与对照品混合后测熔点，不下降，且与文献[6]一致，从而确定该化合物为β-谷甾醇。

化合物2：白色粉末，mp：292～293 ℃，经TLC试验，用不同的展开系统：氯仿︰甲醇(6︰1)、石油醚︰乙酸乙酯(4︰1)、石油醚︰丙酮(9︰1)，试样与 β-胡萝卜苷对照品Rf值相同；以10%H2SO4-EtOH液显色，均呈红色斑点。与对照品混合后测熔点，不下降，且与文献[7]一致，从而确定该化合物为β-胡萝卜苷。

化合物 3：淡黄色针晶（乙酸乙酯），mp：207～208℃，Borntrager’s反应阳性，显示可能为羟基蒽醌类化合物。1HNMR(400 MHz，CDCl3) δ：2.45（3H，s，CH3），3.93 （3H，s，OCH3），6.89 （1H，d，J=2.2 Hz，H-7），7.22（2H，s），7.53（1H,s,H-4），12.13（1H,s,-OH），12.15（1H,s,α-OH）。13CNMR（DMSO）δ：166.8，166.2，161.5，148.8，135.1，133.2，124.2，120.8，113.5，110.1，107.8，106.6，56.2，22.3。以上数据与文献[8-9]基本一致，从而确定该化合物为大黄素甲醚。

化合物4：油状化合物，易溶于二氯甲烷、氯仿等溶剂。1HNMR（400 MHz，CDCl3） δ：0.98（6H，t），1.47（4H，m），1.72（4H，t），4.29（4H，t），7.61（2H，m），7.72（2H，m）。13CNMR（DMSO）δ：169.3，133.8，132.5，130.2，66.7，31.9，20.5，14.1。以上数据与文献[4,10]基本一致，从而确定该化合物为邻苯二甲酸丁二酯。

化合物5：白色针状结晶，紫外灯下有蓝色荧光，易溶于甲醇、DMSO、乙酸乙酯。1HNMR（400 MHz，CDCl3）δ：6.22（1H，d，J=9 Hz），6.73（1H，d，J=2 Hz），6.78（1H，dd，J=8.5 Hz，2 Hz），7.55（1H，d，J=8.5 Hz），7.92（1H，d，J=9.5 Hz），10.56（1H，s）。13CNMR（DMSO）δ：161.9，160.7，155.8，144.8，130.2，113.6，111.9，111.6，102.5。以上数据与文献[11]基本一致，从而确定该化合物为7-羟基香豆素。

化合物6：白色片状结晶，mp：104～105℃，Libermann 反应阳性，1HNMR（CDCl3）δ：0.72～2.73（m，43H），3.24（1H，m），3.52（br，OH），5.04（1H，m），5.16（1H，m），5.35（1H，m）。13CNMR（DMSO）δ：140.8，121.7，71.9，56.8，56.6，50.2，42.4，42.3，40.6，37.3，36.6，31.9，31.7，30.3，29.2，24.1，21.3。以上数据与文献[12]基本一致，从而确定该化合物为豆甾醇。

图1 化合物Ⅰ～Ⅵ

3 结论

从桑叶乙醇提取物的石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取部分分离得到6个化合物，经与标准品对照、理化性质检测及相关波谱学方法分析，分别鉴定为β-谷甾醇、β-胡萝卜苷、大黄素甲醚、邻苯二甲酸丁二酯、7-羟基香豆素、豆甾醇。

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