丙肝抗体假阳性检测中ELISA法应用分析

葛鲁伟

（吉林市红十字中心血站，吉林省 吉林市132001）

酶联免疫吸附法，即ELISA法，是临床常用的酶免疫测定方法，现被广泛应用于各种抗原和抗体的检测中，经过临床证实，此方法能确定绝大部分的抗原抗体阳性或阴性结果，但是，也会出现不少的假阳性或者假阴性。这样的情况，对临床的确诊或血液传播疾病的筛查有很大的影响［1］。丙肝抗体假阳性，就是其中常见的结果不准确情况。为了更好地避免此种情况的发生，使酶联免疫吸附法对丙肝抗体的检验更准确，我站对153例中31例经酶联免疫吸附法检测为阳性，但经过核酸扩增荧光分析法检测为阴性的情况，进行综合分析，报道如下。

1 资料与方法

153例病例为2009年1月—2010年2月进行丙肝抗体检验的患者血液标本。经酶联免疫吸附法检测结果为弱阳性，为确诊是否为阳性，再次经过核酸扩增荧光分析法进行检测。

酶联免疫吸附法采用全自动酶联免疫检测仪、自动酶标洗板机，核酸扩增荧光分析法采用DA－7600核酸扩增实时荧光基因分析仪。标本检验严格按照说明书进行。

2 结果

153例丙肝抗体ELISA检测结果为弱阳性的标本，经核酸扩增荧光分析法检测后，有132例结果仍为阳性，阳性率为86.27%；有21例标本检验结果为阴性，证明，ELISA的假阳性率为13.73%。

3 假阳性结果分析

经过对该21例假阳性结果的分析，我院总结其产生假阳性结果主要因为以下几点：

3.1 标本内物质干扰

标本中含有的物质，对酶联免疫法的检测结果可能起到相应的影响。标本中含有类风湿性因子，尤其是在患有类风湿性疾病和患有自身免疫性疾病的患者中，其类风湿因子多为IGG，在进行丙肝抗体检测时，IGG也可能与酶联免疫吸附时的固相IGG、酶标IGG发生结合［2］，进而增加了丙肝检测的阳性情况，产生弱阳性。

高免疫球蛋白血症的患者，由于血清中存在浓度相对较高的非特异性IGG［3］，可能会导致其与检测时的固相表面相吸附，随后再加入酶标抗人IGG时，再与之结合，产生阳性结果。

标本中如果存在过多的SOD，也可能会干扰检测结果，使结果呈现阳性。有研究表明，ELISA法在检测丙肝抗体阳性的标本时，标本S／CO值在1.03～3.30之间，容易出现假阳性［4］。

标本在分离时，不能充分分离，或者在采集运送储存过程中，被细菌污染，产生标本溶血或者标本凝固不全，都可能产生阳性结果。

3.2 检验过程操作因素

标本在进行检验时，如果加样时间过长，就可能使加样后在恒温箱的等待时间相对过长，使得检测结果为阳性。

洗板是酶联免疫吸附法中的重要部分，在自动洗板仪进行洗板时，如果洗板针被堵塞，抽吸不充分［5］，或者洗板机内洗液量不足，也会引起假阳性。如果使用手工的洗板，洗板次数若太少，就可能造成残留，使得出现阳性结果。

快速检验虽然能避免结果的假阳性，但是，如果检验速度过快，也可能导致假阳性结果，这主要是因为，血液在未完全凝固时，如进行强行的离心，可能导致血清中仍有纤维蛋白原的存在，使得在检测时形成纤维蛋白块，造成阳性结果出现。

3.3 其他

标本的检测试剂，也会对标本的结果产生影响，使结果显示为阳性或者阴性。因此，实验室在选择试剂时，需选择高质量的试剂，且不同试剂不可混用。

4 讨论

丙型肝炎，是我国较为常见的一种肝炎疾病，其发病率仅次于乙型肝炎。很多患者在被丙型肝炎病毒感染后，都可能转为慢性丙型肝炎。此病的临床治疗较为困难，且易转为肝硬化或者肝癌。

通过酶联免疫吸附法对丙型肝炎的抗HCV进行检测，是临床常用的检测方法，尤其用于急性或者慢性的丙型肝炎患者进行检测，可取得很好的效果。这种方法，是利用酶的高催化作用和放大作用，与标本内的特异性抗原－抗体反应结合，以显色的结果做判断，进而检测免疫结果的技术。此方法有很高的敏感性，而且操作简单，价格低廉，且有较高的特异性。

如何避免这种假阳性结果的出现，使ELISA检测结果准确率更高，需要涉及此环节的人员都必须进行注意。从采集标本，到标本的运输，再到标本进行检测，都需要医护人员的高度重视。在检测前，充分了解患者的情况，在患者患有会影响检测结果的疾病时，在检验申请单上进行标注，以帮助实验室检验人员对结果进行准确的判定。标本运输储存时，不要剧烈震荡，并使运送时间要尽量缩短，确保血液能在最短时间内被检测，以免出现长时间的常温储存干扰检验结果。在检测时，严格按照检测程序进行检测，不可操之过急，更不能马虎大意，操作要做到快中有稳。同时，实验室需每日进行质控，检验前确保检验仪器的正常有效。如果检验结果在发生弱阳性等情况时，及时进行复检。

［1］张志梅.ELISA法检测丙肝抗体出现假阳性的分析［J］.中国社区医师：医学专业半月刊，2009，11（24）：187.

［2］陈景芬.酶联免疫吸附试验检测丙型肝炎病毒抗体影响因素分析［J］.检验医学与临床，2008，5（13）：821.

［3］杨志栋，和殿峰.ELISA法测丙肝抗体假阳性分析［J］.中国中医药现代远程教育，2010，08（17）：263.

［4］刘艳辉.MEIA法与ELISA法检测丙型肝炎病毒抗体结果比较［J］.传染病信息，2009，22（4）：233－234.

［5］周东升，孙宏勋，卢亚敏，等.ELISA法检测丙型肝炎抗体［J］.临床合理用药杂志，2009，2（19）：125.