来祝檩 郭超群 李运琴
(河南省焦作市中心血站,河南 焦作 454000)
冷沉淀的检测指标主要是凝血因子Ⅷ和纤维蛋白原(Fbg),临床上主要用于甲型血友病、血管性假性血友病以及先天性或获得性纤维蛋白缺乏导致的出血、外科大手术及大出血的治疗,冷沉淀凝血因子质量的差异直接影响治疗效果。CA-50 和CA-510是希森美康公司CA系列的半自动/全自动血凝仪,依据散色光加百分比(去本底)原理,可快速对血液中的凝血因子进行相关检测。为了更好地对冷沉淀中的Ⅷ因子和Fbg进行质量控制,本文对这两种型号血凝仪检测凝血因子Ⅷ和Fbg的结果进行比较,报道如下。
半自动血凝仪(型号CA-50,日本Sysmex公司生产);全自动血凝仪(型号CA-510,希森美康医用电子(上海)有限公司生产);因子Ⅷ活性测定试剂、纤维蛋白原测定试剂、Owren's Veronal 缓冲液、活化部分凝血活酶时间测定试剂(APTT)、CaCl2溶液、Ⅷ因子和纤维蛋白原质控品均由希森美康医用电子(上海)有限公司提供。
按照仪器使用说明书进行操作,在检测前用Ⅷ因子和纤维蛋白原质控品给CA-50和CA-510重新设定标准曲线;融化一袋冷沉淀,混匀后分出10份样品,分别用CA-50和CA-510检测其中的Ⅷ因子和Fbg。
采用配对t检验,结果如表1所示。
两种型号仪器检测Ⅷ因子和Fbg结果无显著性差异,但CA-510 的重复性远远优于CA-50。
影响CA-50检测结果重复性的最重要的因素就是加样过程。因为是手动加样且样品用量非常少(仅有5~10μL),加样量的微小变化就可以导致检测结果明显偏高或偏低。在实际工作中,吸液和加样的力度很难保持不变。同时,若加样枪头与加样枪结合不够紧密,也会造成吸液及加样误差,使检测结果偏低。在使用CA-50时,一方面要尽量准确加样,另一方面要注意加第二试剂和第三试剂的速度,速度太慢则仪器感应不到,会终止反应。CA-510采用的是自动吸取标本和试剂,自动定标,自动稀释的一体化操作流程,操作简便、快速,定量精准,重复性好。但检测前需处理好样品及试剂,样品液面不能有气泡,否则检测时仪器将认为样品量不足而不处理该样品;试剂不足则试验会被迫中止,影响检测效率。
表1 不同型号仪器检测冷沉淀中Ⅷ因子和Fbg结果