电针对椎动脉型颈椎病模型兔血浆内皮素、血清超氧物歧化酶影响的研究*

周建伟，张 昭，唐 勇，卢圣锋

(1.四川省中医药科学院，四川成都610041;2.四川省绵阳市中医院，四川绵阳621000;3.成都中医药大学，四川成都610075)

颈椎病是临床常见病、多发病之一，椎动脉型颈椎病(Cervical Spondylosis of Vertebral Artery Type，CSA)是颈椎病的常见类型，一旦患有该病，往往缠绵难愈，不仅长期折磨患者，也给家庭、社会带来负担。笔者在开展针灸推拿治疗CSA临床研究取得满意疗效的基础上，于2006年8月至2007年12月以椎动脉型颈椎病兔模型为对象，观察电针对模型兔血浆内皮素(ET)和血清超氧物歧化酶(SOD)的影响，旨在探讨电针治疗CSA的作用机理。现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 动物

健康日本大耳白兔40只，体重2.5～3 kg，雌雄各半。由成都中医药大学动物房提供。

1.2 药物、试剂及实验器材

内皮素放射免疫测定试剂盒:解放军总医院科技开发中心放免所(原北京东亚免疫技术研究所)，批号040423。超氧化物歧化酶测试盒:南京建成生物工程研究所，批号040425。消痔灵注射液:北京双鹤药业股份公司生产，zz－4965－京卫药准字(1998)第104094号。戊巴比妥钠:中国医药(集团)上海化学试剂公司。MT－1000A型彩色多谱勒仪。G6805－1型电针仪:青岛鑫生实业有限公司，编号20030561。华佗牌针灸针:苏州医疗用品厂有限公司，规格:Φ0.30×13 mm。电热恒温培养箱:天津实验仪器厂。移液管:5 μl、100 μl、200 μl、1000 μl，eppendof。电子分析天平(DF110):常熟仪器设备厂。高速冷冻离心机(CR22G):日立工机株式会社。TsT GW可见光分光光度计:上海分析仪器厂。

1.3 方法

1.3.1 造模方法 选择体重2.5～3 kg健康成年日本大耳白兔，雌雄各半，随机分为空白组和模型组，每组20只。空白组不予造模。模型组以脱毛剂将左侧自枕后及颈部的体毛脱掉，消毒，用硬化剂10 ml注射于 C3～C5颈椎横突侧面，分别于第2、4、6、8周重复注射1次。8周后 TCD检测造模后模型组与空白组椎－基底动脉血流动力学状态，检测结果显示椎－基底动脉血流动力学出现异常者为造模成功。造模过程中，空白组2只、模型组3只动物无明显原因死亡，空白组4只、模型组3只动物出现身体不同部位的疮疡，14只动物经TCD检测示造模成功。

1.3.2 实验分组 将造模成功的14只动物随机分为模型组和模型加电针组(简称模针组)，每组7只;14只未经造模的动物随机分为空白组和空白加电针组(简称空针组)，每组7只。

1.3.3 治疗方法 治疗从造模成功后第3天开始，模针组、空针组予以电针“百会”、“风池”(双侧)、颈1～3夹脊(双侧)(参照中国针灸学会实验针灸分会制定的《动物针灸穴位图谱》)，“百会”直刺0.3～0.5 cm;双侧“风池”斜向内下方刺入0.5～0.8 cm;颈1－3夹脊(双侧)直刺0.5～0.8 cm。进针后，不进行手法刺激，连接电针仪，正极连接双侧风池，负极连接双侧颈2夹脊以形成刺激回路，施以疏密波，频率2～100 Hz，电压2～4 V，强度至肌肉抖动而不出现嘶咬。每日1次，留针20 min，10天为一疗程，间隔1天进行下一疗程，共2个疗程。空白组及模型组动物正常喂养。

1.3.4 指标检测 观察结束后第2天，用1%的戊巴比妥钠麻醉各组动物，心前区备皮，心尖部取血，分别检测血浆内皮素(ET)和血清超氧物歧化酶(SOD)含量，前者采用放免法，后者采用黄嘌呤氧化酶比色法，操作由实验室专人负责，严格按照说明书进行。

1.3.5 数据分析 所有实验数据均采用SPSS13.0统计软件包进行统计，均采用(±s)表示。两组间比较符合正态分布用独立样本t检验，非正态分布用非参数检验;多组间比较用单因素方差分析。

2 结果

2.1 治疗后各组动物血浆ET变化比较

见表1。表1的结果提示，与模型组比较，模针组治疗后动物血浆ET水平显著下降(P＜0.05)，表明电针可显著降低血浆ET含量。

表1 血浆ET结果

2.2 治疗后各组动物血清SOD变化比较

见表2。表2的结果提示，与模型组比较，模针组治疗后动物血清SOD水平显著升高(P＜0.05)，表明电针可显著提高血清SOD含量。

表2 血清SOD结果

3 讨论

椎动脉型颈椎病(CSA)是颈椎病的常见类型，又称颈性眩晕症、椎－基底动脉缺血综合症，是由各种机械性与动力性因素致椎动脉遭受刺激或压迫，引起血管狭窄、折曲而造成以椎－基底动脉供血不足为主要病理变化的综合征，临床表现以发作性眩晕为主，可伴有头昏、头痛、失眠、耳鸣、视物不清、恶心、呕吐，甚至突然猝倒等症［1］。一旦患病，往往缠绵难愈，不仅长期折磨患者，也给家庭、社会带来负担。CSA的临床治疗以保守治疗为主，包括中西药物、物理疗法、针灸推拿等，均有一定疗效。

笔者前期开展了针灸推拿治疗CSA的临床研究，结果显示电针、推拿综合方案治疗CSA可取得满意的临床疗效［2～3］，可显著地改善椎－基底动脉血液动力学的紊乱［4］。但其作用机理如何，尚需进一步探讨。因此本文所涉及的研究工作旨在通过电针对CSA模型兔血浆内皮素、血清超氧化物歧化酶影响的研究，试图阐明电针治疗CSA的部分机理，为临床针刺治疗CSA提供可靠的实验依据。

既往研究业已表明，颈椎横突孔骨性狭窄或先天发育纤细［5］，钩椎关节增生之骨赘或颈椎不稳机械性压迫，均可造成椎动脉狭窄［6］。长期的压迫造成管壁的压力持续增高，缺血、缺氧，内皮细胞产生大量内皮素(ET)释放入血，使椎动脉持续收缩，当超过人体的代偿能力时就造成椎－基底动脉供血不足，从而出现一系列临床症状。SOD广泛存在于需氧代谢细胞中，是机体内的主要抗氧化酶，可以抑制脂质过氧化反应，清除超氧阴离子而起保护细胞的作用，从而解除超氧阴离子对机体的损害。研究表明，CSA时由于颈椎及其邻近组织因长期受压而出现的缺血缺氧等微循环障碍，是引发体内自由基代谢紊乱的重要原因［7］，它可使SOD水平或活力下降，机体清除自由基活性降低，自由基积累过剩，引起组织损伤，同时又进一步加重对椎动脉、神经根的压迫刺激，造成椎－基底动脉持续的缺血缺氧［8］。这些研究都表明，CSA时机体椎－基底动脉供血不足，血浆ET水平显著增高，而血清SOD水平则明显降低，本文及笔者既往的研究［9］也得出了一致的研究结果。

本研究结果提示，CSA造模兔血浆ET和血清SOD含量异常:模型组与空白组相比血浆ET值明显升高(P ＜0.01)，血清 SOD 值明显降低(P ＜0.01);电针治疗后，与模型组相比，模针组血浆ET值显著降低(P ＜0.05)，血清 SOD 值显著升高(P ＜0.05)。结果表明，电针能降低椎动脉型颈椎病模型兔血浆ET水平，提高血清SOD水平。电针可能通过调节ET水平，缓解血管痉挛，改善组织的缺血、缺氧;通过调节SOD水平，清除机体多余自由基，抑制脂质过氧化反应的作用，保护血管内皮，减轻组织损伤，改善循环灌流，增加椎动脉血流量，而对椎动脉型颈椎病发挥治疗作用。

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