棘仁柏仁栀子油配方的安神与益智作用研究*

高 枫，符兆英，李宝莉

(1.延安大学医学院生理学教研室，2.免疫学教研室，3.药理学教研室，陕西 延安 716000)

棘仁为植物酸枣(Ziziphus spinosa Hu)的干燥成熟种子，含脂肪油、皂苷类、黄酮类、三萜类和植物甾醇等成分[1]。柏仁为植物侧柏(Platycladus orientalis Franco)的干燥成熟种仁，含脂肪油、皂苷类、柏木醇、双萜类和植物甾醇等成分[2]。栀子为植物栀子(Gardenia jasminoides Ellis)的干燥成熟果实，含栀子苷、黄酮类、三萜类和有机酸酯等成分[3]。本实验将棘仁、柏仁和栀子的活性部位棘仁油、柏仁油和栀子油按3∶2∶l比例配伍制成复方制剂，以研究其安神与益智作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物、药品与器材

健康雌性昆明种 ICR小鼠，体重18～22 g，二级动物，由西安交通大学实验动物中心提供。棘仁油购自陕西旭煌植物科技发展有限公司，柏仁油购自广西山云生化科技有限公司，栀子油购自广西山云生化科技有限公司;三者按3∶2∶l比例配成复方制剂(棘仁柏仁栀子油配方)。安定注射液为上海旭东海普药业有限公司产品，脑复康注射液为江苏省常州制药有限公司产品。YLS-1A小鼠自主活动记录仪由淮北正华生物仪器设备有限公司生产，MT-200Morris水迷宫视频跟踪系统由成都泰盟科技有限公司生产。

1.2 棘仁柏仁栀子油配方影响小鼠自主活动的实验

小鼠50只，随机分为 5组(n=10):棘仁柏仁栀子油大剂量组(5 ml/kg)、中剂量组(2.5 ml/kg)、小剂量组(1.25 ml/kg);安定组(3 ml/kg);生理盐水组。在固定时间灌胃给药，每天 1次。连续用药 15 d，在药前和用药后的第 1、2、3、5、10天(给药60min后)用YLS-1A小鼠自主活动记录仪记录15 min各组小鼠的自主活动次数。

1.3 棘仁柏仁栀子油配方影响小鼠学习记忆的实验

小鼠50只，随机分为 5组(n=10):棘仁柏仁栀子油大剂量组(5 ml/kg)、中剂量组(2.5 ml/kg)、小剂量组(1.25 ml/kg);脑复康组(0.5 g/kg);生理盐水组。连续灌胃给药15 d，第16天开始在给药60min后进行Morris水迷宫训练。水池分为4个象限，第I象限正中距池壁33 cm处放置一直径10cm、高15 cm的平台，平台顶低于水面1 cm。迷宫上方安置像机，同步记录小鼠运动轨迹。每只小鼠训练每天4次，训练期间迷宫外参照物不变。将小鼠从不同入水点背对站台放入池中，记录小鼠从入水至找到站台所需时间(潜伏期)。找到后让小鼠在平台上保持15 s。如60s找不到，则引导到平台上，并保持15 s。连续训练4 d。第20天在给药 60min后进行行为测试，将站台移放到不同象限中作站台迁移试验。计算4个潜伏期的平均值。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 棘仁柏仁栀子油配方对小鼠自主活动影响的实验结果

安定组小鼠于用药第1天出现自主活动高显著性减少，该作用随用药时间延长逐渐减弱，有统计学意义。棘仁柏仁栀子油大剂量组小鼠于用药第2天出现自主活动高显著性减少，该作用随用药时间延长而逐渐增强。表明安定注射液镇静作用出现快，但有耐受现象;棘仁柏仁栀子油配方的镇静作用出现略慢，但作用随用药时间延长而增强，无耐受现象(表1)。

Tab.1 Effect of COSOJ on mouse independent activities(，n=10)

Tab.1 Effect of COSOJ on mouse independent activities(，n=10)

COSOJ:Compound oil of semen spinosa，semen orientalis，and jasminoides*P＜0.05，**P＜0.01 vs normal saline;#P＜0.05，##P＜0.01 vs 0d;△P＜0.05，△△P＜0.01 vs 1 d of Diazepam

Group 0d 1 d 2 d 3 d 5 d 10d Normal saline 354.8±61.6 346.0±65.3 350.7±70.2 320.9±73.5 353.6±80.8 349.6±68.3 Diazepam injectio 350.6±69.3 102.4±41.3**##149.9±63.0**##△219.4±72.3*##△△ 227.8±68.2*#△△240.8±70.9*#△△Small COSOJ dosage 362.1±59.8 324.7±75.1 327.0±69.3 319.4±81.6 283.6±73.5 295.0±76.8 Middle COSOJ dosage 358.2±72.3 316.9±79.6 311.9±74.2 304.5±78.7 292.3±63.0 283.9±72.2 Large COSOJ dosage363.9±65.2229.1±73.4*# 214.7±76.3**##187.5±82.9**## 173.6±78.3**##168.7±69.4**##

2.2 棘仁柏仁栀子油配方对小鼠学习记忆影响的实验结果

用药前各组小鼠登台潜伏期无显著性差异。棘仁柏仁栀子油各剂量组在训练第二天即出现登台潜伏期缩短;与用药前比较，有统计学意义;与生理盐水对照组比较，除小剂量组的第2、3天外，有统计学意义(表2)。随着训练次数增加和用药时间延长，潜伏期进一步缩短。脑复康组在训练第四天才出现有统计学意义的登台潜伏期缩短。

Tab.2 Effect of COSOJ on the incubation period(s)of mouse platform climbing inMorriswater maze(，n=10)

Tab.2 Effect of COSOJ on the incubation period(s)of mouse platform climbing inMorriswater maze(，n=10)

COSOJ:Compound oil of semen spinosa，semen orientalis，and jasminoides*P＜0.05，**P＜0.01 vs normal saline;#P＜0.05，##P＜0.01 vs 0d

Group D0 d16 d17 d18 d19 d20Normal saline 57.32±6.97 55.94±7.78 54.11±9.62 53.08±10.32 52.97±9.97 52.63±10.24 Acetamide Pyrrolidone 56.79±6.85 55.02±7.29 53.26±9.90 46.52±10.75 40.13±10.55# 38.10±11.67*##Small COSOJ dosage 56.93±6.77 54.31±9.64 44.57±9.74# 43.90±12.37# 39.24±11.98*## 37.70±12.46*##Middle COSOJ dosage 57.14±7.21 52.36±8.42 39.72±10.42*##35.79±11.82*##32.80±12.47**##30.57±12.42**##Large COSOJ dosage 57.39±6.58 49.87±9.83 39.19±11.28*##34.10±12.65*##32.59±12.63**##31.09±12.66**##

3 讨论

中医学认为，棘仁味甘性平，入心、脾、肝和胆经，有宁心和安神的功效，主治虚烦失眠、心神不宁和惊悸等症;柏仁味甘性平，入心、肝、肾和大肠经，有安神宁心和生津润肠的功效，主治虚烦不眠、怔忡和使秘等症;栀子味苦性寒，归心、肝、肺和胃经，具有清热和除烦的功效，主治热病虚烦不眠等症。棘仁、柏仁和栀子均可养心宁神，但棘仁善养肝血益心阴而宁心安神，为君药;柏仁养补心气养心血，为臣药;栀子苦寒，长于清心解郁，属佐使药。棘仁养心阴敛心阴而治本;柏仁宁心神通心肾辅以治本;栀子导热下行清心经火而治标。三药君臣佐使相配、标本兼顾，共奏敛阴养血，除烦安神之效。根据中医组方思路，本实验将棘仁、柏仁和栀子的活性部位棘仁油、柏仁油和栀子油按3∶2∶l配伍组方，以观察其对小鼠自主活动和学习记忆的影响，结果发现:(1)该配方可使小鼠自主活动减少，表明该配方有镇静作用，且其镇静作用随用药延长不出现耐受性;(2)该配方能缩短小鼠水迷宫试验登台潜伏期，表明该配方有增强学习记忆的作用。

根据现代医学，棘仁柏仁栀子油配方的以上作用可能与其富含油酸、亚油酸和亚麻酸等不饱和脂肪酸有关。油酸、亚油酸和γ-亚麻酸可转化成花生四烯酸和前列腺素，油酸还可酰化生成油酰胺;亚油酸、γ-亚麻酸和花生四烯酸可促进胰岛素分泌。前列腺素II、胰岛素和油酰胺为内源性睡眠诱导物，胰岛素和油酰胺均有调节慢波睡眠和诱导生理性睡眠的作用，油酰胺还有增强学习记忆的作用[4]。α-亚麻酸能使细胞膜流动性升高，对脑神经元增殖、神经传导和突触生长有重要作用，对维持视网膜功能及促进学习行为有重要作用。花生四烯酸对长时程增强(LTP)形成起着重要的作用[5]，而LTP与学习记忆机制密切关联;花生四烯酸的代谢产物加压素也可提高学习记忆功能。

[1]胡 芳，陆兔林，徐佳佳，等.正交优选枣味软胶囊醇提工艺研究[J].南京中医药大学学报，2010，26(2):140-142.

[2]陈玉婷，杨 云，王英华.常用中药化学鉴定[M].北京:化学工业出版社，2005.168.

[3]杜守颖，赵帅眉，陆洋.中药栀子提取物质量标准研究[J].北京中医药大学学报，2009，32(11):768-775.

[4]Akanmu M A，Adeosun S O，Ilesanmi O R.Neuropharmacological effects of oleamide in male and female mice[J].Behav Brain Res，2007，182(1):88-94.

[5]DeCostanzo A J，Voloshyna I，Rosen Z B，et al.12-Lipoxygenase regulates hippocampal long-term potentiation by modulating L-type Ca2+channels[J].J Neurosci，2010，30(5):1822-1831.