p53、bcl-2、nm23蛋白在肺癌中的表达及与预后的关系

古颖春 ，宋业琳 ，张春玲 ，古保亮

(1青岛大学医学院，山东青岛 266003;2青岛市胸科医院;3青岛海慈医疗集团;4青岛市中心医院)

恶性肿瘤的异常增殖主要取决于促进细胞生长原癌基因的激活以及控制细胞生长抑癌基因的失活，同时也与细胞凋亡过程受到抑制作用有重要关系。近年来，我们应用免疫组化对 129例肺癌患者手术标本行 bcl-2、p53及 nm23蛋白检测，以期探讨3种蛋白表达与肺癌临床病理因素及预后的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集青岛医学院病理学教研室、青岛市中心医及青岛市胸科医院 2001～2005年确诊的原发性肺癌手术切除标本 129例，男 89例、女 40例，年龄 27～76(57±10.53)岁，术前均未行放疗或化疗。按 WHO(1981)分类标准分型，鳞癌 53例，腺癌 48例(腺泡细胞癌 28例，乳头状腺癌 12例，支气管肺泡癌 5例，实体黏液癌 3例)，小细胞癌8例，大细胞癌 16例，腺鳞癌 4例。术后随访 5 a以上，其中术后 0.5 a内死亡 23例，0.5～5 a内死亡 60例，存活 5 a以上 44例，2例失访。

1.2 方法 标本均经 10%甲醛固定，石蜡包埋，4 μm厚连续切片。每个标本切片 5张，行 HE染色和免疫组化染色。采用免疫组化链霉素抗生物素蛋白过氧化酶连结法鼠抗人 bc1-2单克隆抗体、鼠抗人p53单克隆抗体、鼠抗人 nm23单克隆抗体及链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶免疫组织染色试剂盒(均购自北京中山生物技术有限公司)，检测程序按照说明书操作，同时用已知阳性切片，在同等条件下染色，作为阳性对照，用 PBS代替一抗作为空白对照。

1.3 统计学方法 采用 SPSS13.0统计学软件，bc1-2、p53和 nm23蛋白表达与肺癌临床病理关系采用 χ2检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 p53、bcl-2及 nm23在肺癌中的表达 bcl-2主要见于癌细胞核膜及细胞质内，正常支气管黏膜及肺泡上皮均为阴性，肿瘤间质中，少量浸润的淋巴细胞呈弱阳性表达。p53见于癌细胞核内，正常肺组织及肿瘤间质均为阴性。nm23主要位于细胞质中。p53、bcl-2及 nm23在肺癌中的阳性表达率分别为51.9%、26.3%及 55.0%。

2.2 p53、bcl-2、nm23表达与肺癌临床病理因素的关系 小细胞肺癌中的 bcl-2及 p53阳性表达率高于其他各组，但差异无显著性(P＞0.05)。p53及nm23与组织分型无关。局部淋巴结转移阳性组bcl-2阳性表达率(39.2%)明显高于淋巴结阴性组(18.7%)(P＜0.01)。 p53、nm23蛋白表达与淋巴结转移无关(P＞0.05)。见表1。

表1 bcl-2、p 53、nm23蛋白表达与临床病理因素的关系

2.3 p53、bcl-2及 nm23表达与预后的关系 bcl-2、p53及 nm23均呈阴性表达病例与 bcl-2、p53及 nm23蛋白均呈阳性表达的病例预后有明显差异(P＜0.01)，均阴性组预后明显好于均阳性组。见表2。

表2 bcl-2、p53、nm23蛋白表达与患者预后的关系

3 讨论

不同肿瘤有着不同的 p53突变谱，Cheah等[1]研究表明，p53基因突变谱的不同可能影响到肺癌的易感性及相应肿瘤的形成。有研究表明，突变型p53蛋白在非小细胞肺癌中的阳性表达率为 30%～65%[2]，在小细胞肺癌中的阳性表达率为 44%～80%[3]。本文非小细胞肺癌 p53的阳性表达率为51.3%、小细胞肺癌阳性表达率为 62.5%，与文献报道相近。本文 p53阳性表达组术后生存时间短于阴性表达组，表明 p53蛋白异常表达与肺癌的生物学行为密切相关，并可能成为评估肺癌预后的有效标志物。

研究发现，bcl-2蛋白过度表达与肺癌的发生有关[3，4]。本文表明 bcl-2的高表达与淋巴结转移相关，可能与 bcl-2蛋白增加肿瘤浸润和转移的能力有关，bcl-2在肺癌的阳性表达可作为评估预后的一项指标。

nm23基因是由美国癌症研究所 Steeg等[5]1988年用消减杂交法，在 7个潜能不同的黑色素瘤中分离出来的一种 cDNA基因。nm23基因与肺癌的转移及预后的关系，国内外有不同的报道[6，7]。本研究结果显示，肺癌组织中 nm23阳性表达与局部淋巴结转移无相关性，阳性表达者预后有好于阴性表达者的趋势，但无统计学差异性，可能与样本量有关。目前尚不能就此判断 nm23蛋白表达与肿瘤转移、预后的相关性，nm23基因对肺癌转移及预后的价值有必要进一步探讨。

目前肺癌的预后较差，原因之一是肺癌的生物学行为并不遵循一定的模式，而在治疗前人们又不能准确地预测肿瘤对治疗的敏感性。因此根据肺癌基因蛋白的表达水平探索更有临床应用价值的生物学指标、利用肿瘤分子生物学特征协助判断肺癌的转移与预后有重要意义。

[1]Cheah PL，Looi LM.p 53:an overview of over two decades of study[J].Malays J Pathol，2001，23(1):9-16.

[2]Uramoto H，Sugio K，Oyama T.Expression of the p53 family in lung cancer[J].Anticancer Res，2006，26(3A):1785-1790.

[3]Paik KH，Park YH，Ryoo BY，et al.Prognostic value of immunohistochemical stainingof p 53，bcl-2，and Ki-67 in small lung cancer[J].J Korean Med Sci，2006，21(1):35-39.

[4]古保亮，邹伟，杨梅怀，等.bcl-2、p53蛋白在肺癌中的表达[J].临床与实验病理学杂志，1998，12(6):547-549.

[5]Steeg PS，Bevilaxqua G，Lopper L，et al.Evidence of anovel geneassociated with low tumorm etastasic potential[J].Journal of the National Cancer in Statute，1988，80(2):200.

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