注射用地塞米松磷酸钠中细菌内毒素的检测

郑剑峰 王育红

沈阳绿洲制药有限责任公司（沈阳 110300） 辽宁广播电视大学（沈阳 110034）

注射用地塞米松磷酸钠中细菌内毒素的检测

郑剑峰 王育红

沈阳绿洲制药有限责任公司（沈阳 110300） 辽宁广播电视大学（沈阳 110034）

建立注射用地塞米松磷酸钠的细菌内毒素检查方法。使用两个厂家的鲎试剂和自制的3批注射用地塞米松磷酸钠样品进行干扰试验。注射用地塞米松磷酸钠浓度稀释至0.3125 mg/mL时无干扰。注射用地塞米松磷酸钠可按内毒素限值6 Eu/mg进行细菌内毒素检查。

注射用地塞米松磷酸 鲎试剂 细菌内毒素

地塞米松磷酸钠为肾上腺皮质激素类药，主要用于过敏性与自身免疫性炎症性疾病。本研究参照中国药典2005年二部有关要求及应用指导原则，进行了地塞米松磷酸钠冻干粉针细菌内毒素检查法的可行性研究。

1 仪器和试药

内毒素工作标准品（中国药品生物制品检定所，规格：180 EU/支，批号：2004-5）。鲎试剂：福州新北生化工业有限公司（标示灵敏度：0.25 EU/mL，规格：0.1mL/支，批号：04101411）；湛江安度斯生物有限公司（标示灵敏度：0.25 EU/mL，规格：0.1 mL/支，批号：0411121）。细菌内毒素检查用水：湛江安度斯生物有限公司（规格：5 mL/支，批号：0409230）。注射用地塞米松磷酸钠（自制，规格：2 mg/支，批号：20080501、20080502、20080503）。

2 方法与结果

2.1 灵敏度复核

鲎试剂按中国药典2005年规定方法进行灵敏度复核试验，结果均符合规定。

2.2 细菌内毒素限值（L）的确定

USP28版、中国药典2005年版只收载地塞米松磷酸钠注射液标准，未见本品的收载。美国USP28版规定的地塞米松磷酸钠注射液限度为：31.3 EU/mg。地塞米松磷酸钠注射液说明书表明，临床最大可静脉推注50 mg。根据L=K/M，其中K=5 EU（Kg·h）-1，计算限度为：L=6 EU/mg，参照临床最大剂量规定本品的限度为6 EU/mg。

2.3 有效稀释浓度（MVD）的计算

公式MVD（λ=0.25）=λ/L，其中L为地塞米松磷酸钠细菌内毒素限值6 EU/mg，λ为鲎试剂标示灵敏度。取样品配成2.5 mg/mL，则MVD=6×2.5÷0.25 =60倍（即0.04 mg/mL）。

2.4 供试品干扰预试验

取供试品，加细菌内毒素检查用水，配成2.5 mg/mL，作为供试品贮备液；再用细菌内毒素检查用水稀释成系列浓度的供试样品，参照细菌内毒素检查法进行干扰预试验，结果表明本品2.5mg/mL液的1：8稀释液无干扰。结果见表1。

2.5 干扰确证试验

根据预试验结果，对以上两批鲎试剂，取供试品贮备液（2.5 mg/mL）稀释8倍（0.3125 mg/mL）进行干扰确证试验。结果表明，本品对两批鲎试剂均无干扰，0.5λs<λt<2.0λs，符合中国药典2005年版对细菌内毒素检查有效性的规定，进行细菌内毒素检查。见表2和表3。

2.6 样品细菌内毒素检查

按中国药典2005年版细菌内毒素检查法，使用两批不同厂家的鲎试剂分别对样品进行细菌内毒素检查，同时设样品阳性对照管，结果3批样品均呈阴性。结果见表4和表5。

表1 注射用地塞米松磷酸钠干扰预试验结果

表2 干扰确证试验结果（鲎试剂批号：04101411）

表3 干扰确证试验结果（鲎试剂批号：0411121）

表4 细菌内毒素检查结果（鲎试剂批号：04101411）

表5 细菌内毒素检查结果（鲎试剂批号：0411121）

3 结论

由干扰预试验结果可初步判断，当样品稀释至0.3125 mg/mL时与鲎试剂无干扰，且两个厂家的鲎试剂反应结果相当。正式干扰试验用0.3125 mg/mL样品浓度，且两个厂家的鲎试剂反应结果均为0.5 λs<λt<2.0 λs，确证无干扰影响，细菌内毒素限值定为6 Eu/mg。注射用地塞米松磷酸钠可适用细菌内毒素检查法，但供试品浓度应在0.3125 mg/mL或以下，鲎试剂灵敏度在0.5 Eu/mL以上均可。

[1]国家食品药品监督管理局.地塞米松磷酸钠注射液说明书.国家药品标准化学药说明书内容汇编第一册.

[2]国家药典委员会.地塞米松磷酸钠质量标准.中华人民共和国药典二部（2005）.北京:化学工业出版社,2005.

[3]国家药典委员会.细菌内毒素检查法.中华人民共和国药典二部（2005）.北京:化学工业出版社,2005.

齐婷婷）