韩刚 郭肖菲 肖倩 赵媛 董月
近年由于人工合成添加剂及动物生长促进剂在畜牧产品中的药物残留危害到消费者的健康,对天然活性物质促进动物生长的促进剂,日益受到人们的关注[1]。
姜黄为我国传统中药材,姜黄素为姜科植物姜黄的有效成分。姜黄素具有抗炎、抗氧化、清除自由基、降血脂、抗癌等多种药理作用[2]。近年来有关姜黄素在饲料中的应用已有多项报道[3],但姜黄素难溶于水,生物利用度低,不能充分发挥其药理活性。固体分散技术可以提高难溶药物的溶解度,从而提高其生物利用度[4]。本试验以聚乙烯吡咯烷酮为载体制备了姜黄素固体分散体,研究姜黄素固体分散体对肉鸡抗氧化能力的影响。
8453E型可见紫外分光光度计(美国Angilent公司生产);FA1004电子天平(上海精科天平厂生产);ALPHA-Plus型冷冻干燥机(德国CHRIST公司生产);SD-BASIC型喷雾干燥机(英国Lab-Plant公司生产)。
姜黄素原料药(南京泽朗有限公司生产,含量>97%);聚乙烯吡咯烷酮(北京化学试剂公司生产);总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)试剂盒(以上试剂盒均购于南京建成试剂有限公司)。
1日龄AA肉鸡由北京爱拔益加家禽育种有限公司提供。
参照NRC(1998)并结合生产实践配制基础日粮。基础日粮组成及营养水平见表1。
表1 肉仔鸡基础日粮组成及营养水平
将姜黄素与聚乙烯吡咯烷酮(k30)按质量比为1∶4的比例溶于80%乙醇溶液中,在SD-Basic喷雾干燥机中进行喷雾干燥,制备姜黄素固体分散体,喷雾干燥时,进口温度为150℃,出口温度为110℃[5]。
试验动物双层笼养,自由采食和饮水,控制舍内温度、湿度和光照,卫生学指标符合鸡的卫生要求,免疫按常规程序进行。
将450只1日龄AA肉鸡(雌雄各半)随机分成5组,每组设3个重复,每个重复30只。正常对照组(Control),饲喂基础日粮;姜黄素低剂量组(Cur-L)、姜黄素高剂量组(Cur-H),分别在基础日粮中添加80、150 mg/kg姜黄素;姜黄素固体分散体低剂量组(Cur-LSD)、高剂量组(Cur-HSD),分别在基础日粮中添加80、150 mg/kg姜黄素固体分散体(姜黄素固体分散体剂量按纯姜黄素计)。
在6周末饲养试验结束时,每组随机抽取6只接近平均体重的试验鸡(每个重复2只)心脏采血制备血清,取肝脏组织用生理盐水研磨成10%的组织匀浆,3 000 r/min离心10 min,取上清液,-20℃保存。
血清中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)活力测定,丙二醛(MDA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量测定,按试剂盒说明书进行操作。
采用SPSS 11.5统计软件,对试验数据进行单因素方差分析,数据均以s表示。
姜黄素及姜黄素固体分散体对肉鸡血脂指标TC、TG、HDL-C、LDL-C含量的影响见表2。与正常对照组比较,姜黄素低剂量组对肉鸡血脂指标的影响不明显(P>0.05);在给予相同剂量姜黄素的条件下,姜黄素组对鸡血脂影响不明显(P>0.05),而姜黄素固体分散体低剂量对血清TG、TC及LDL-C含量显著降低(P<0.05),HDL-C含量显著升高(P<0.05),姜黄素固体分散体高剂量组对血清中TG、TC及HDL-C含量影响极显著(P<0.01),对血清中LDL-C含量影响显著(P<0.05)。
表2 各组肉鸡血脂情况比较(mmol/l)
各组肉鸡血清中SOD、GSH-Px活力和MDA的含量见表3。与正常对照组比较,姜黄素低剂量组对血清中SOD、GSH-Px活力和MDA的含量没有显著影响(P>0.05),而相同剂量的姜黄素固体分散体低剂量组可显著升高SOD、GSH-Px活力(P<0.05),降低MDA的含量(P<0.05)。姜黄素固体分散体高剂量组可极显著提高SOD、GSH-Px活力(P<0.01),极显著降低血清中MDA含量(P<0.01)。
表3 各组肉鸡血清中SOD、GSH-Px活力和MDA含量
姜黄素的调节血脂及抗氧化作用已有报道[6],但姜黄素不溶于水,体内吸收差,在体内不能很好地发挥其药理作用。采用喷雾干燥法将姜黄素制成固体分散体增加了姜黄素的溶解度和生物利用度,能有效地发挥姜黄素降血脂及抗氧化的作用。
试验结果表明,姜黄素低剂量组与姜黄素固体分散体低剂量组均给予相同剂量的姜黄素,由于姜黄素制成固体分散体使姜黄素溶解度和生物利用度增大,因此姜黄素固体分散体显示出较强的降血脂和抗氧化能力。有研究表明,姜黄素制成固体分散体后生物利用度提高了6倍[7]。高剂量组均能显著降低高脂模型肉鸡血清TG、TC、LDL-C含量、降低血清中MDA含量、提高SOD和GSH-Px活力。在给予相同剂量姜黄素时,姜黄素固体分散体组能显著降低鸡血脂水平;姜黄素固体分散体高剂量组降血脂效果显著优于姜黄素固体分散体低剂量组。日粮中添姜黄素固体分散体后可以提高肉鸡的抗氧化能力,可使肉鸡血清中的SOD、GSH-Px的活性提高,MDA的含量降低。
[1] 刘胜男,袁缨,姜谓同.复方中草药添加剂对肉仔鸡生长性能及血清生化指标的影响[J].饲料工业,2010,31(6):1-5.
[2] 汪海慧,成杨.姜黄素药理作用研究进展[J].上海中医药大学学报,2007,21(6):73-76.
[3] 祝国强,王斌,侯风琴.姜黄素对肉鸡生产性能及肉品质的影响[J].饲料工业,2009,30(13):8-10.
[4] 韩刚,王传胜,张永,等.固体分散体提高姜黄素溶出度的研究[J].中国中药杂志,2007,32(7):637-638.
[5] 韩刚,翟冠钰,董月,等.姜黄素固体分散体对大鼠血脂水平的影响[J].中国老年学杂志,2009,29(8):1936-1937.
[6] 王舒然,陈炳卿,孙长颖.姜黄素对大鼠调节血脂及抗氧化作用的研究[J].卫生研究,2004,29(4):240-242.
[7] 韩刚,翟丽,赵琳琳,等.姜黄素固体分散体在大鼠体内的药动学研究[J].中国药学杂志,2009,44(9):698-700.