液态发酵对饲料原料体外消化率的影响

赵娜 李绍章 杨雪海 魏金涛 黄少文

发酵可以改变饲料原料化学结构、提高饲料中真蛋白的含量（罗明朗，1996）、消除抗营养因子，产生多种生物活性物质，提高饲料利用率，体外消化测定法可以更简便、快速、准确地对饲料营养价值进行评定，估测体内消化率，较好地比较饲料消化性的优劣。

本试验通过体外消化测定法对发酵饲料原料营养价值进行评定，比较不同饲料原料发酵后消化性的优劣，为在实际生产中科学选择发酵原料配方提供理论依据。

1 试验材料与方法

1.1 试验设计

试验分7组14个处理。以玉米、玉米淀粉、豆粕等组成7种原料（见表1）进行液态发酵或不发酵，对其进行体外消化率的测定。

1.2 发酵样品的制备

称取原料20 g，加入66.67 ml水，接入植物乳杆菌106cfu/g DM，25℃发酵24 h，50℃烘干后返潮、粉碎。过50目筛，装入样品袋密封，低温保存。

表1 原料组成

1.3 试剂

胃蛋白酶(1∶3 000)、胰酶(1∶250)购自武汉谷歌生物科技有限公司；氯霉素；乙醇、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、盐酸等常规试剂均为分析纯。

1.4 试验方法

1.4.1 体外消化操作步骤

消化试验参照Boisen等(1995)体外模拟消化方法和侯小峰（2005）方法改进。

胃消化阶段：准确称取1 g样品（精确至0.000 1 g），置于100 ml具塞三角瓶中，向瓶中加入15 ml磷酸缓冲液（0.2M，pH值6.0），小心混合均匀后，加入10ml 0.2 M HCl溶液，将食糜pH值调整至2.0，加入1 ml新鲜的胃蛋白酶盐酸溶液，并使pH值仍保持在2.0。加入0.5 ml细菌生长抑制剂（0.5%氯霉素溶液），用橡胶塞封口。置于40℃恒温摇床中（120次/min），消化时间为4 h。

小肠消化阶段：待胃消化阶段结束后，向食糜中加入10 ml磷酸缓冲液（0.2 M，pH值6.8）和5 ml 0.6M的NaOH溶液，调整食糜pH值至6.5，然后加入1 ml猪胰酶溶液，并使pH值仍保持在6.5。置于40℃恒温摇床中（120次/min），消化时间为4 h。

小肠消化期结束后将所有食糜转移至过滤器内无氮滤纸中，冲洗残渣，干燥，测定粗蛋白质、干物质含量。

1.4.2 粗蛋白质的测定

用FOSS公司2300型全自动凯氏定氮仪测定。

1.5 数据处理

所得数据经SPSS13.0和Excel 2003分析，进行t检验。

2 试验结果与分析

各原料发酵前后CP含量变化见表2，CP体外消化率变化见表3，DM体外消化率见表4。

表2 各原料发酵前后CP含量（%）

表3 各原料发酵前后CP体外消化率（%）

表4 各原料发酵前后DM体外消化率（%）

表2结果显示，发酵可以稍微提高原料中CP的含量，但差异并不显著（P＞0.05）。这与本试验中接种的益生菌菌种有关，植物乳杆菌对提高原料中CP含量效果不明显。而杨建雄等（1993）将玉米粉接种枯草杆菌和热带假丝酵母发酵72 h后蛋白质含量由7.56%增长到28.47%。

由表3可以看出，各组原料经发酵后CP体外消化率均得到提高。这可能是饲料原料经植物乳杆菌发酵后改善了原料中蛋白质品质，可被消化酶消化利用的部分增加，提高了CP的体外消化率。

表3显示出较明显的规律：发酵前玉米或玉米淀粉含量高的原料CP体外消化率较高。原料发酵后随玉米的比例减少，CP消化率增加的比例下降。玉米、玉米豆粕3∶1组发酵前后粗蛋白质消化率变化显著（P＜0.05）。这可能是玉米提供了糖分，促进了发酵过程中蛋白品质的改善；也可能是玉米中粗蛋白质含量较低，也就是CP基数较低，所以CP消化率提高较大。

本试验中，玉米、玉米豆粕3∶1经植物乳杆菌发酵后干物质消化率得到显著提高（P＜0.05）。说明植物乳杆菌对提高饲料原料中可被消化酶和水溶性物质效果较为明显。

3 小结

饲料原料经植物乳杆菌体外消化后CP含量略有提高；玉米含量高的混合原料经发酵后CP体外消化率和DM体外消化率得到明显提高。

[1] Boisen S,Femandez J A.Prediction of the apparent ileal digestibility of protein and amino acids in feedstuffs and feed mixtures for pigs by in vitro analyses[J].Anim.Feed Sci.,Technol.1995,51:29-43.

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