■ 韩璐璐 宋先忱 孙亚波 丛玉艳
(1.沈阳农业大学畜牧兽医学院,辽宁沈阳110866;2.白城市畜牧兽医技术指导中心,吉林白城137000;3.辽宁省畜牧科学研究院,辽宁辽阳111000)
日粮养分在瘤胃内的降解是反刍动物消化的一个关键过程,日粮粗蛋白水平可能通过影响瘤胃内环境和微生物种类及数量进而影响养分的瘤胃降解率。然而,目前在这方面的研究结论不尽一致[1-3]。为了进一步明晰不同粗蛋白水平日粮养分在瘤胃中的降解情况,本试验借助体外模拟培养技术,研究日粮粗蛋白质水平对羊养分瘤胃降解率的影响,为优化羊的日粮粗蛋白质水平提供依据。
瘤胃液:采自6月龄健康的小尾寒羊。
主要试剂:①中性洗涤液:十二烷基硫酸钠、乙二酸四乙酸二钠、十水合四硼酸钠、无水磷酸氢二钠、三甘醇、Alpha-淀粉酶、无水亚硫酸钠。②酸性洗涤溶液:硫酸、十六烷基三甲基溴化铵。上述试剂均购自北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司。
主要仪器:体外模拟培养箱(ANKOM DAISY II)、凯氏定氮仪(KjelFlex K-360)、纤维分析仪(ANKOM A2000i)。
采用单因素4水平试验设计,设置4个日粮粗蛋白质水平(12%、14%、16%、18%),日粮精粗比为60∶40。各试验日粮组成及营养水平见表1。
表1 试验日粮组成与营养水平(干物质基础)
利用体外模拟培养箱,每种粗蛋白质水平日粮25个滤袋(外加一个空白样),连续培养24 h,分别在3、6、9、12、24 h时取出滤袋,清水冲洗,烘干,称重,测定干物质(DM)、粗蛋白质(CP)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)的降解率。利用凯氏定氮仪测定CP含量,利用纤维测定仪测定NDF和ADF含量。
试验结果以“平均值±标准误”表示。采用SPSS 17.0软件进行单因素方差分析(One-way ANOVA),多重比较采用Duncan's法。
各培养时间不同粗蛋白质水平日粮间DM累计降解率差异均不显著(P>0.05,见表2)。可见,日粮粗蛋白质水平对DM降解率没有显著影响。
日粮粗蛋白质水平对培养9 h内的CP降解率影响显著(P<0.05,见表3)。培养3~9 h内,16%和18%水平的CP降解率显著高于12%和14%水平(P<0.05),14%水平显著高于12%水平(P<0.05),16%和18%水平差异不显著(P>0.05);培养12 h时,18%水平的CP降解率显著高于其他水平(P<0.05),14%和16%水平显著高于12%水平(P<0.05),14%和16%水平差异不显著(P>0.05);培养24 h时,各水平之间差异不显著(P>0.05)。可见,提高日粮粗蛋白质水平有利于CP降解,16%和18%粗蛋白质水平对提高CP降解率较为有利。
表2 不同粗蛋白质水平日粮培养24 h内的DM累计降解率(%)
表3 不同粗蛋白质水平日粮培养24 h内的CP累计降解率(%)
培养3~9 h内和24 h时,日粮粗蛋白质16%和18%水平显著高于12%和14%水平(P<0.05,见表4),12%和14%水平与16%和18%水平的NDF降解率差异均不显著(P>0.05);培养12 h时,18%水平显著高于12%和14%水平(P<0.05),12%、14%和16%水平与16%和18%水平差异均不显著(P>0.05)。可见,提高日粮粗蛋白质水平有利于NDF降解,16%和18%粗蛋白质水平对提高NDF降解率较为有利。
表4 不同粗蛋白质水平日粮培养24 h内的NDF累计降解率(%)
培养3 h时,日粮粗蛋白质18%水平ADF降解率显著高于其他水平(P<0.05,见表5),16%水平显著高于12%和14%水平(P<0.05),12%和14%水平差异不显著(P>0.05);培养6 h时,16%和18%水平显著高于12%和14%水平(P<0.05),12%和14%与16%和18%之间差异不显著(P>0.05);培养9 h时,18%水平ADF降解率显著高于其他水平(P<0.05),14%和16%水平显著高于12%水平(P<0.05),14%和16%水平差异不显著(P>0.05);培养12 h时,18%显著高于其他水平(P<0.05),16%显著高于12%和14%水平(P<0.05),12%和14%水平差异不显著(P>0.05);培养24 h时,16%和18%水平显著高于12%、14%水平(P<0.05),12%和14%与16%和18%水平差异均不显著(P>0.05)。可见,提高日粮粗蛋白质水平有利于ADF降解,16%和18%粗蛋白质水平对提高ADF降解率较为有利。
表5 不同粗蛋白质水平日粮培养24 h内的ADF累计降解率(%)
Yuangklang等[4]和Chen等[5]通过体外发酵试验发现,日粮蛋白质水平对肉牛瘤胃DM降解率影响不显著,Ghorbani等[6]和Norrapoke等[7]利用奶牛瘤胃液进行的体外发酵试验也得到相似的结论。本试验利用体外发酵试验同样发现,日粮粗蛋白质水平对绵羊瘤胃DM降解率没有显著影响。由此可见,日粮粗蛋白质水平升高时,DM的降解量提高,但不足以提高它的降解率。
张永发研究发现,饲喂粗蛋白质水平为8%、10%、12%、14%的四种颗粒日粮,绵羊CP降解率差异不显著[1]。而本试验却发现,随着日粮粗蛋白质水平的升高,CP降解率增大。这可能由于日粮蛋白质含量增加可使瘤胃氨态氮含量升高,这为微生物的合成提供大量氮源,韩璐璐等[8]研究表明,瘤胃内的微生物数量增加,促进CP降解。
张永发[1]研究指出,粗蛋白质水平(8%、10%、12%、14%)对绵羊的NDF瘤胃降解率影响不显著;赵智华等[2]研究发现,粗蛋白质水平(8.23%、10.42%、12.52%)对山羊的NDF瘤胃降解率没有显著影响;然而徐俊等[3]报道表明,在体外培养条件下日粮粗蛋白质水平(14%、16%、18%)可显著提高奶牛NDF降解率。本试验结果显示,日粮粗蛋白含量升高,瘤胃NDF降解率显著增大,这与徐俊等报道的结论相一致。上述各研究结果间存在的差异可能是由试验日粮粗蛋白质水平、试验动物和试验条件的差异所导致的。
本试验研究发现,随日粮蛋白质水平提高ADF降解率增加,这与Broderick[9]与孔祥浩等[10]的研究结果一致。这可能是由于日粮粗蛋白质水平升高导致瘤胃微生物对纤维利用能力增强的结果。
日粮粗蛋白质水平对羊瘤胃DM降解率没有显著影响,但对CP、NDF和ADF降解率影响显著。提高羊日粮的粗蛋白质水平有利于营养物质在瘤胃中降解,16%粗蛋白质水平对提高日粮养分瘤胃降解率较为适宜。