初 洋,倪新江,姜海华,郑 丽
(烟台大学化学生物理工学院,山东 烟台 264005)
姬菇(Pleurotus cornucopiae)、榆黄蘑(Pleurotus citrinopleatus)、鲍鱼菇(Pleurotus abalonus)都隶属于真菌门、担子菌纲、同担子菌亚纲、伞菌目、侧耳科、侧耳属,是目前人工栽培的食、药兼用的食用菌,在国内外市场深受欢迎[1-4]。菌丝体和子实体的解剖学性状是真菌分类的重要鉴别特征。但关于食用菌菌丝体和子实体的解剖学资料还比较缺乏,其研究方法也很少报道。为了解侧耳属食用菌菌丝体和子实体的解剖结构并探索真菌子实体解剖学研究中的技术和方法,以姬菇、榆黄蘑和鲍鱼菇的菌丝体和子实体为材料进行了研究。
姬菇、榆黄蘑、鲍鱼菇,购于江苏天达食用菌有限公司。
母种采用PDA培养基。原种及栽培料采用棉籽壳培养基:棉籽壳78%、麦麸20%、蔗糖1%、硫酸钙1%,料水比为 1∶1.5。
母种和原种制作方法按常规,栽培采用17 cm×34 cm聚丙烯袋,接入原种,25℃恒温培养30 d左右,菌丝满袋后移入菇房开袋出菇。
将母种切割成小块接种到PDA平板上,在距离菌种块0.5 cm左右处,斜插入灭菌的盖玻片倒置培养3 d~5 d,待菌丝生长到盖玻片上后轻轻拔起盖玻片进行染色制片。制片固定用FAA固定液,染色用苏木精和曙红染色。切片制好后用数码显微系统观察、拍照。
子实体成熟后将带菌褶的子实体,切割成5 mm见方的小块用Licent氏固定液固定,用石蜡包埋法制片,染色用苏木精和曙红染色。切片制好后用数码显微系统观察、拍照。
3种食用菌菌丝体解剖学比较见图1~图6。
图1 姬菇菌丝
图2 榆黄蘑菌丝
图3 鲍鱼菇菌丝
图4 姬菇菌丝显微结构(1 000×)
图5 榆黄蘑菌丝显微结构(1 000×)
图6 鲍鱼菇菌丝显微结构(1 000×)
由图1~图3可见姬菇菌丝生长较浓密、洁白、边缘整齐明显呈放射状生长,而榆黄蘑和鲍鱼菇菌丝生长较稀、较弱,鲍鱼菇生长到一定时期会形成分生孢子并分泌黑色液滴。由图4~图6可见,3种食用菌菌丝均具有锁状联合,隔膜明显,姬菇和榆黄蘑菌丝粗壮,直径3 μm~8 μm,鲍鱼菇菌丝较细,直径2 μm~4 μm,姬菇较密,分枝较多,榆黄蘑和鲍鱼菇分枝较少。
3.2.1 子实体形态特征观察
子实体形态特征观察见图7~图9。
图7 姬菇子实体
图8 榆黄蘑子实体
图9 鲍鱼菇子实体
由图7、图8可见,姬菇和榆黄蘑子实体覆瓦状丛生,菌盖光滑,边缘内卷,半圆形,基部下凹呈漏斗状,菌盖直径3 cm~6 cm,菌柄较长侧生,圆柱状内实,菌褶白色平滑,较密,延生至菌柄,姬菇菌盖灰色,榆黄蘑菌盖黄色。由图9可见,鲍鱼菇菌袋表面覆盖着分生孢子分泌的黑色液体,子实体群生,菌盖表面有疣状突起,黑褐色,边缘平展,扇形,直径5 cm~12 cm,菌柄较短侧生,菌褶延生,间距较宽,边缘灰黑色内白色。
3.2.2 菌褶解剖学性状比较
菌褶解剖学性状比较情况见图10~图12。
图10 姬菇菌褶(1 000×)
图11 榆黄蘑菌褶(1 000×)
图12 鲍鱼菇菌褶(1 000×)
由图10~图12可见,姬菇子实层厚度为24.1 μm~30.8 μm,担子(3.86~4.39)μm×(8.98~10.87)μm,担子梗长4.28 μm~5.65 μm。 榆黄蘑子实层 厚度为 52.4 μm~70.6 μm,担子(6.51~8.23)μm×(8.12~9.77)μm,担子梗长3.21 μm~4.15 μm。 鲍鱼菇子实层厚度为 58.5 μm~64.79 μm,担子(9.56~13.21)μm×(44.91~47)μm,担子梗长11.29 μm。姬菇子实层较薄且疏松,而榆黄蘑和鲍鱼菇子实层厚且紧密,姬菇的担子近圆球形,较短,排列紧密,榆黄蘑和鲍鱼菇担子为球棒形,姬菇和榆黄蘑的担孢子梗细长,鲍鱼菇的较粗。结合不同方向切片观察,可见3种真菌担孢子梗皆为4个。姬菇菌褶内部的菌髓全由丝状菌丝构成,菌髓中的菌丝交错排列,较疏松,榆黄蘑和鲍鱼菇的菌髓也由丝状菌丝构成,排列较紧密。
3.2.3 菌柄解剖学性状比较
菌柄解剖学性状比较情况见图13~图18。
由图13、图14、图16、图17可见,姬菇和榆黄蘑菌柄由较粗的丝状菌丝沿菌柄方向松散排列,菌丝束中间有较大的孔隙。图15、图18显示,鲍鱼菇菌柄由较细短的菌丝交错紧密排列,菌丝间缝隙较小。
图13 姬菇菌柄横切(100×)
图14 榆黄蘑菌柄横切(100×)
图15 鲍鱼菇菌柄横切(100×)
图16 姬菇菌柄纵切(400×)
图17 榆黄蘑菌柄纵切(400×)
图18 鲍鱼菇菌柄纵切(400×)
3.3.1 孢子印比较
3种食用菌孢子印比较见图19~图21。
图19 姬菇孢子印
图20 榆黄蘑孢子印
图21 鲍鱼菇孢子印
图19~图21显示,姬菇、榆黄蘑和鲍鱼菇的孢子印均为白色,扇形,菌柄侧生,姬菇和榆黄蘑的孢子颗粒较细小,鲍鱼菇孢子颗粒较粗,姬菇菌褶密,轮廓不十分清晰,榆黄蘑和鲍鱼菇菌褶间距宽,轮廓清楚。
3.3.2 担孢子形态比较
3种食用菌担孢子形态比较见图22~图24。
图22 姬菇孢子(1 000×)
图23 榆黄蘑孢子(1 000×)
图24 鲍鱼菇孢子(1 000×)
由图 22可见,姬菇孢子(7~11)μm×(3~4)μm,长椭圆形,一端具有尖突,表面光滑,可见内有多个小油滴。 由图23可见,榆黄蘑孢子(8~12)μm×(3~4)μm,长椭圆形,一端有尖突,表面光滑,内有多个小油滴。由图 24可见,鲍鱼菇孢子(18~24)μm×(5~7)μm,长卵圆形,表面光滑无明显尖突,内有2到3个大油滴。
姬菇、榆黄蘑、鲍鱼菇均为侧耳属真菌,它们相同点是菌丝均具有锁状联合和隔膜,子实体菌柄都侧生,菌盖形状相似,子实体可由1个担子产生4个担孢子,孢子形状接近并皆含油滴,孢子印都为白色,这些特征与同属的其他种一致[5,6]。3种真菌结构也存在着较多差异,姬菇和榆黄蘑菌丝生长较快而鲍鱼菇生长较慢,姬菇菌丝较浓密而鲍鱼菇和榆黄蘑较疏松。鲍鱼菇菌丝的最显著特点是生长到一定时期会形成分生孢子并分泌黑色液滴。姬菇和鲍鱼菇菌盖颜色为灰黑色,榆黄蘑为黄色。姬菇和榆黄蘑出菇早、产量高、转潮快,它们子实体小而多,鲍鱼菇大而少。姬菇和榆黄蘑子实体生长快,鲍鱼菇子实体生长慢,因此导致姬菇和榆黄蘑菌柄内部菌丝结构比鲍鱼菇疏松。鲍鱼菇的担子、担孢子梗都比姬菇和榆黄蘑的粗壮,因此其产生的孢子较大且油滴多。
[1]王灿琴,何铁光,陈振妮,等.姬菇二号的生物学特性及栽培技术[J].北方园艺,2005(6):98.
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