多巴胺D1受体基因多态性与精神分裂症相关性研究

邓华 陈钰 崔爱

多巴胺系统在精神分裂症的病因，发病机制研究中一直受到关注。研究表明，D1受体mRNA在纹状体，伏隔核和嗅结节分布很丰富，该受体主要位于额叶前皮层，人们发现它对精神分裂症患者出现幻觉等思维混乱可能有影响。目前人类已成功克隆DRD1基因，DRD1基因定位于5q35.1，全长约1.7kb，无内含子［1］。我们采用中国汉族精神分裂症患者与正常组对照研究，来探讨DRD1基因多态性与精神分裂症的关系。

1 对象与方法

1.1 对象 ①精神分裂症组(简称患者组):共75例，均符合中国精神疾病分类与诊断标准第4版精神分裂症的诊断标准;排除内分泌疾病、酒/药物滥用或依赖者、严重躯体疾病、近期内接受输血治疗者。75例均为汉族，男32例，女43例;年龄15～65岁，平均(20 ±30)岁;病程1.5～10年;②正常对照组(简称对照组):共70名，均来自本医院工作人员，本人无精神疾病、无中枢神经系统、内分泌代谢、其他严重躯体疾病及酒/药物滥用史。70名均为汉族，男30名，女40名;年龄20～45岁，平均(22 ±15)岁。

1.2 研究方法 ①DNA提取:抽取外周静脉血5 ml，肝素抗凝，常规酚-氯仿抽提法提取基因组DNA;②DRD1基因片段扩增与多态性检测:采用聚合酶链反应(PCR)扩增DRD1基因片段。引物序列参照参考文献［2］;引物:采用5ˊ-TGA TTG TCA CCT ACA CCA GGA TCT-3ˊ，5ˊ-CTT AAA AGA ACT TTC CGG TTG AGA-3ˊ。PCR反应体系:总体积50 μl，内含模板 2.0 μl，引物各 1.5 μl，dNTP 5.0 μl，TaqDNA 聚合酶 0.4 μl(10U/μl)，Tris-HCl 缓冲液 10 mmol/L，KCL 50 mmol/L，Mg2+1.0 mmol/L。PCR反应条件:95°预变性5 min后 95°60s，55°80s，72°80s，经 30 个循环最终 72°，延伸 7 min。取扩增产物10 μl，2%琼脂糖凝胶电泳，经BIO-RAD Gel Doc 1000凝胶分析仪检测。

1.3 数据统计分析 应用科学统计包(SPSS 10.0版本);Hard-Weinberg检验基因型分布是否平衡［3］;χ2检验比较患者组与对照组及对照组不同性别间的等位基因分布频数。P＜0.05，具有统计学意义。

2 结果

2.1 患者组与对照组DRD1基因多态性比较见表1。

表1 患者组与对照组基因多态性频数分布(例)

2.2 患者组与对照组不同性别DRD1基因多态性与精神分裂症关联分析见表2。男性患者与对照组间等位基因频数分布无显著差异，但女性患者与对照组，男性患者之间的等位基因频数分布有显著差异。

表2 患者组与对照组不同性别基因多态性频数分布(例)

3 讨论

精神分裂症是公认的影响人类健康的多基因复杂疾病，遗传因素与常见精神分裂症关系密切，但具体病因与发病机制至今未明。研究发现，精神分裂症患者较正常人多巴胺D1受体少43%，说明D1受体减少可能与精神分裂症形成有关。其中多巴胺假说解释精神分裂症发病机制是近些年研究的热点之一，认为脑内多巴胺量的增加及受体活性的提高是引起精神分裂症的主要原因。

多巴胺受体位于额叶前皮层，其功能与结构异常可导致多种精神疾病。一般认为精神分裂症阴性症状可能与中脑边缘与皮质DA系统中D1受体活动过盛有关。一些研究发现阴性症状的精神分裂症额叶局部脑血流rCBF明显降低，正电子发射扫描PET发现糖、氧利用低下，甚至有额叶萎缩［2］。本研究未能出现以上结果。

本研究显示，中国汉族精神分裂症患者与正常对照组等位基因频数分布无显著性差异(P＞0.05)，未发现DRD1基因多态性与精神分裂症有明显关联，但性别不同可能影响疾病易感性，女性138bp等位基因频数分布相对男性患者较高。可能种群不同性别不同对疾病影响不同;疾病的多样性或样本量受限都会影响疾病的表达与发生发展，故还需进一步研究探讨。

［1］ Sunahara RK，Niznik HB，Weiner DM，et al.Human dopamine D1 receptor encoded by an intronless gene on chromosome 5.Nature，1990，347(6288):80-83.

［2］ Andreasen NC.Brain imaging:Appllcations in psychiatry.Science，1988，239:1381-1388.