血管内皮生长因子和微血管密度与乳腺浸润性导管癌生物学行为的关系

罗 民,盛 辉,苑春莉,周 娜,王医术

(1.深圳市人民医院 甲乳外科,广东深圳 518000;2.吉林大学第一医院,吉林 长春 130021;3.吉林大学白求恩医学院,吉林 长春 130021)

血管内皮生长因子和微血管密度与乳腺浸润性导管癌生物学行为的关系

罗 民1,盛 辉2*,苑春莉2,周 娜2,王医术3

(1.深圳市人民医院 甲乳外科,广东深圳 518000;2.吉林大学第一医院,吉林 长春 130021;3.吉林大学白求恩医学院,吉林 长春 130021)

目的探讨血管内皮生长因子和微血管密度与乳腺浸润性导管癌生物学行为的关系。方法应用免疫组化方法检测55例术前未作过化疗的乳腺浸润性导管癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)、微血管密度(MVD)的表达,与乳腺癌的临床分期、淋巴结转移等生物学行为进行统计学分析。结果(1)乳腺浸润性导管癌组织中MVD值与淋巴结转移、临床分期密切相关(P＜0.05);(2)VEGF主要表达于肿瘤细胞胞浆或胞膜,与乳腺浸润性导管癌淋巴结转移、临床分期有关(P＜0.05);(3)乳腺浸润性导管癌VEGF表达与MVD值密切相关(P＜0.05)。结论VEGF表达与乳腺浸润性导管癌的血管生成和侵袭转移关系密切。MVD和VEGF的检测可以用于乳腺浸润性导管癌的预后判断。

乳腺浸润性导管癌;血管内皮生长因子;微血管密度

(Chin J Lab Diagn,2010,14:1066)

本文旨在通过对血管内皮生长因子(VEGF)、微血管密度(MVD)的检测,比较它们与乳腺浸润性导管癌的生物学行为关系及二者之间的相关性,探讨其对乳腺浸润性导管癌的治疗及预后的判断价值。

1 材料与方法

1.1 资料 收集2006年2月-2008年8月深圳市人民医院甲乳外科手术切除乳腺标本,术后病理确定为乳腺浸润性导管癌55例,另取慢性纤维囊性腺病9例作为对照组。患者均为女性,年龄31-71岁,中位年龄42.3岁。TNM分期(1988年乳腺癌TNM分期标准):Ⅰ期+Ⅱ期34例,Ⅲ期+Ⅳ期21例。肿瘤直径1-8 cm,淋巴结有转移者31例,无转移者24例。

1.2 方法 全部标本按标准取材后,经10%中性缓冲福尔马林溶液固定,常规石蜡包埋。做做4 μ m厚连续切片,常规HE染色及VEGF和Ⅷ因子免疫组织化学染色(S-P法)。以PBS代替一抗作阴性对照,用已知Ⅷ因子阳性、VEGF阳性的乳腺癌组织切片作阳性对照。

1.3 免疫组织化学结果判定 VEGF和Ⅷ因子染色的判定是以细胞膜和/或细胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性。所有计量数据均由2名病理医生采用双盲法(独立检测)进行检测。

1.3.1 微血管密度定量方法 MVD由Ⅷ因子染色计数每高倍视野下血管环的条数,所有的单个细胞或细胞团,只要与周围组织分离清楚,不管有没有管腔形成,都认为是1个可计数的微血管,肿瘤内硬化区与肿瘤交界处软组织内的微血管不计数。在高倍镜下计数5个视野范围内的MVD计数,取其平均值。

1.3.2 VEGF计量方法 VEGF染色先在低倍视野内(40×、100×)找到观察部位,然后在高倍视野内(400×)每张玻片选取5个视野,每个视野观察1000个细胞,根据免疫组化评分法进行综合评分,将切片染色强度分3级,淡黄色(+)1分,黄色(++)2分,棕黄。色(+++)3分;阳性细胞计数也分3级,阳性细胞数＜25%为1分,阳性细胞数＞50%为3分,两者之间为2分。每张切片记0-6分。

1.4 统计学分析 采用t检验进行统计分析。

2 结果

2.1 乳腺浸润性导管癌VEGF的表达及MVD计数 乳腺组织中VEGF和Ⅷ因子表达阳性为棕黄色颗粒,分布于细胞浆,呈弥漫性分布。见表1。

表1 乳腺浸润性导管癌组织和乳腺纤维腺瘤中VEGF表达和MVD计数

2.2 乳腺浸润性导管癌VEGF、MVD与病理分期和淋巴结转移的关系 见表2。

表2 乳腺浸润性导管癌 VEGF、MVD与病理分期和淋巴结转移的关系

3 讨论

乳腺癌的发生、发展和转移呈明显的血管依赖性。当肿瘤生长到一定体积,通过肿瘤细胞分泌多种血管生长因子,促进血管生成[1,2]。我们的研究发现,乳腺癌病灶中VEGF的表达水平明显较对照组高,对应的微血管密度也较对照组高,VEGF的表达与MVD关系密切。说明了VEGF的表达对于局部血管密度的增加具有直接作用,可能是通过自分泌或旁分泌途径促进了新生血管的生成,进而促进了肿瘤的侵袭生长。我们的研究表明,乳腺浸润性导管癌中VEGF的表达与肿块大小有相关性。这一结果与报道一致,当肿瘤直径达到1mm以上时,进一步的生长需要有新的毛细血管形成。当肿瘤形成自身的血管系统以后,肿瘤生长迅速,且新生毛细血管基底膜呈节段性分别,比正常组织的成熟毛细血管对瘤细胞具有更高的亲和性,促进瘤细胞向循环系统入侵,发生系统转移[3,4]。

肿瘤组织中的微血管计数可以作为预后的的独立参考指标,微血管计数比单独测定血管生长因子表达的更有意义,乳腺癌组织内新生毛细血管量的多少同淋巴结转移有密切的关系,即肿瘤内毛细血管数量越多淋巴结转移的机率也愈高。我们的研究表明肿瘤的临床分期与VEGF表达和MVD值正相关,VEGF表达和MVD值与乳腺浸润性导管癌的淋巴结转移情况相关,伴有淋巴结转移的乳腺浸润性导管癌组织中VEGF阳性表达率高,MVD值也高。MVD值的增高预示着瘤体生长速度的加快,转移可能性增加和患者生存期缩短,由于乳腺癌的淋巴结转移与预后有肯定的关系,因此肿瘤内MVD可以作为独立的预后判断指标[5,6]。

[1]胡帅尔,张雅洁,崔玉梅,等.VEGF-A和VEGF-C在乳腺癌组织中的表达及其意义[J].癌症,2005,24(9):1076.

[2]谭小宇,戴 东,刘国华.动态检测CA-153、VEGF-A探讨乳腺癌预后的相关性研究[J].中国实验诊断学,2009,13(6):901.

[3]滕月娥,李 鹏,潘 宏.117例乳腺癌组织中COX-2和VEGF-C表达及临床意义[J].现代肿瘤医学,2009,17(8):812.

[4]Perrone G,Vincenzi B,Santini D,et al.Correlation of p53 and bcl-2 expression withvascularendothelial growth factor(VEGF):microvessel density(MVD)and clinico-pathological features in colon cancer[J].Cancer Lett,2004,208(2):227.

[5]崔 涛,朱祖安,刘 莹,等.NF-κ B、c-erbB-2和 VEGF-C 在乳腺癌组织中的表达与临床转移、分期间的关系[J].诊断病理学杂志,2009,16(1):96.

[6]Koyama Y,Kaneko K,Akazawa K,et al.Vascular endothelial growth factor-C and vascular endothelial growth factor-d messenger RNA expression in breast cancer:association with lymph node metastasis[J].Clin Breast Cancer,2003,4(5):354.

Expression of vascular endothelial growth factor and microvessel density in mammaryinfitrating ductal carcinomaand its re-lationship with biological behaviour

LUOMin,SHENGHui,YUAN Chun-li,et al.(1.The PeoplesHospital of Shenzhen,Shenzhen518000,China;2.The First Hospital of Jilin University,Changchun130021,China)

ObjectiveTo study the expression of vascular endothelial growth factor(VEGF)and microvessel density(MVD)in mammary infitrating ductal carcinoma andits relationshipwith biological behaviour.MethodsSpeciece ofmammary infitrating ductal carcinoma were detected the expression of VEGF and MVD by immunohistochemical methods.MVD was calculated according to the quantification of positiveⅧfactor expression.Clinicopathological characteristics of the patients includingtumor size,clinical stage and auxiliary lymph node metastasiswere recorded and compared with the results of VEGF and MVD expression.ResultsVEGF expression and MVD ininvasive breast cancer group were greater than those innormal controlgroup.VEGF expression andMVDwere correlated to clinical stage.VEGF expression and MVD in invasive breast cancer with lymph node metastasiswere significantly higher than those without lymph node metastasis.MVD was correlated withVEGF expression.ConclusionMVD and expressionof VEGF are correlated to vesselformation and invasion of invasive breast cancer.MVD and expression of VEGF may provide reference for prognostic evaluation of invasive breast cancer.

mammary infitrating ductal carcinoma;vascular endothelial growth factor(VEGF);microvessel density(MVD)

R737.9

A

1007-4287(2010)07-1066-02

*通讯作者

2008-12-19)