紫杉醇对兔耳增生性瘢痕组织的影响

段红梅 吴志远 江黎明

增生性瘢痕的形成是由于皮肤创伤后的愈合过程中，成纤维细胞过量增殖和胶原纤维过度增生的结果。增生性瘢痕的防治是现代医学的难题之一，寻找治疗和预防瘢痕增生和药物具有重要的意义。Morris证实兔耳腹面皮肤全层缺损后产生瘢痕组织类似人皮肤增生性瘢痕［1］。国内李荟元等［2］建立了兔耳瘢痕模型，为瘢痕研究提供了一种很好的实验工具。隐丹参酮是从中药丹参中提取的重要活性成分，具有抗氧化，抗动脉粥样硬化、抗肿瘤作用。本研究旨在探讨紫杉醇对兔耳瘢痕组织的影响，为瘢痕防治提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料 紫杉醇购于云南柯菲平医药有限公司。

1.2 动物 新西兰大白兔24只，体重2.3～2.8 kg，雌雄兼用，购自广东医学院实验动物中心。

1.3 实验方法 兔适应性喂养24 h，用氯胺酮肌注麻醉，用量为1 mg/kg。在兔双侧腹侧分别做2个边长为1 cm的正方形切口，完整切除全层皮肤，直至软骨膜表面。用灼热铁丝烧灼创缘四周皮肤，创面贴敷创可贴。观察疤痕形成情况，21 d时将兔耳疤痕随机分为4组，每组n=12。分别于疤痕内基底部及疤痕灶内注射不同浓度的药物或生理盐水，注射用量为40 ml。A组:注射生理盐水;B组:注射浓度为9 mg/L的紫杉醇;C组:注射浓度为27 mg/L的紫杉醇;D组:注射浓度为81 mg/L的紫杉醇。继续喂养，28 d时，同样在麻醉条件下切取瘢痕组织标本，测定瘢痕增生情况。

1.4 观察指标 28 d时，将收取瘢痕组织及周围正常组织标本于低倍镜下用测微尺测出耳腹侧正常皮肤厚度(a)、耳软骨厚度(b)、耳背皮肤厚度(c)、耳增生块全厚度最大径(d)，按以下公式测算出瘢痕增生指数(Hypertophic Index，HI):HI=［d-(b+c)］/a。

1.5 统计学方法 采用SAS软件包(由广东医院统计学教研室提供)进行配对t检验和方差分析。

2 结果

2.1 瘢痕形成情况 在兔耳腹侧形成创面后，伤口约13～15 d后愈合，愈合过程中上皮化时即能触到硬块，此硬块不断高于皮面，淡红色，增生范围不超过原创沿，19～22 d时增生到最高峰，厚度约为兔耳腹面皮肤厚度的2.8倍。

2.2 瘢痕增生指数对比情况 结果显示:紫杉醇的浓度分别为 0 mg/L，9 mg/L，27 mg/L，81 mg/L 时，作用于兔耳瘢痕组织7 d后瘢痕增生指数分别(2.86±0.13)、(2.36±0.23)、(1.98±0.33)、(1.56±0.22)，瘢痕增生指数随药物浓度的增加而减少，与药物浓度呈负相关，P=0.008，剂量组与对照组差异有统计学意义(P＜0.01)。

3 讨论

增生性瘢痕的组织特征为成纤维细胞过度激活增殖同时伴随大量的胶原合成堆积［3］。胶原的产生在瘢痕形成过程中起着决定性作用［4］。胶原代谢是一个多因素参与的复杂生物反应过程，包括胶原的合成和分解代谢［5］。严重创伤、烧伤及外科手术后常常遗留增生性瘢痕，影响外观和功能。其发病机理尚未彻底阐明，也缺乏理想的治疗方法。传统的治疗如手术切除、类固醇激素、抗代谢药、免疫抑制剂和放射疗法等，均因术后易复发或严重的全身性副作用而限制了临床应用［6］。筛选出疗效确切、副作用小的抗瘢痕纤维化的有效药物具有重要的临床意义。但对于药物防治瘢痕增生的研究手段，主要有三种途径:一是细胞培养，尤其是成纤维细胞培养，通过药物对成纤维细胞的作用来进行筛选;二是将人的病理性瘢痕组织移植到裸鼠的皮下，研究药物对瘢痕组织作用产生的变化;三是通过药物临床实践来总结有关药物防治和瘢痕的经验。这些方法已经取得了一定的成绩。本实验采用了兔耳瘢痕动物模型，使药物对于瘢痕防治的研究手段有了进一步的发展。通过对兔耳增生块瘢痕增生指数的测定，结果显示，紫杉醇明显抑制兔耳瘢痕增生，瘢痕增生指数随药物浓度的增加而减少，与药物浓度呈负相关，与生理盐水对照组间差异有统计学意义。我们认为紫杉醇可能通过两个途径抑制瘢痕的增生:(1)直接抑制成纤维细胞的生长增殖，从而减少胶原的合成和分泌;(2)增加胶原酶产生、增强胶原酶活性，促使已形成的胶原纤维降解和纤维重吸收。紫杉醇具有药性作用强，副作用小，有望成为预防和治疗人皮肤增生性瘢痕的有效药物，但尚需体内实验和临床进一步研究证明。

［1］Morris DE，Wu Zhao LL，et al.Acute and chronic animal models fof excessive dermal scaring:quantitative studies.Plastic Recon-str Surg，1997，100(3);674-681.

［2］李荟元，刘建波，夏炜，等.增生性瘢痕动物实验模型的建立与应用.中华整形外科杂志，2001，17(5):276-278.

［3］胡大海，陈壁，朱雄翔，等.P物质上调正常人真皮成纤维细胞TGF-β1的 mRNA 表达.中华整形外科杂志，2002，18(4):234-236.

［4］李高峰，罗成群.低氧对瘢痕形成的影响.中华整形外科杂志，2003，19(5):238-386.

［5］吴志远，罗少军，江黎明.诺新康对人皮肤瘢痕基因表达的影响.广州医药，2007，6(38):22-23.

［6］商庆新，张涤生.丹参和川芎嗪对成纤维细胞生长的体外抑制实验.中国修复重建外科，1998，12(6):321-323.