甲基绿-派洛宁染色方法在慢性子宫内膜炎诊断中的应用

陈永宏 袁林秀 廖晓丹

山西省汾阳医院病理科，山西 汾阳 032200

慢性子宫内膜炎为子宫内膜的慢性炎症。慢性子宫内膜炎虽然发病率较低，可一旦患病则会给患者生活、工作带来诸多影响，也给患者本人造成许多痛苦。在子宫内膜间质内找到浆细胞是诊断子宫内膜炎的关键。但是，混杂在子宫内膜间质细胞之间的浆细胞很不容易找到，不成熟的浆细胞就更不容易辨认。造成慢性子宫内膜炎漏诊。我们应用甲基绿-派洛宁染色方法帮助辨认浆细胞，确诊慢性子宫内膜炎64例，现报告如下。

1 材料及方法

1.1 材料

山西省汾阳医院门诊及住院功能性子宫出血病例294例。

1.2 方法

采用Cook甲基绿-派洛宁提纯法[1]

[试剂配制]

（1）甲基绿原液2%甲基绿溶液，氯仿抽提五次。

（2）派洛宁原液2%派洛宁。

（3）醋酸缓冲液（pH4.8）0.2M醋酸液41ml，0.2M醋酸钠59ml。

（4）甲基绿-派洛宁染液。甲基绿提纯液15ml，派洛宁原液1ml，醋酸缓冲液20ml，甘油10ml。临用前配制。

[染色步骤]

（1）组织切片脱蜡至水。

（2）用醋酸缓冲液（pH4.8）浸洗。

（3）置于甲基绿-派洛宁染液染色3分钟。

（4）用醋酸缓冲液（pH4.8）清洗。

（5）滤纸吸干，迅速丙酮分化30秒。

（6）用纯丙酮、二甲苯等量（1∶1）混合液分化、脱水30秒。

（7）二甲苯透明，光学树胶封固。

2 结果

图1

294例功能性子宫出血病人的子宫内膜组织，其中64例诊断为慢性子宫内膜炎。子宫内膜组织呈淡红色，浆细胞核呈绿色，浆细胞胞浆呈鲜红色。在HE形态下，子宫内膜间质内有散在的或成簇淋巴细胞浸润，部分淋巴细胞出现浆细胞样分化，较少出现典型的成熟的浆细胞。早期的浆细胞的核形态与淋巴细胞相似，胞浆增多，核周出现淡染区，后期则出现核内染色质分布呈点彩样，成熟的浆细胞出现典型的车轮状核。长期的慢性炎症间质细胞可出现纤维化及毛细血管增生。见图1。

3 讨论

甲基绿和派洛宁两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿对DNA亲和力强，使DNA显现出绿色，而派洛宁对RNA的亲和力强，使RNA呈现出红色。浆细胞的胞浆内合成蛋白质旺盛，含有丰富的粗面内质网，上有大量的核糖体，内含大量的核糖核酸，故浆细胞胞浆着色呈鲜红色。淋巴细胞分为T淋巴细胞、B淋巴细胞两大类。B淋巴细胞最终发育为浆细胞，产生抗体，在发育的过程中，浆细胞内核糖体逐渐增多。分泌抗体功能逐渐加强，形态也逐渐典型。

慢性子宫内膜炎在妇科临床虽没有宫颈糜烂及阴道炎那样多见，但仍是危及广大妇女身体健康的主要原因之一。慢性子宫内膜炎多由急性子宫内膜炎治疗不彻底所致。慢性子宫内膜炎的症状有疼痛的、白带增多、经量增多。由于子宫内膜的生理性周期剥脱，严重的慢性子宫内膜炎并不多见。这就给临床诊断带来困难。镜下见内膜间质内有多少不等的浆细胞及淋巴细胞浸润，而浆细胞的存在是诊断慢性子宫内膜炎的依据之一。但有时内膜细胞增生、经前期内膜的蜕膜样改变以及大量淋巴细胞的存在可能影响对浆细胞的辨认。应用免疫组化方法有助于诊断，但无法排除假阴性的问题，其费用较高，操作复杂，在没有开展免疫组化的基层医院很难实行。本方法294例功能性子宫出血病人的子宫内膜组织，其中64例诊断为慢性子宫内膜炎。浆细胞核呈绿色，浆细胞胞浆呈鲜红色，特别鲜艳夺目容易辨认。因此，本法简便、易行、实用，可清晰显示浆细胞的存在，可明确诊断慢性子宫内膜炎。

轻度炎症病人，双合诊可无异常情况发现，故临床常诊断为功能失调性子宫出血。有人在1000例功能失调性子宫出血病人中作病理组织检查，发现11%为子宫内膜炎。在增生过长的子宫内膜组织中如发现星星点点的淋巴细胞做甲基绿-派洛宁染色往往能找到浆细胞，所以内膜间质内发现淋巴细胞即可认为是慢性子宫内膜炎。使用抗生素治疗往往有效，可一旦漏诊则造成病人不必要的痛苦。

[1]龚志锦.病理组织制片和染色技术[M].上海：上海科学技术出版社，1994，1：301.