不同砧木沃柑果实发育过程中糖酸组分含量变化及品质综合评价

摘要：【目的】研究不同砧木沃柑在果实发育过程中的糖酸组分变化，并综合评价果实品质，确定各砧木沃柑的最佳采收期，为沃柑的科学种植和管理提供理论依据。【方法】以枳壳、香橙和酸橘3种砧木沃柑为研究对象，考察其果实在2022年7月—2023年4月生长发育过程中糖酸组分的动态变化规律，并利用主成分分析法对果实品质进行综合评价。【结果】不同砧木沃柑在果实发育过程中的糖酸组分含量有所差异，但整体变化趋势基本一致。随着果实发育成熟，可溶性固形物、蔗糖、葡萄糖、果糖和总可溶性糖含量，以及甜度值、甜酸比、固酸比呈上升趋势；麦芽糖、可滴定酸、柠檬酸和总有机酸含量呈下降趋势；苹果酸含量呈先降低后升高的变化趋势；维生素C（Vc）和莽草酸含量呈先升高后降低的变化趋势；苯甲酸和酒石酸含量相对稳定；琥珀酸含量呈现波动变化。各品质指标之间存在一定相关性，其中可溶性固形物、果糖、葡萄糖、蔗糖、总可溶性糖、甜度值、固酸比和甜酸比两两指标间呈极显著正相关（P<0.01，下同），可滴定酸、柠檬酸和总有机酸两两指标间也呈极显著正相关。枳壳砧和香橙砧沃柑果实在4月综合品质最佳，酸橘砧沃柑果实在3月综合品质最佳。3种砧木中，11—12月枳壳砧沃柑果实的综合得分最高；1月香橙砧沃柑果实的综合得分最高；2月酸橘砧沃柑果实的综合得分最高；3—4月枳壳砧和酸橘砧沃柑果实的综合得分高于香橙砧沃柑。【结论】3种砧木沃柑在3—4月的综合品质高于1—2月。在广西地区，沃柑12月采收宜选择枳壳砧沃柑，1—2月采收宜选择香橙砧或酸橘砧沃柑，3—4月采收宜选择枳壳砧或酸橘砧沃柑。

关键词：沃柑；砧木；果实发育；可溶性糖；有机酸；品质评价

中图分类号：S666.1文献标志码：A文章编号：2095-1191（2024）08-2201-14

Changes in sugar and acid components contents and comprehen⁃sive quality evaluation during fruit development of Orah withdifferent rootstocks

QIN Yu-yan LUO Yi-can DENG You-zhan WANG Yun-ru WU Feng ZHANG Li-juan SHAN Bin CEN Shu-meng3

（1Guangxi Subtropical Crops Research Institute/Key Laboratory of Quality and Safety Control for Subtropical Fruit andVegetable，Ministry of Agriculture and Rural Affairs，Nanning，Guangxi 530001，China；2Guangxi Key Laboratory ofQuality and Safety Control for Subtropical Fruits，Nanning，Guangxi 530001，China；3College of Food and QualityEngineering，Nanning University，Nanning，Guangxi 541699，China）

Abstract：【Objective】This study aimed to investigate the changes in sugar and acid components during the fruit de-velopmentofOrah grafted onto different rootstocks and to comprehensively evaluate the fruit quality to determine the opti-mal harvest time for each rootstock.The findings would provide theoretical basis for the scientific cultivation and manage-mentofOrah.【Method】Orah with Poncirus trifoliate Raf，Citrus junosSieb.ex Tanaka and C.reticulata Blanco as root-stocks were selected as research subjects to investigate the dynamic changes in sugar，acid，and other fruit componentsfrom July 2022 to April 2023，and the fruit quality was comprehensively evaluated using principal component analysis.【Result】The sugar and acid components contents of Orah varied among different rootstocks during fruit development，though the overall trends were consistent.As the fruit developed and matured，contents of soluble solids，sucrose，glu-cose，fructose，total soluble sugars，as well as sweetness value，sweetness-to-acid ratio and solid-to-acid ratio increased，while contents of maltose，titratable acid，citric acid and total organic acids decreased.Malic acid content initially de-creased and then increased，while vitamin C（Vc）and shikimic acid contents first increased and then decreased.Benzoic acid and tartaric acid contents remained relatively stable，while succinic acid content fluctuated.Correlations were ob-served among various quality indicators.Each two of soluble solids，fructose，glucose，sucrose，total soluble sugars，sweetness value，sweetness-to-acid ratio and solid-to-acid ratio were all extremely significantly positively correlated（P<0.01，the same below），each two of titratable acid，citric acid and total organic acids were extremely significantly positively correlated.Orah with P.trifoliate Raf and C.junosSieb.ex Tanaka as rootstocks had the best overall quality in April，while Orah with C.reticulata Blanco as rootstock had the best overall quality in March.Among the 3 rootstocks，from November to December，Orah with P.trifoliate Raf as rootstock had the highest comprehensive score；in January，Orah with C.junosSieb.ex Tanaka as rootstock had the highest comprehensive score；in February，Orah with Citrus re-ticulata Blanco as rootstock had the highest comprehensive score；and from March to April，Orah with P.trifoliate Raf and C.reticulata Blanco as rootstocks had higher comprehensive score than Orah with C.junosSieb.ex Tanaka as root-stock.【Conclusion】The overall quality of Orah grafted onto all 3 rootstocks is higher in March and April compared toJanuary and February.In Guangxi，Orah grafted onto P.trifoliate Raf is preferable for harvest in December，Orah grafted onto C.junosSieb.ex Tanaka or C.reticulata Blanco is preferable for harvest in January or February，and Orah grafted ontoP.trifoliate Raf or C.reticulata Blanco is preferable for harvest in March or April.

Key words：Orah；rootstock；fruit development；soluble sugars；organic acids；quality evaluation

Foundation items：Youth Science Fund Project of Guangxi Natural Science Foundation（2021GXNSFBA196006）；Construction Project of Guangxi Innovation Team of China Agriculture Research System（nycytxgxcxtd-2021-05-03）；Project of China Green Food Development Center（PJ2023-014）

0引言

【研究意义】我国柑橘资源丰富，是世界第一大柑橘生产国和消费国，柑橘栽培面积及产量常年稳居世界首位（李霜霜等，2024）。沃柑是坦普尔橘橙与丹西红橘杂交品种，属晚熟杂交柑，具有早结丰产、外观漂亮、品质优良、适应性广、抗病性强等特点。沃柑于2004年由中国农业科学院柑桔研究所从韩国引进，自2013年以来在广西得到迅速发展（刘要鑫等，2019），截至2024年，广西沃柑种植面积已超11.33万ha，居全国之首（朱芙蓉等，2024）。然而，沃柑产量提高的同时伴随着果实品质参差不齐的现象。随着人们生活水平的提高，对高品质沃柑的需求逐渐增加，果实品质参差不齐严重制约沃柑产业发展。由于不同砧木类型和采收期对沃柑品质具有重要影响（刘要鑫等，2019；莫健生等，2022），因此，研究不同砧木沃柑在各个发育期的果实品质，并进行综合评价，确定不同砧木沃柑的最佳采收期，对于提升沃柑品质及满足市场需求具有重要意义。【前人研究进展】沃柑主要通过嫁接方式进行繁殖，其养分吸收效率和向地上部的营养转运量均由砧木类型决定，因此砧木类型会影响树体营养与果实品质（Siet al.，2010；何满等，2022）。Zhu等（2020）研究7种砧木对3个晚熟脐橙品种果实品质的影响，结果表明嫁接在枳砧上的果实品质最佳，其可溶性固形物含量显著高于香橙砧和红橘砧，固酸比最高；而红橘砧脐橙中维生素C（Vc）含量最高。宋放等（2022）研究发现，不同砧木靠接组合对伦晚脐橙果实品质有显著影响，根据果实品质综合评价结果由高到低依次为枳砧+红橘砧>枳砧>枳砧+香橙砧>红橘砧>香橙砧。在默科特柑橘中的研究结果认为枳砧和酸橘砧果实品质优于香橙砧（张社南等，2022b），在红美人和红江橙柑橘中的研究也发现枳砧果实的固酸比显著高于香橙砧（陈敏等，2023；洪丹丹等，2023）。刘要鑫等（2023）研究枳、红橘、香橙和枳橙4种砧木在桂南地区的综合表现，认为香橙砧沃柑具有丰产稳产的特点；枳橙砧沃柑在单果重、挂果数量和部分品质指标上优于其他砧木，但果实品质整体表现低于枳砧沃柑；红橘砧沃柑整体表现较差。不同砧木可能通过影响根系对水分的吸收、叶片光合速率和光合产物分布等方式影响柑橘糖和酸的含量（Morales Alfaro et al.，2023）。Barry等（2004）的研究结果表明，嫁接在Carrizo枳橙砧的Valencia甜橙果实可溶性固形物含量高于Rough柠檬砧，主要是由于后者的根系分布更大，对水分的吸收能力更强，其果实受到的水分亏缺胁迫更小。砧木对果实品质的影响也可能与砧木影响矿质元素的吸收有关。枳壳砧橘橙的根系对铁、锰、锌、硼、磷、镁等元素的吸收能力较强，而红橘砧对各种营养元素的吸收能力较弱（何满，2023）。在铜过量的沃柑园，香橙砧沃柑的果实品质和养分含量优于枳壳砧和红橘砧沃柑（时立标，2023）。砧木还可通过影响接穗的基因表达对柑橘果实品质产生重要影响。Lana等（2021）研究发现，血橙果实品质相关基因的调控与生物活性物质积累和酸降解呈正相关；不同砧木与接穗的特定组合可促进果实中花青素合成、Vc积累和酸降解。Hu等（2022）研究表明，枳砧柑橘较红橘砧具有更高的可溶性固形物含量和更低的可滴定酸含量，可能是由于枳砧木产生的信号物质Cre-miR399-3p影响了果实可溶性固形物生成。【本研究切入点】糖酸是影响果实品质的核心因子，对于果实的品质评价至关重要。以往对沃柑的品质研究较少区分砧木，且品质评价所用的指标过于单一，主要为可溶性固形物、可滴定酸含量和固酸比等（莫健生等，2022；刘要鑫等，2023）。然而，果实的风味品质还受糖酸种类及其比例、甜度值、甜酸比等多种指标的显著影响。目前，尚缺乏采用多个糖酸相关指标对不同砧木沃柑在整个果实发育过程品质变化的综合评价。【拟解决的关键问题】枳壳、酸橘和香橙是沃柑嫁接最常用的砧木，以这3种砧木为试验材料，揭示不同砧木沃柑在各个发育阶段糖酸等关键品质因子的动态变化规律；综合18个糖酸相关指标，利用主成分分析（PCA）法构建沃柑品质综合评价体系；明确不同砧木沃柑之间的品质差异，确定各个砧木沃柑的最佳采收期，为沃柑的科学种植和管理提供理论依据。

1材料与方法

1.1试验材料

在同一地块选取长势、结果情况基本一致的沃柑植株，树龄6年，植株管理水平相同，分别以枳壳、香橙和酸橘为砧木。甲醇和乙腈均为色谱纯，购自美国Fisher公司；氢氧化钠和盐酸均为分析纯，购自国药集团化学试剂有限公司；标准品果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、琥珀酸、苹果酸、柠檬酸、酒石酸、莽草酸和苯甲酸的纯度均为95%以上，购自上海安谱实验科技股份公司。主要仪器设备：LC-20ADXR高效液相色谱仪（日本岛津公司）、AB SCIEX 3200 Q-TRAP三重四极杆质谱联用仪（美国AB SCIEX公司）、手持数显糖度计（浙江纳德科学仪器有限公司）和TGL-20M医用离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司）。

1.2试验方法

试验地位于广西南宁市武鸣区双桥镇腾翔村沃柑果园（23°06′9.56″N，108°17′50.10″E），属亚热带季风气候。每种砧木沃柑选取2棵果树作为1个处理，每处理设3个重复，共18棵树。枳壳砧沃柑标记为ZK，香橙砧沃柑标记为XC，酸橘砧沃柑标记为SJ。2022年7月—2023年4月，于每月的第1 d采集沃柑果实。每个处理从东南西北4个方向选取大小均匀、表面完好、无病虫害的果实30个，采后立即运回实验室用于各项品质指标的测定。参考NY/T 716—2003《柑橘采摘技术规范》，沃柑适宜采收期的成熟度指标应满足：可溶性固形物含量≥8.5%，可滴定酸含量≤1.0%，固酸比≥8。

1.3测定项目及方法

1.3.1可溶性固形物、可滴定酸和Vc含量可溶性固形物和可滴定酸含量分别采用GB/T 8210—2011《柑桔鲜果检验方法》中的手持糖量计法和指示剂法进行测定；Vc含量采用GB 5009.86—2016《食品安全国家标准食品中抗坏血酸的测定》中2，6-二氯靛酚滴定法进行测定。

1.3.2可溶性糖各组分含量可溶性糖各组分（果糖、蔗糖、葡萄糖、麦芽糖）含量采用GB 5009.8—2016《食品安全国家标准食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定》中高效液相色谱法进行测定。称取5.0 g样品于离心管中，加入20 mL一级水，50℃水浴超声提取30 min，冷却后10000 r/min离心10min，收集上清液，沉淀再加入20 mL一级水提取1次，合并上清液并转移至50 mL容量瓶定容，过0.22μm水相滤膜后上机测定。

液相色谱条件：赛默飞HypersilTM APS-2（250 mm×4.6 mm，5μm）色谱柱和同款保护柱；柱温40℃;进样量20μL；流动相为乙腈—水溶液（体积比75∶25）；流速0.8 mL/min；检测器为Waters 2414示差检测器。

1.3.3有机酸各组分含量有机酸各组分（苹果酸、柠檬酸、琥珀酸、酒石酸、莽草酸、苯甲酸）含量参考GB 5009.157—2016《食品安全国家标准食品中有机酸的测定》，采用高效液相色谱—质谱联用仪进行测定。称取2.0 g样品于离心管中，加入20 mL一级水，50℃水浴超声提取30min，冷却后10000r/min离心10min，收集上清液，沉淀再加入20 mL一级水提取1次，合并上清液并转移至25 mL容量瓶定容，过0.22μm水相滤膜后上机测定。

色谱条件：Waters ACQUITY UPLC HSS T3（100 mm×2.1 mm，1.8μm）色谱柱和同款保护柱；柱温40℃;进样量5μL；流动相A为乙腈溶液，流动相B为0.1%甲酸水（v/v）溶液；梯度洗脱程序：0～6.0 min，2%～5%A；6.0～7.0 min，5%～85%A；7.iTJjrbmz3QIE3Bu3zRTetgqvNT7T5w5kQ4iIsZQf5e8=0～8.5 min，85%～2%A；8.5～10.0 min，2%A；流速0.3 mL/min。

质谱条件：电喷雾离子源，采用负离子多反应监测模式；雾化气30.0 psi；气帘气30.0 psi；碰撞气medium，电离电压-4500.0 V；离子化温度550.0℃。1.3.4风味指标按照果糖甜度占比1.75、蔗糖甜度占比1.00、葡萄糖甜度占比0.70、麦芽糖甜度占比0.35，计算沃柑果实的甜度值（王镜岩，2002）。

甜度值=果糖含量×1.75+蔗糖含量×1.00+葡萄糖含量×0.70+麦芽糖含量×0.35；甜酸比=甜度值/总有机酸含量；固酸比=可溶性固形物含量/可滴定酸含量。总可溶性糖含量为果糖、蔗糖、葡萄糖和麦芽糖含量总和；总有机酸含量为苹果酸、柠檬酸、琥珀酸、酒石酸、莽草酸和苯甲酸含量总和。

1.4统计分析

采用SPSS 22.0和Origin Pro 2021对试验数据进行计算和统计分析，采用F检验，多重比较用Dun-can’法。品质综合评价方法：先采用Z-Score标准化法对原始数据进行无量纲化处理；然后使用PCA提取关键因子，计算各品质指标的特征值及其方差贡献率，并采用方差极大法计算旋转因子的载荷值；再通过汤姆逊回归法计算因子得分，并依据特征值大于1的原则选择提取因子；最后以相对应的因子方差贡献率作为权重，将因子得分和相应的权重进行加权求和，得到不同砧木果实品质的综合得分（李勋兰等，2020；张伟清等，2023；李可等，2024）。

2结果与分析

2.1不同砧木沃柑果实发育过程中可溶性固形物、可滴定酸和Vc含量的变化

由图1-A可知，在果实发育过程中，3种砧木沃柑的可溶性固形物含量呈上升趋势。枳壳砧沃柑果实的可溶性固形物含量在7—10月较稳定，11月—次年1月快速升高（由15.9%升至17.2%），2月显著降低（P<0.05，下同），3月和4月显著升高，3月可溶性固形物含量达最高值（19.4%）。香橙砧沃柑果实的可溶性固形物含量在7—9月较稳定，10—12月快速升高（由13.4%升至16.3%），次年1月显著降低，2—4月显著升高，4月达最高值（17.2%）。酸橘砧沃柑果实的可溶性固形物含量在7—10月较稳定，11月—次年2月快速升高（由13.2%升至17.3%），3月显著降低，4月显著升高，4月达最高值（18.1%）。3种砧木中，1月枳壳砧和酸橘砧沃柑果实的可溶性固形物含量显著高于香橙砧；2月酸橘砧沃柑果实的可溶性固形物含量最高；3—4月枳壳砧沃柑果实的可溶性固形物含量显著高于香橙砧和酸橘砧。

由图1-B可知，在果实发育过程中，3种砧木沃柑的可滴定酸含量整体呈下降趋势。枳壳砧沃柑果实的可滴定酸含量在7—9月较稳定，且保持在较高水平（2.00～2.08 g/100 mL），10—12月快速降低，次年2—4月趋于稳定，4月达最低值（0.53 g/100 mL）。香橙砧沃柑果实的可滴定酸含量在8月和9月保持较高水平（1.77和1.79 g/100 mL），10月—次年1月快速降低，2月显著升高，3月和4月又逐渐降低，4月降至最低值（0.43 g/100 mL）。酸橘砧沃柑果实的可滴定酸含量在7—9月保持较高水平（1.87～2.08 g/100 mL），10—11月快速降低，12月—次年2月缓慢降低，3月降至最低值（0.40 g/100 mL）。3种砧木中，除了8月和12月，枳壳砧沃柑果实的可滴定酸含量均最高。

由图1-C可知，在果实发育过程中，3种砧木沃柑的Vc含量整体呈先升高后降低的变化趋势。枳壳砧沃柑果实的Vc含量在7—11月快速升高，12月显著降低，次年1月和2月又迅速升高并保持在较高水平（35.07和37.81 mg/100 g），3月和4月快速降低。香橙砧沃柑果实的Vc含量在7—11月快速升高，11月—次年1月保持在较高水平（22.50～24.42 mg/100 g），2月和4月快速降低。酸橘砧沃柑果实的Vc含量在9月—次年2月逐渐升高，2月和3月保持在较高水平（31.34和30.61 mg/100 g），4月快速降低。3种砧木中，香橙砧沃柑果实的Vc含量在整个发育期均显著低于枳壳砧和酸橘砧；7—10月酸橘砧沃柑果实的Vc含量最高，11月—次年4月枳壳砧沃柑果实的Vc含量最高。

2.2不同砧木沃柑果实发育过程中可溶性糖各组分含量的变化

3种砧木沃柑果实的蔗糖占总可溶性糖比例最高（35.23%～64.47%），其次为果糖（18.66%～29.35%）和葡萄糖（17.77%～29.01%），还含有少量麦芽糖（1.37%～14.80%）。蔗糖含量∶葡萄糖含量∶果糖含量在枳壳砧、香橙砧和酸橘砧沃柑果实中分别为（1.3～3.3）∶1∶1、（1.3～3.5）∶1∶1和（1.2～3.1）∶1∶1，平均约为2.3∶1∶1。

由图2-A可知，在果实发育过程中，3种砧木沃柑的蔗糖含量呈上升趋势。枳壳砧沃柑果实的蔗糖含量在9—12月快速升高（由23.89 g/kg升至68.01 g/kg），次年1—2月稍有下降，3月和4月又迅速升高，3月和4月蔗糖含量分别为96.39和99.04 g/kg，远高于其他月份。香橙砧沃柑果实的蔗糖含量在7月—次年1月快速升高（由15.35 g/kg升至73.33 g/kg），1月达最高值，之后逐渐下降。酸橘砧沃柑果实的蔗糖含量在9月—次年3月快速升高（由21.30 g/kg升至90.77 g/kg），3月达最高值，4月下降至85.45 g/kg，但3月和4月蔗糖含量远高于其他月份。3种砧木中，1—2月香橙砧沃柑果实的蔗糖含量最高，但3—4月其含量最低，枳壳砧沃柑果实的蔗糖含量则最高。

由图2-B和图2-C可知，在果实发育过程中，3种砧木沃柑的葡萄糖和果糖含量均呈上升趋势。枳壳砧沃柑果实的葡萄糖和果糖含量在7—11月快速升高，12月较稳定，次年1月显著降低，2—4月显著升高；其中，3月和4月葡萄糖含量分别为29.13和30.48 g/kg，果糖含量分别为29.86和30.27 g/kg，远高于其他月份。香橙砧沃柑果实的葡萄糖和果糖含量在7—9月快速升高，10—11月较稳定，12月显著降低，次年1—4月显著升高；其中，3月和4月葡萄糖含量分别为28.21和31.06 g/kg，果糖含量分别为29.53和30.41 g/kg，远高于其他月份。酸橘砧沃柑果实的葡萄糖和果糖含量在7—9月快速升高，10—12月较稳定，次年1—4月又快速升高；其中，3月和4月葡萄糖含量分别为29.48和30.25 g/kg，果糖含量分别为29.26和30.03 g/kg，远高于其他月份。3种砧木中，1月香橙砧沃柑果实的葡萄糖和果糖含量最高，2月枳壳砧沃柑果实的葡萄糖和果糖含量最高，3月酸橘砧沃柑果实的葡萄糖含量显著高于香橙砧，4月3种砧木沃柑果实的葡萄糖和果糖含量差异不显著（r>0.05，下同）。

由图2-D可知，在果实发育过程中，3种砧木沃柑的麦芽糖含量整体呈下降趋势。枳壳砧沃柑果实的麦芽糖含量在7月—次年2月逐步下降（由4.88 g/kg降至1.66 g/kg），2月达最低值，之后3—4月略有回升。香橙砧沃柑果实的麦芽糖含量在7—12月逐步下降（由4.34 g/kg降至1.66 g/kg），12月达最低值，之后略有上升并保持稳定。酸橘砧沃柑果实的麦芽糖含量在7月—次年1月逐步下降（由6.18 g/kg降至1.72 g/kg），1月达最低值，之后2—4月显著回升。11月—次年1月，3种砧木之间麦芽糖含量无显著差异，其余时期酸橘砧沃柑果实的麦芽糖含量最高。

由图2-E可知，在果实发育过程中，3种砧木沃柑的总可溶性糖含量整体呈上升趋势。枳壳砧沃柑果实的总可溶性糖含量在8—12月快速升高（由42.16 g/kg升至121.10 g/kg），次年1月稍有下降，3月和4月显著升高，总可溶性糖含量分别为157.53和162.20 g/kg，远高于其他月份。香橙砧沃柑果实的总可溶性糖含量在7—11月快速升高（由37.92 g/kg升至92.26 g/kg），12月较稳定，次年1—4月总可溶性糖含量保持在较高水平（118.75～123.00 g/kg）。酸橘砧沃柑果实的总可溶性糖含量在8月—次年3月快速升高（由43.16 g/kg升至152.10 g/kg），3月达最高值，之后趋于稳定，3月和4月总可溶性糖含量远高于其他月份。3种砧木中，1月香橙砧沃柑果实的总可溶性糖含量显著高于枳壳砧和酸橘砧；但3—4月香橙砧沃柑果实的总可溶性糖含量最低，枳壳砧沃柑果实的总可溶性糖含量最高。

2.3不同砧木沃柑果实发育过程中有机酸各组分含量的变化

3种砧木沃柑果实的有机酸主要为柠檬酸（占比63.34%～88.14%），其次为苹果酸（占比11.40%～35.98%），还含有少量琥珀酸（占比0.08%～0.27%）、酒石酸（占比0.05%～0.15%）、莽草酸（占比0.04%～0.60%）和苯甲酸（占比0.14%～0.37%）。

由图3-A可知，在果实发育过程中，3种砧木沃柑的柠檬酸含量呈下降趋势。枳壳砧沃柑果实的柠檬酸含量在7—12月逐步下降（由11.50 g/kg降至7.28 g/kg），次年1月保持稳定，2月迅速下降，之后趋于稳定。香橙砧沃柑果实的柠檬酸含量从7月到8月显著升高，8月达最高值（11.34 g/kg）后迅速下降，12月降至最低值（5.29 g/kg），之后趋于稳定。酸橘砧沃柑果实的柠檬酸含量7—9月逐渐升高，9月达最高值（12.17 g/kg）后迅速下降，12月降至5.97 g/kg后趋于稳定。3种砧木中，1月香橙砧和酸橘砧沃柑果实的柠檬酸含量显著低于枳壳砧，2—4月不同砧木沃柑果实的柠檬酸含量间差异不显著。

由图3-B可知，在果实发育过程中，3种砧木沃柑的苹果酸含量均在7月达最高值，总体呈先下降后上升的变化趋势。枳壳砧沃柑果实的苹果酸含量在7—9月迅速下降（由2.92 g/kg降至1.32 g/kg），9月达最低值后，10月—次年1月逐渐上升，2月稍有下降，3月和4月又迅速上升。香橙砧沃柑果实的苹果酸含量在7—9月迅速下降（由3.57 g/kg降至1.76 g/kg），9—12月差异不显著，次年1月迅速上升，含量达2.33 g/kg后趋于稳定。酸橘砧沃柑果实的苹果酸含量在7—9月迅速下降（由3.11 g/kg降至1.74 g/kg），9—12月差异不显著，次年1—4月迅速上升。3种砧木中，8、10、12月和次年1—2月，3种砧木沃柑果实的苹果酸含量差异不显著，3—4月香橙砧沃柑果实的苹果酸含量显著低于枳壳砧和酸橘砧。

由图3-C可知，在果实发育过程中，3种砧木沃柑的琥珀酸含量呈波动变化。枳壳砧、香橙砧和酸橘砧沃柑果实的琥珀酸含量均在1月达最高值，分别为0.020、0.022和0.018 g/kg；枳壳砧和香橙砧沃柑在12月达最低值，均为0.008 g/kg，酸橘砧沃柑在2月达最低值，为0.009 g/kg。3种砧木中，1月香橙砧沃柑果实的琥珀酸含量显著高于酸橘砧，2—3月3种砧木沃柑果实的琥珀酸含量差异不显著，4月酸橘砧沃柑果实的琥珀酸含量显著高于香橙砧和枳壳砧。

由图3-D和图3-E可知，在果实发育过程中，3种砧木沃柑的苯甲酸和酒石酸含量保持相对稳定，不同砧木之间苯甲酸含量差异不显著；除12月外，不同砧木之间酒石酸含量差异也不显著。由图3-F可知，在果实发育过程中，3种砧木沃柑的莽草酸含量均表现为7—11月迅速升高，11月—次年1月保持较高含量，2月开始迅速降低；其中，枳壳砧沃柑果实的莽草酸含量在12月达最高值（0.041 g/kg），香橙砧和酸橘砧沃柑在1月达最高值，分别为0.031和0.048 g/kg。3种砧木中，除3月外，在整个发育期酸橘砧沃柑果实的莽草酸含量均最高。

由图3-G可知，在果实发育过程中，3种砧木沃柑的总有机酸含量呈下降趋势。枳壳砧沃柑果实的总有机酸含量在7—12月逐渐下降（由14.47 g/kg降至9.20 g/kg），次年1月略有上升，2月又迅速下降达最低值（7.64 g/kg），之后趋于稳定。香橙砧沃柑果实的总有机酸含量在8—12月迅速下降（由13.95 g/kg降至7.07 g/kg），12月达最低值，之后趋于稳定。酸橘砧沃柑果实的总有机酸含量在7—9月较稳定，10—12月迅速下降（由11.13 g/kg降至7.75 g/kg），12月达最低值，之后趋于稳定。3种砧木中，12月和次年1月、4月香橙砧沃柑总有机酸含量最低，7—8月、10月和次年2—3月3种砧木沃柑果实的总有机酸含量差异不显著。

2.4不同砧木沃柑果实发育过程中甜度值、甜酸比和固酸比的变化

由图4-A可知，在果实发育过程中，3种砧木沃柑的甜度值呈上升趋势。枳壳砧沃柑果实的甜度值在7—12月快速升高（由41.77升至132.30），次年1月和2月稍有下降，3月和4月又迅速升高；3月和4月甜度值分别为169.79和174.19，远高于其他月份。香橙砧沃柑果实的甜度值在7—11月快速升高（由38.88升至100.52），12月较稳定，次年1—4月显著升高，且保持在较高水平（128.67～138.76）。酸橘砧沃柑果实的甜度值在7月—次年3月快速升高（由41.70升至163.52），3月达最高值，之后趋于稳定，3月和4月甜度值远高于其他月份。3种砧木中，10—12月枳壳砧沃柑果实的甜度值显著高于其他2种砧木；次年1月香橙砧沃柑果实的甜度值显著高于其他2种砧木；2月3种砧木沃柑果实的甜度值之间差异不显著；3—4月枳壳砧和酸橘砧沃柑果实的甜度值显著高于香橙砧。

由图4-B可知，在果实发育过程中，3种砧木沃柑的甜酸比呈上升趋势。枳壳砧沃柑果实的甜酸比在7—12月快速升高，次年1月显著下降，2—4月又显著升高；3月和4月甜酸比分别为20.81和21.59，远高于其他月份。香橙砧沃柑果实的甜酸比在整个发育过程中逐渐升高，1—4月保持在较高水平（16.27～19.41）。酸橘砧沃柑果实的甜酸比在7月—次年3月逐渐升高，3月达最高值，之后趋于稳定；2—4月甜酸比保持在较高水平（16.35～18.77）。3种砧木中，10—12月和次年3—4月枳壳砧沃柑果实的甜酸比高于其他2种砧木；1月香橙砧沃柑果实的甜酸比显著高于其他2种砧木；2月3种砧木沃柑果实的甜酸比之间差异不显著。

由图4-C可知，在果实发育过程中，3种砧木沃柑的固酸比总体呈上升趋势。枳壳、香橙和酸橘3种砧木沃柑果实的固酸比变化规律相似，均表现为7—10月较稳定，且处于较低水平，11月—次年4月逐渐升高，4月均达最高值，分别为36.48、40.60和42.82；其中，香橙砧沃柑果实的固酸比在2月和3月稍有降低。3种砧木中，7月—次年1月香橙砧沃柑果实的固酸比最高；2—4月酸橘砧沃柑果实的固酸比最高，但不同砧木之间差异不显著。

2.5沃柑果实发育过程中糖酸含量及其他指标间的相关分析结果

对沃柑果实18个品质指标进行相关分析，结果（图5）表明，可溶性固形物、果糖、葡萄糖、蔗糖、总可溶性糖、甜度值、固酸比和甜酸比两两指标间呈极显著正相关（r<0.01，下同），可滴定酸、柠檬酸和总有机酸两两指标间也呈极显著正相关。此外，可溶性固形物还与酒石酸和苯甲酸呈极显著正相关，与可滴定酸、柠檬酸、总有机酸和麦芽糖呈极显著负相关；可滴定酸还与麦芽糖呈极显著正相关，与苯甲酸、果糖、葡萄糖、蔗糖、总可溶性糖、甜度值、固酸比和甜酸比呈极显著负相关。Vc与果糖、蔗糖、总可溶性糖、莽草酸和甜度值呈极显著正相关，与麦芽糖和总有机酸呈极显著负相关。蔗糖与麦芽糖、柠檬酸和总有机酸呈极显著负相关。柠檬酸与麦芽糖呈极显著正相关，与苯甲酸、果糖、葡萄糖、蔗糖、总可溶性糖、甜度值、固酸比和甜酸比呈极显著负相关，但与苹果酸、琥珀酸和莽草酸无显著相关性。琥珀酸、苹果酸与大多数品质指标间无显著相关性。由此说明，各指标间存在不同程度的相关性。

2.6不同砧木沃柑果实品质指标的PCA结果

由表1可知，PCA得到的前3个主成分特征值均大于1，且累计方差贡献率达83.691%，说明这3个主成分能反映18个指标的绝大部分信息，因此选取前3个主成分信息进行后续分析计算。第一主成分（PC1）的方差贡献率达62.574%，特征值为11.263，主要代表可溶性固形物、可滴定酸、蔗糖、葡萄糖、果糖、总可溶性糖、柠檬酸、总有机酸、甜度值、甜酸比和固酸比，这些指标在品质综合评价中起主导作用。第二主成分（PC2）的方差贡献率为14.557%，特征值为2.620，主要代表苹果酸和莽草酸，反映果实酸味。第三主成分（PC3）的方差贡献率为6.560%，特征值为1.181，载荷值较大的为琥珀酸。

利用PCA中的3个主成分进行沃柑果实品质综合评价。将表1中指标的各主成分载荷除以各主成分特征值的平方根作为特征向量，以特征向量为权重建立综合评价模型：F=0.748F1+0.174F2+0.078F3（F表示综合得分，F1、F2和F3分别表示PC1、PC2和PC3得分），获得不同砧木沃柑果实在各个生长月份的综合得分，可反映果实综合品质高低。以果实发育期为横坐标、综合得分为纵坐标进行绘图，由图6可知，随着沃柑果实发育成熟，果实综合得分逐渐升高，果实综合品质逐渐提高。在3种砧木果实的所有发育期内，以4月枳壳砧沃柑果实的综合得分最高，品质最佳；3月酸橘砧沃柑排名第二，4月酸橘砧沃柑排名第三，3月枳壳砧沃柑排名第四。在整个果实发育期，枳壳砧和香橙砧沃柑果实的综合品质均在4月最高，酸橘砧沃柑果实的综合品质在3月最高。3种砧木中，11—12月枳壳砧沃柑果实的综合得分最高，香橙砧次之，酸橘砧最低；1月香橙砧沃柑果实的综合得分最高，枳壳砧次之，酸橘砧最低；2月酸橘砧沃柑果实的综合得分最高，香橙砧次之，枳壳砧最低。3—4月枳壳砧和酸橘砧沃柑果实的综合得分较高，香橙砧沃柑最低。

3讨论

3.1沃柑果实发育过程中可溶性固形物、可滴定酸和Vc含量变化

沃柑果实的生长发育时期分为幼果期（4—6月）、膨大期（7—9月）、转色期（10—12月）、成熟期（1—2月）和成熟后期（3—4月），由于幼果期果实太小，果肉和果皮不易分离，因此本研究并未对幼果期样品进行采集。沃柑采收期长，在南宁地区，生产上沃柑采收时间一般从12月开始，一直持续到次年4月。可溶性固形物是糖、酸、果胶、Vc等可溶解于水的物质总称。本研究中可溶性固形物含量在沃柑果实发育过程中呈上升趋势，与林子桢（2023）报道桂林和南宁地区沃柑在11月—次年4月果实可溶性固形物含量的变化趋势一致。可溶性固形物含量的升高主要是由于成熟过程果实内可溶性糖的积累增加。相关分析结果也表明，可溶性固形物含量与果糖、葡萄糖、蔗糖、总可溶性糖之间呈极显著正相关。1—3月可溶性固形物含量偶有下降，可能与采样时期的降雨有关。可滴定酸含量的变化可表征果实的成熟度。本研究中7—9月沃柑果实的可滴定酸含量最高，随着果实发育成熟，可滴定酸含量逐渐下降，与莫健生等（2022）研究桂林沃柑在1月—次年5月果实可滴定酸含量的变化规律一致。可滴定酸含量的下降可能与果实成熟过程中有机酸的降解有关。相关分析结果也表明，可滴定酸含量与柠檬酸和总有机酸之间呈极显著正相关。Vc是评价果实抗氧化、抗衰老和新鲜程度的重要营养指标。Vc含量越高，表明果实抗氧化能力越强。本研究中随着沃柑果实发育成熟，Vc含量呈先升高后降低的变化趋势，在11月—次年2月含量较高，之后开始下降，与张念（2022）研究6种柚果实不同成熟期Vc含量的变化规律一致。果实发育后期Vc含量的下降可能与果实成熟后代谢活动降低，导致Vc的合成速率减慢有关。

3.2沃柑果实发育过程中可溶性糖各组分含量变化

糖的组成和含量差异形成了果实独特的口感和风味。果实中的碳水化合物主要包括可溶性糖和不可溶性糖，可溶性糖决定果实的甜味，淀粉等不可溶性糖在果实成熟过程中可转化为可溶性糖（田晓成等，2023）。高等植物果实中糖的积累主要来源于叶片的光合作用，叶片光合作用产生的蔗糖经韧皮部的长距离运输，卸载到果实中。在韧皮部卸载期间，蔗糖被酶解成果糖和葡萄糖（Ruan，2014）。本研究中，3种砧木沃柑果实中的可溶性糖主要为蔗糖、果糖和葡萄糖，其中蔗糖含量占总可溶性糖含量的比例最高，属于蔗糖积累型果实。蔗糖∶葡萄糖∶果糖平均为2.3∶1∶1，与林媚等（2021）的研究结果基本一致。在果实发育成熟过程中，蔗糖含量逐渐上升，主要是由于沃柑作为可溶性糖直接积累型果实，蔗糖的积累主要来自源叶的转运，果实细胞蔗糖合成能力较弱，但成熟期后伴随着细胞壁的裂解，蔗糖合成能力增强（田晓成等，2023）。果糖和葡萄糖作为蔗糖的酶解产物，其变化规律与蔗糖相似，也呈上升趋势。总可溶性糖主要由蔗糖、果糖和葡萄糖组成，所以其变化规律也表现为逐渐上升。相关分析结果也表明，蔗糖、果糖、葡萄糖和总可溶性糖两两指标间呈极显著正相关；麦芽糖含量变化与其他可溶性糖相反，呈下降趋势。相关分析结果还表明，麦芽糖与蔗糖、果糖、葡萄糖、总可溶性糖之间呈极显著负相关；主要是由于麦芽糖的来源与其他可溶性糖不同。麦芽糖是淀粉水解产物，而沃柑作为可溶性糖直接积累型果实，淀粉合成能力弱，仅在果实生长发育早期有少量淀粉积累，随着果实发育成熟，早期积累的淀粉逐渐消耗，所以麦芽糖的产生逐渐减少（田晓成等，2023）。

3.3沃柑果实发育过程中有机酸各组分含量变化

有机酸含量直接影响果实口感及消费者的认可度。果实中有机酸有2个来源，一是果实自身合成或转化，二是从根和叶中运输到果实（卢晓鹏等，2018）。通常有机酸在果实发育早期积累，在成熟过程则作为糖酵解、三羧酸循环等呼吸基质，以及糖原异生基质而被消耗（陈发兴等，2005）。本研究中3种砧木沃柑果实中的有机酸主要为柠檬酸，是典型的柠檬酸型果实，与前人研究结果（Wu et al.，2021）基本一致。相关分析结果也表明，在所有有机酸组分中，只有柠檬酸含量与总有机酸含量呈极显著正相关。在沃柑果实发育成熟过程中，总有机酸和柠檬酸含量均呈下降趋势，说明柠檬酸的代谢水平决定总有机酸的代谢水平，与文涛等（2001）、公旭晨（2022）研究脐橙果实发育过程中总有机酸、柠檬酸的变化规律一致，其研究认为幼果期至果实膨大期是有机酸的合成期，果实膨大中期至成熟期是有机酸转化降解期，其含量急剧下降，成熟后期的有机酸含量逐渐趋于平稳。柠檬酸的降解不仅参与糖代谢，还参与氨基酸代谢（赵淼等，2008）。沃柑果实的苹果酸含量在7—9月快速下降，12月后逐渐回升，与顾建芹（2007）研究暗柳橙果实发育过程中苹果酸的变化规律相似。苹果酸和柠檬酸在柑橘果汁细胞液泡膜上共享同一个通道，苹果酸能强烈抑制柠檬酸离子通道运输，但对依赖三磷酸腺苷的柠檬酸转运影响不大（Ratajczaket al.，2003），可能是苹果酸和柠檬酸变化趋势不同的原因。相关分析结果也表明，苹果酸与柠檬酸、总有机酸之间无显著相关性。酒石酸是抗坏血酸的产物，同等浓度下酸味为柠檬酸的1.2～1.3倍。由于酒石酸无法通过呼吸作用被细胞代谢，所以在果实发育过程中保持相对稳定（朱磊等，2022）。

3.4沃柑果实发育过程中甜度值、甜酸比和固酸比的变化

甜酸比和固酸比是与果实品质相关的重要参数，可直观反映果实的甜酸风味。由于可溶性固形物不仅包括糖，还包含一些不产生甜味的氨基酸、有机酸、维生素等，所以固酸比在一定程度上放大了甜味和酸味物质之间的比例；甜酸比引入了不同糖组分中甜味系数，更客观地模拟人的真实口感（徐子媛等，2022），尤其是当蔗糖、果糖和葡萄糖含量差异较大时，甜酸比和固酸比之间的差异更明显。本研究中，随着沃柑果实发育成熟，甜度值、甜酸比和固酸比均呈上升趋势，在3月或4月达最高值，果实风味由酸甜变为浓甜，此时风味最为浓郁，与闵华等（2022）研究不同发育期南丰蜜桔果实中糖酸比的变化规律一致。相关分析结果也表明，甜度值、甜酸比和固酸比两两指标间呈极显著正相关。3种砧木中，11—12月枳壳砧沃柑果实的甜酸比最高，香橙砧沃柑果实的固酸比最高；1月香橙砧沃柑果实的甜酸比和固酸比均高于其他2种砧木；2—4月枳壳砧沃柑果实的甜酸比最高，酸橘砧沃柑果实的固酸比最高。可见，采用甜酸比和固酸比对不同砧木沃柑果实进行评价的结果存在差异。林媚等（2021）研究发现，采用固酸比评价不同柑橘品种与采用甜酸比评价的结果差异较大，并认为固酸比指标较为粗略，甜酸比更适合用于水果品质评价研究。但甜酸比数值的获得需依靠实验室检测，无法实时作出判断；而固酸比操作简单，更适合在田间进行现场评价。

3.5不同砧木沃柑果实品质差异

根据NY/T 716—2003《柑橘采摘技术规范》对果实采摘成熟度的要求：可溶性固形物含量≥8.5%，可滴定酸含量≤1.0%，固酸比≥8，本研究中枳壳砧沃柑果实的适宜采收期为12月—次年4月，香橙砧和酸橘砧沃柑果实的适宜采收期为11月—次年4月。本研究中，不同砧木沃柑果实在3—4月的综合品质高于1—2月。其中，枳壳砧和香橙砧沃柑果实最佳采收期为4月，酸橘砧沃柑果实最佳采收期为3月，与莫健生等（2022）研究得出沃柑适宜采收期为2月下旬至4月上旬的结果基本一致。3种砧木沃柑在各月份的综合品质存在差异。12月枳壳砧沃柑果实的综合品质最高，因此12月采收可选择枳壳砧沃柑。1月香橙砧沃柑果实的综合品质最高，2月酸橘砧沃柑果实的综合品质最高，因此1—2月采收可选择香橙砧或酸橘砧沃柑。3—4月枳壳砧和酸橘砧沃柑果实的综合品质高于香橙砧沃柑，因此3—4月采收可选择枳壳砧或酸橘砧沃柑。在南宁地区，刘要鑫等（2023）的研究结果表明，枳砧沃柑果实的Vc、可溶性固形物和总糖含量jw5xrm3yGNl3f3Sv8iB6p0TW8SiKw5gDUGWFqS1f4J4=及固酸比高于香橙砧沃柑；但苏美玲（2019）的研究结果表明香橙砧沃柑果实的可溶性固形物、可溶性糖和Vc含量高于枳壳砧和酸橘砧沃柑。在桂林地区，张社南等（2022a）研究认为枳砧沃柑果实的品质高于酸橘砧和香橙砧沃柑；张丹等（2022）则认为枳壳砧和香橙砧沃柑果实的品质优于酸橘砧沃柑。这些研究结果的差异可能与沃柑树龄有关。研究表明，枳砧沃柑在初果期各项果实指标含量均高于酸橘砧和香橙砧沃柑，但进入盛果期后，3种砧木沃柑的生理指标差异不显著（刘要鑫等，2019）。此外，不同砧木果实品质之间的差异还可能与不同种植区域的环境差异以及不同的果树栽培管理技术有关。

4结论

3种砧木沃柑在果实发育过程中糖酸组分含量存在差异，但整体变化趋势较一致。不同砧木沃柑果实在3—4月的综合品质高于1—2月。在广西地区，沃柑12月采收宜选择枳壳砧沃柑，1—2月采收宜选择香橙砧或酸橘砧沃柑，3—4月采收宜选择枳壳砧或酸橘砧沃柑。

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（责任编辑罗丽）