彩色多普勒超声联合miR-222、miR-21对老年退行性心脏瓣膜病的诊断价值

魏青 叶日兰

【摘要】 目的：探究彩色多普勒超声联合微小RNA-222（miR-222）、微小RNA-21（miR-21）对老年退行性心脏瓣膜病的诊断价值。方法：选取2022年6月—2023年6月因不适（心悸、发力、胸痛等）在龙南市第一人民医院检查的患者100例作为研究组，以临床综合诊断为金标准，将其中确诊为老年退行性心脏瓣膜病的58例患者作为心脏瓣膜病组，并选取同时期在本院体检的健康志愿者90例作为正常组。所有患者行彩色多普勒超声检查，并检测miR-222、miR-21表达量。比较心脏瓣膜病组与正常组，以及不同严重程度瓣膜功能障碍患者miR-222、miR-21表达量，分析彩色多普勒超声、miR-222、miR-21联合诊断老年退行性心脏瓣膜病的价值。结果：彩色多普勒超声对老年退行性心脏瓣膜病的诊断准确度为84.00%（84/100），敏感度为82.76%（48/58），特异度为85.71%（36/42）。与正常组相比，心脏瓣膜病组miR-222、miR-21表达量均明显更高（P<0.05）。重度瓣膜功能障碍患者miR-222、miR-21表达量均明显高于轻度、中度患者，中度患者miR-222、miR-21表达量均高于轻度患者（P<0.05）。受试者操作特征（ROC）曲线分析显示，三项联合对老年退行性心脏瓣膜病诊断的曲线下面积（AUC）高于单项。结论：miR-222、miR-21在老年退行性心脏瓣膜病中表达水平较高，且随着病情严重程度的增加，miR-222、miR-21表达水平逐渐升高，联合检查彩色多普勒超声、miR-222、miR-21，具有较高诊断价值，可用于老年退行性心脏瓣膜病的临床诊断。

【关键词】 彩色多普勒超声 微小RNA-222 微小RNA-21 老年退行性心脏瓣膜病

Diagnostic Value of Color Doppler Ultrasound Combined with miR-222 and miR-21 in Senile Degenerative Heart Valvular Disease/WEI Qing， YE Rilan. //Medical Innovation of China， 2024， 21（14）： 124-128

[Abstract] Objective： To explore the diagnostic value of color Doppler ultrasound combined with microRNA-222 （miR-222） and microRNA-21 （miR-21） in senile degenerative heart valvular disease. Method： A total of 100 patients who were examined in Longnan First People's Hospital from June 2022 to June 2023 due to discomfort （palpitation， force， chest pain， etc.） were selected as the study group， taking comprehensive clinical diagnosis as the gold standard， 58 patients diagnosed with senile degenerative heart valvular disease were selected as the valvular heart disease group. In addition， 90 healthy volunteers who underwent physical examination in our hospital during the same period were selected as the normal group. All patients underwent color Doppler ultrasonography and the expression levels of miR-222 and miR-21 were detected. The expression levels of miR-222

and miR-21 were compared between the valvular heart disease group and the normal group and patients with different severity of valvular dysfunction. The value of combination of color Doppler ultrasound， miR-222 and miR-21

in the diagnosis of senile degenerative heart valvular disease were analyzed. Result： The diagnostic accuracy， sensitivity and specificity of color Doppler ultrasound for senile degenerative heart valvular disease were 84.00% （84/100）， 82.76% （48/58） and 85.71% （36/42） respectively. Compared with the normal group， the expression levels of miR-222 and miR-21 in the heart valvular disease group were significantly higher （P<0.05）. The expression levels of miR-222 and miR-21 in patients with severe valvular dysfunction were significantly higher than those in mild and moderate patients， the expression levels of miR-222 and miR-21 in patients with moderate valvular dysfunction were significantly higher than those in mild and moderate patients （P<0.05）. Receiver operating characteristics （ROC） curve analysis showed that the area under the curve （AUC） of the three combinations for the diagnosis of senile degenerative heart valvular disease was higher than that of the single diagnosis. Conclusion： The expression levels of miR-222 and miR-21 are high in senile degenerative heart valvular disease， and the expression levels of miR-222

and miR-21 gradually increase with the severity of the disease. The combined examination of color Doppler ultrasound， miR-222 and miR-21 have high diagnostic value and can be used in the clinical diagnosis of senile degenerative heart valvular disease.

[Key words] Color Doppler ultrasound microRNA-222 microRNA-21 Senile degenerative heart valvular disease

First-author's address： Department of Ultrasound， Longnan First People's Hospital， Longnan 341700， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2024.14.030

老年退行性心脏瓣膜病是心脏瓣膜结缔组织退行性变、纤维化和钙化引起的疾病，这些病理改变导致瓣膜及其支架功能异常[1]。临床上，此病多表现为钙化性主动脉瓣狭窄、二尖瓣环钙化和二尖瓣脱垂症[2]。患者可有心悸、乏力和胸痛等症状，在病情晚期症状严重而紧急[3]。鉴于早期症状可能不甚明显，且症状无特异性，准确的临床诊断对于改善患者的生存质量和预后至关重要。彩色多普勒超声作为非侵入性的诊断工具，能有效展示瓣膜的运动功能及其结构异常[4]。然而，单一使用彩色多普勒超声在某些情况下难以对微小病变进行准确诊断。微小RNA-222（miR-222）、微小RNA-21

（miR-21）的检测为诊断提供了分子生物学层面的支持，这两种微小RNA的异常表达与瓣膜纤维化和钙化过程密切相关，可作为早期生物标志物来辅助诊断[5]。然而，目前关于miR-222和miR-21在老年退行性心脏瓣膜病中具体角色和机制的研究仍不充分，故本研究旨在探讨彩色多普勒超声结合miR-222、miR-21在老年退行性心脏瓣膜病诊断中的综合效能和潜在价值，以期进一步改善患者的管理和预后。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2022年6月—2023年6月因不适（心悸、发力、胸痛等）在龙南市第一人民医院检查的患者100例作为研究组，选取同时期在本院体检的健康志愿者90例作为正常组。纳入标准：年龄>60岁；正常组无心脏疾病。排除标准：意识不清、精神异常；合并肝、肾、脾等器质性疾病；有先天性心脏瓣膜病、感染性心内膜炎、胶原病导致的心脏瓣膜病变。本研究经本院医学伦理委员会批准，患者和家属均知情同意本次研究。

1.2 方法

1.2.1 临床综合诊断 参考文献[6]《心血管病诊疗标准》，患者可有乏力、呼吸困难、胸痛等症状，听诊有心脏杂音，经食道超声心动图检查示存在典型的心脏瓣膜及瓣环钙化现象，有局限性致密强回声，瓣膜边缘规则、活动度降低。

1.2.2 彩色多普勒超声检查 采用超声诊断仪对所有研究对象进行检查，设置探头频率为2.5～5.0 MHz，对患者心脏进行多个切面检查。（1）诊断标准：二尖瓣环钙化，回声增强，瓣环根部瓣膜、二尖瓣瓣膜增厚3 mm及以上，瓣膜活动受到限制；主动脉瓣环钙化：瓣环处出现斑块，且根部产生回声，反射速度增加；主动脉瓣钙化，瓣膜回声增加且瓣膜僵硬，厚度为3 mm以上，瓣膜启闭受到影响；主动脉瓣狭窄，主动脉瓣前向血流变快，收缩期最大幅度<16 mm。联合瓣膜病，累及两个及以上瓣膜病变。（2）瓣膜功能障碍严重程度：反流程度=反流束起始处宽度/左心室流出道宽度，轻度，主动脉<20%或二尖瓣≤1/3左心房；中度，主动脉20%～40%或二尖瓣为1/3～2/3左心房；重度，主动脉>40%或二尖瓣>2/3左心房。

1.2.3 miR-222、miR-21表达量检测 抽取患者静脉血4 mL，离心处理（3 000 r/min，10 min），留取上层清液，-60 ℃保存，待检。采用ELISA法检测血清中miR-222、miR-21水平：将miR-222、miR-21标准品稀释，倒入EP管，混匀，后将其倒入空白孔中，室温下孵育90 min，在孔中加入洗涤缓冲液，重复清洗，后加入50 ?L miR-222、miR-21抗体，室温下孵育60 min，加入洗涤缓冲液，重复清洗，加入100 ?L 链霉亲和素蛋白结合液，封孔，室温下孵育45 min，加入洗涤缓冲液，重复清洗，后加入100 ?L四甲基联苯胺显色液，450 mm、570 mm下测定OD值，测出miR-222、miR-21水平。

1.3 统计学处理

采用SPSS 20.0软件进行数据处理。计量资料用（x±s）进行描述，组间比较采用独立样本t检验；计数资料用率（%）进行描述，组间比较采用字2检验；采用受试者操作特征（ROC）曲线评价彩色多普勒超声、miR-222、miR-21对老年退行性心脏瓣膜病的诊断价值。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组基线资料比较

研究组男53例，女47例；平均年龄（67.92±7.73）岁。正常组男56例，女34例，平均年龄（67.45±7.38）岁。两组基线资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 影像学特征

彩色多普勒超声检查显示：图1A，左室长轴切面示二尖瓣后瓣环及主动脉瓣钙化；图1B，心尖五腔切面示主动脉瓣钙化；图1C，大动脉短轴切面示主动脉瓣钙化；图1D，心尖五腔切面示主动脉瓣及二尖瓣钙化。

2.3 彩色多普勒超声对老年退行性心脏瓣膜病的诊断结果

以临床综合诊断为金标准，彩色多普勒超声对老年退行性心脏瓣膜病的诊断准确度为84.00%（84/100），敏感度为82.76%（48/58），特异度为85.71%（36/42）。见表1。

2.4 心脏瓣膜病组与正常组miR-222、miR-21表达量比较

将研究组中诊断为老年退行性心脏瓣膜病的58例患者作为心脏瓣膜病组。与正常组相比，心脏瓣膜病组miR-222、miR-21表达量均明显更高，差异均有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.5 不同严重程度瓣膜功能障碍患者miR-222、miR-21表达量比较

重度瓣膜功能障碍患者miR-222、miR-21表达量均明显高于轻度、中度患者，中度患者的miR-222、miR-21表达量均高于轻度患者，差异均有统计学意义（P<0.05），见表3。

2.6 彩色多普勒超声、miR-222、miR-21对老年退行性心脏瓣膜病的诊断价值分析

ROC曲线分析显示，三项联合对老年退行性心脏瓣膜病诊断的AUC为0.982，高于单项检测，见表4、图2。

3 讨论

老年退行性心脏瓣膜病可能引发诸如心悸、乏力和疲劳等临床症状，在病情进展至较严重阶段时，患者可能会出现晕厥、呼吸困难、心绞痛，甚至心力衰竭和猝死[7]。在临床检查中，通过评估心脏杂音的响度，可将病情分为轻度、中度和重度[8]。老年退行性心脏瓣膜病治疗不及时，可导致病情恶化，影响患者预后，故临床需早期进行诊断，制订有效的防治措施[9-10]。本文通过评估彩色多普勒超声联合miR-222、miR-21对老年退行性心脏瓣膜病的诊断价值，希望为临床提供更多参考依据。

采用彩色多普勒超声检查，可清楚显示出老年退行性心脏瓣膜病患者血流情况，并可观察到患者瓣膜钙化程度、部位，在临床诊断、治疗中发挥较大作用[11-12]。本研究结果显示，彩色多普勒超声对老年退行性心脏瓣膜病的诊断准确度为84.00%（84/100），敏感度为82.76%（48/58），特异度为85.71%（36/42），具有较高的准确度，因为此技术可以详细显示心脏瓣膜及其周围结构的形态学改变，如钙化。研究指出，钙化是老年退行性心脏瓣膜病的典型特征，由瓣膜细胞的功能异常、慢性炎症反应和钙盐沉积引起，导致瓣膜刚性增加、运动受限等情况[13]。此外，彩色多普勒超声能够通过检测这些结构变化来诊断瓣膜病，如在左室长轴切面、心尖五腔切面和大动脉短轴切面显示的二尖瓣和主动脉瓣钙化[14-15]。

也有研究表明，老年退行性心脏瓣膜病的发生与发展可能与miR-222有关，miR-222在心脏瓣膜组织中的表达变化可能影响炎症途径，从而促进心脏瓣膜的退行性改变[16]。此外，miR-21能通过调节Bcl-2蛋白表达，促进心脏纤维化进程，进一步促进纤维化和瓣膜结构的病理性改变。研究发现，在心脏瓣膜病引起的心力衰竭患者中，miR-21的表达呈现上升趋势，这可能与miR-21抑制程序性细胞死亡蛋白4的表达有关[17]。本研究结果显示，与对照组相比，心脏瓣膜病组miR-21的表达量明显升高，这一结果提示血清miR-21可能对心脏瓣膜病患者中的心力衰竭存在诊断价值。也有研究显示，在风湿性心脏瓣膜病合并持久性房颤的患者中，心房组织内miR-21的表达量呈现逐渐上升的趋势。可能是miR-21通过调节心脏组织中的胶原合成与降解，引发了心脏瓣膜病和心房颤动相关病理过程[18-19]。本研究中，重度瓣膜功能障碍患者的miR-222、miR-21水平均高于轻度和中度患者，进一步说明miR-222和miR-21参与调节心脏细胞的增殖、纤维化及炎症反应的过程，在心脏瓣膜的结构重构和瓣膜钙化中扮演了重要角色。在重度患者中，心脏瓣膜的病理变化更为显著，这可能导致miR-222和miR-21的表达更为活跃，以应对病变带来的细胞环境变化。因此，这些微小RNA的水平变化不仅能反映疾病的严重程度，还可能成为评估病情进展和治疗反应的潜在生物标志物。ROC曲线分析显示，彩色多普勒超声、miR-222、miR-21三项联合对老年退行性心脏瓣膜病诊断的AUC高于单项，说明联合这些检测手段可以更有效地识别和评估患者的病情。彩色多普勒超声提供关于心脏结构和功能的直接视觉信息，而miR-222和miR-21作为生物分子标志物，反映了疾病的分子和细胞层面变化。这种多模态诊断策略通过结合形态学与分子生物学信息，可以增强对疾病状态的理解，提高诊断的敏感度和特异度。因此，采用这种综合诊断方法不仅可以在早期更准确地诊断出疾病，还有助于监测病情进展和评估治疗效果，从而为患者制订个性化的治疗方案，优化治疗结果。

综上所述，老年退行性心脏瓣膜病采用彩色多普勒超声、miR-222、miR-21诊断，具有较高的价值，有着较好的效果，值得在临床中推广应用。

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（收稿日期：2023-12-02） （本文编辑：陈韵）