急性心肌梗死病人血清circCDYL表达与预后的关系

朱小琴 邓仁生

摘要目的：检测急性心肌梗死（AMI）病人血清环状RNACDYL（circCDYL）表达水平，探讨其与预后的关系。方法：选取2018年1月—2020年6月恩施土家族苗族自治州中心医院收治的108例AMI病人作为AMI组，另选取同期健康体检志愿者110名作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRTPCR）法检测受试者血清circCDYL表达水平。随访2年，根据circCDYL表达水平分为低表达组（53例）和高表达组（55例），比较两组随访期间主要不良心血管事件（MACE）发生情况，采用KaplanMeier生存曲线分析血清circCDYL与AMI病人总MACE发生率的关系；根据随访期间预后情况分为MACE组（48例）和非MACE组（60例），采用Logistic回归分析AMI病人预后的影响因素；采用受试者工作特征（ROC）曲线评估血清circCDYL对AMI病人预后的预测价值。结果：AMI组血清circCDYL表达水平明显低于对照组（P＜0.05）。circCDYL低表达组恶性心律失常发生率、心肌梗死复发率明显高于高表达组（P＜0.05）。KaplanMeier生存曲线分析显示，circCDYL低表达组总MACE发生率明显高于circCDYL高表达组（χ2＝17.732，P＜0.001）。多因素Logistic回归分析表明，circCDYL是AMI病人预后的独立保护因素（P＜0.05）。ROC曲线结果显示，血清circCDYL预测AMI病人不良预后的曲线下面积（AUC）为0.855，敏感度为93.8%。结论：AMI病人血清circCDYL表达水平降低，与AMI病人MACE密切相关，对AMI病人预后具有较高的预测价值。

关键词急性心肌梗死；环状RNACDYL；主要不良心血管事件；预后

doi：10.12102/j.issn.16721349.2024.06.026

急性心肌梗死（acutemyocardialinfarction，AMI）是冠状动脉粥样硬化斑块破裂后形成血栓阻塞血管引发的心肌缺血性坏死［12］。随着医疗技术的不断进步，临床对于AMI的治疗手段得到充分改善，但其总体死亡率依然呈不断升高的趋势［3］。经皮冠状动脉介入（PCI）是AMI的主要治疗手段，有助于解除血管内部狭窄，恢复血流，但部分病人接受PCI后发生主要不良心血管事件（MACE），预后情况较差［4］。环状RNA（circRNAs）是一种闭合环状结构的内源性非编码RNA，在疾病中发挥重要的调控作用。Wu等［5］分析出多个在AMI中异常表达的circRNA。circCDYL有助于维持心肌细胞的正常发育［6］。一项与心肌梗死相关的动物实验证实circCDYL能够促进心肌梗死模型小鼠的心肌细胞再生［7］，由此推测circCDYL在AMI病人中也呈现异常表达。本研究通过检测AMI病人血清circCDYL表达水平，探讨血清circCDYL表达与AMI病人PCI术后MACE发生的关系及对预后评估的临床价值。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2018年1月—2020年6月我院收治的108例AMI病人作为AMI组，男70例，女38例；年龄42～75（60.50±7.80）岁；体质指数（BMI）为（23.08±3.29）kg/m2。另选取同期健康体检志愿者110名作为对照组，男65名，女45名；年龄41～74（60.90±8.01）岁；

BMI为（22.78±3.30）kg/m2。两组性别、年龄、BMI比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。本研究获得本院伦理委员会批准，受试者及其家属对本研究知情同意并签署知情同意书。

1.2纳入标准

1）AMI病人符合《急性ST段抬高型心肌梗死诊断和治疗指南》［8］中急性ST段抬高型心肌梗死（STEMI）或《不稳定性心绞痛和非ST段抬高心肌梗死诊断与治疗指南》［9］中急性非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI）的诊断标准，并经相关检查确诊；2）首次发病；3）入院后及时接受PCI手术治疗；4）临床资料完整。

1.3排除标准

1）患有先天性心脏病、风湿性心脏病等其他类型心脏病病人；2）合并肿瘤、感染性疾病、自身免疫缺陷病病人；3）既往接受过PCI手术或冠状动脉搭桥治疗病人；4）不符合PCI手术指征病人；5）肝肾等重要器官严重功能障碍病人。

1.4方法

1.4.1一般资料收集

病人入院后，收集病人一般资料，包括年龄、性别、BMI、吸烟、高血压、高脂血症、糖尿病、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）、血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、白细胞计数（WBC）、肌酸激酶同工酶（CKMB）、心肌肌钙蛋白I（cTnI）、D二聚体（DD）、心肌梗死类型、Killip分级。

1.4.2样本收集

收集AMI病人入院时及健康体检志愿者体检当日肘静脉血5mL，4℃下3000r/min离心15min，分离血清，储存于－80℃冰箱冷冻待测。

1.4.3实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（qRTPCR）法检测血清circCDYL表达水平

使用TRIzol试剂（15596026，赛默飞世尔科技公司）提取各组血清中总RNA，使用NanoDropND12000分光光度计（美国Thermo公司）评估总RNA浓度和纯度。使用反转录试剂盒（RRO47AA，日本Takara公司）反转录成cDNA，使用SYBRGreenRealtimePCRMasterMix（QPK201，北京索莱宝科技有限公司）、qRTPCR仪（CFX384，美国BioRad公司）扩增cDNA，采集循环阈值（CT值）。扩增条件：94℃预变性30s，94℃变性5s，60℃退火15s，72℃延伸10s，扩增45个循环。以甘油醛3磷酸脱氢酶（GAPDH）为内参，引物序列：circCDYL正向引物序列为5′CTTAGCTGTTAACGGGAAA3′，反向引物序列为5′CTGTTGAAGTCGTGGATGT3′；GAPDH正向引物序列为5′ACAACTTTGGTATCGTGGAAGG3′，反向引物序列为5′GCCATCACGCCACAGTTTC3′。引物由生工生物工程（上海）股份有限公司提供。采用2－ΔΔCt方法计算circCDYL的表达量。

1.4.4随访

AMI病人接受PCI术后以电话或门诊复查的方式进行随访，第1年每2个月进行1次随访，之后每6个月进行1次随访，随访时间为24个月。病人发生恶性心律失常、心力衰竭、心源性死亡、复发心肌梗死等MACE情况定义为预后不良，病人出现预后不良事件为终点时间。本研究随访截至2022年6月。随访期间未出现失访病例，随访率100%。根据AMI病人预后情况分为MACE组（48例）、非MACE组（60例）。

1.5统计学处理

采用SPSS25.0软件分析数据。符合正态分布的定量资料以均数±标准差（x±s）表示，两组比较采用t检验；定性资料采用χ2检验。KaplanMeier生存曲线分析血清circCDYL表达水平与AMI病人总MACE发生率的关系；Logistic回归分析AMI病人预后的影响因素；受试者工作特征（ROC）曲线评价血清circCDYL对AMI病人预后的预测价值。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1AMI组、对照组血清circCDYL表达水平比较

AMI组血清circCDYL表达水平明显低于对照组（P＜0.05）。详见表1。

2.2circCDYL高、低表达组病人MACE发生情况比较及circCDYL表达水平与AMI病人总MACE发生率的关系

以circCDYL表达水平平均值0.68将AMI组分为低表达组（＜0.68，53例）、高表达组（≥0.68，55例）。低表达组发生MACE共35例，高表达组发生MACE共13例。两组心力衰竭、心源性死亡发生率比较差异无统计学意义（P＞0.05），低表达组恶性心律失常、心肌梗死复发率高于高表达组（P＜0.05）。KaplanMeier生存曲线分析显示，circCDYL低表达组总MACE发生率高于circCDYL高表达组（χ2＝17.732，P＜0.001）。详见表2、图1。

2.3不同预后病人临床资料比较

MACE组、非MACE组年龄、性别、BMI、吸烟、高血压、高脂血症、糖尿病、TC、TG、HDLC、LDLC、Scr、BUN、心肌梗死类型比较差异均无统计学意义（P＞0.05），MACE组WBC、CKMB、cTnI、DD水平及Killip≥3级比例高于非MACE组（P＜0.05），circCDYL表达水平低于非MACE组（P＜0.05）。详见表3。

2.4AMI病人预后影响因素的Logistic回归分析

以病人预后情况（发生MACE＝1，未发生MACE＝0）为因变量，以表3中具有统计学意义的指标为自变量，进行Logistic回归分析。单因素Logistic回归分析结果表明，WBC、CKMB、cTnI、Killip分级（≥3级）、circCDYL是AMI预后的影响因素（P＜0.05）；多因素Logistic回归分析结果表明，Killip分级（≥3级）是AMI预后情况的独立危险因素（P＜0.05），circCDYL是AMI预后情况的独立保护因素（P＜0.05）。详见表4。

2.5血清circCDYL对AMI病人预后的预测价值

ROC曲线结果显示，血清circCDYL预测AMI病人不良预后的曲线下面积（AUC）为0.855，95%CI（0.783，0.926），截断值为0.742，敏感度为93.8%，特异度为68.3%，约登指数为0.621。详见图2。

3讨论

中国等发展中国家与AMI相关的死亡病人占全球缺血性心脏病死亡病人的80%以上［10］。AMI病情进展迅速，往往因送医不及时延误救治，严重者造成死亡，而得以存活的病人往往面临着预后发生MACE的情况。临床急需寻找一种能够有效预测病人MACE发生的生物标志物以帮助临床对症治疗并采取干预措施改善预后。

circRNA不受RNA外切酶的影响，表达更稳定且不易发生降解，在真核生物中分布广泛，可以充当miRNA或与RNA结合蛋白（RBP）结合发挥作用［11］。研究表明，多种circRNA在AMI发生发展过程中发挥着重要作用［1214］。本研究中，AMI病人血清circCDYL表达水平明显低于对照组，Zhang等［7］通过动物实验和细胞实验证实，circCDYL在AMI小鼠的心脏组织和心肌细胞中表达明显降低，提示circCDYL对AMI具有抑制作用。Siede等［6］通过RNA测序发现，circCDYL水平随着心肌细胞的发育过程逐渐升高，表明circCDYL对心肌细胞具有保护作用。研究表明，在梗死心肌中，circRNA能够海绵化miRNAs/RBP，形成circRNAmiRNA/RBP调控网络在心肌梗死中发挥不同作用［15］。circCDYL即是通过靶向miR47935p/淀粉样前体蛋白通路来促进AMI小鼠的心肌细胞增殖和心肌血管生成［6］。但其在AMI病人中是否通过相同的机制发挥作用需要进一步的研究。然而，通过查阅文献发现，circCDYL在不同疾病中所发挥的作用不同，在肾母细胞瘤组织中，circCDYL表达下调，在疾病中发挥抑制作用［16］，而在乳腺癌等相关癌症病人中表达上调，对疾病就有促进作用［17］，可能与不同疾病发病机制不同相关。

目前临床对于AMI最有效的治疗方法是及时进行PCI，以实现再灌注，但PCI术后容易出现的MACE也不能忽视。本研究中，AMI病人血清circCDYL低表达组心力衰竭、心源性死亡发生率与高表达组相比差异无统计学意义，低表达组恶性心律失常发生率、心肌梗死复发率明显高于高表达组，可能与AMI病人的个体差异具有一定的关系，KaplanMeier生存曲线分析显示，circCDYL低表达组总MACE发生率明显高于circCDYL高表达组，可能是由于血清circCDYL对心肌细胞具有保护作用，circCDYL低表达的AMI病人心肌细胞受损更严重，在PCI术后心肌受损的程度进一步加重，因此发生MACE的概率就更大。以发生MACE为预后不良，通过多因素Logistic回归分析发现，circCDYL是AMI病人预后的独立保护因素。ROC曲线显示，血清circCDYL对AMI病人不良预后具有较高的预测价值。同时本研究单因素Logistic回归分析发现，WBC、CKMB、cTnI水平、Killip分级与AMI病人的不良预后有关，临床可根据病人血清circCDYL表达水平，结合病人临床指标，对病人的预后及时做出判断并采取相应的干预措施，以改善病人预后情况。

综上所述，AMI病人血清circCDYL表达水平降低，与MACE的发生密切相关，是AMI病人预后的独立保护因素，对AMI病人不良预后具有较高的预测价值，有望成为AMI预后的生物标志物。但本研究并未对circCDYL在AMI中的具体作用机制进行研究，后续可结合已有的研究结果，从circCDYLmiR47935p/淀粉样前体蛋白通路进行更加深入的研究，同时查阅更多的最新研究成果进行深入探讨。

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（收稿日期：20220906）

（本文编辑郭怀印）

作者单位恩施土家族苗族自治州中心医院（湖北恩施445000）

通讯作者邓仁生，Email：335899120@qq.com

引用信息朱小琴，邓仁生.急性心肌梗死病人血清circCDYL表达与预后的关系［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2024，22（6）：10991103.