急性脑梗死病人血清miR-25表达水平及其对近期预后的预测价值

高丽 李文华 谷丽丽

作者单位 河南省直第三人民医院（郑州 450000），E-mail：gaoliqm1985@163.com

引用信息 高丽，李文华，谷丽丽.急性脑梗死病人血清miR-25表达水平及其对近期预后的预测价值［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2024，22（7）：1327-1330.

摘要 目的：探讨急性脑梗死病人血清miR-25表达及其对近期预后不良的预测价值。方法：将2020年5月—2022年1月本院收治的179例急性脑梗死病人设为研究组，另将同期在本院体检的163例健康体检者设为对照组，均行血清miR-25表达水平检测并对比。随访3个月，根據改良Rankin量表（mRS）评分将研究组分为预后良好组（mRS评分≤2分）和预后不良组（mRS评分＞2分），对比预后良好组与预后不良组血清miR-25表达水平。采用Logistic回归分析法分析急性脑梗死病人近期预后不良的影响因素；采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-25表达水平对急性脑梗死病人近期预后不良的预测价值。结果：研究组血清miR-25表达水平低于对照组（P＜0.05）。急性脑梗死病人近期预后不良的发生率为42.46%，预后不良组年龄、心房颤动比例、入院美国国立卫生院卒中量表（NIHSS）评分、梗死体积、发病至治疗时间、血清胱抑素C（CysC）水平均高于预后良好组，血清miR-25表达水平低于预后良好组（P＜0.05）。年龄、心房颤动、入院NIHSS评分、梗死体积、发病至治疗时间、血清CysC水平、血清miR-25表达水平均是急性脑梗死病人近期预后不良的影响因素（P＜0.05）。血清miR-25表达水平预测急性脑梗死病人近期预后不良的最佳截断值、敏感度、特异度、ROC曲线下面积（AUC）分别是0.640、72.37%、65.05%、0.731。结论：急性脑梗死病人血清miR-25表达水平降低，且为急性脑梗死病人近期预后不良的影响因素，对近期预后不良有一定的预测价值。

关键词 急性脑梗死；血清miR-25；预后不良；影响因素；预测价值

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.07.032

急性脑梗死是指因脑血流减少或中断所导致的脑组织缺血性坏死，临床多表现为头痛、头晕、吞咽困难、言语不清等症状，且随着病情的进一步发展，可引起偏瘫、意识障碍、呼吸骤停等，严重威胁着病人的生命安全［1］。急性脑梗死起病突然且病情进展较快，若不能及时诊治，则预后较差，后期病死率、致残率较高［2］。因此，寻找能有效预测急性脑梗死病人近期预后不良的相关指标以指导临床干预具有重要意义。微小RNA（miRNA）因其检测精准、不易降解的特点已作为多种疾病的生物标志物被广泛研究，既往报道显示，miR-409-3p、miR-133等miRNA已应用到急性脑梗死的相关研究中［3-4］。miR-25作为miRNA家族中的一员，已有研究证实，其在心脑血管中发挥着重要作用［5］。Guo等［6］研究发现缺血皮质中miR-25的增加能促进脑缺血后成人神经干细胞的增殖，提示miR-25能修复脑神经损伤；Kuang等［7］研究显示，miR-25能提高自噬通量，进而诱导临床脑卒中模型的神经保护。以上研究均表明，miR-25对脑损伤病人的神经功能有保护及修复的功能，但miR-25在急性脑梗死病人体内的表达情况及其对病人近期预后不良的预测效能相关研究较少。鉴于此，本研究选取179例急性脑梗死病人，通过检测血清miR-25表达水平，探讨其与急性脑梗死近期预后不良的关系，并分析其预测价值，以为临床预防急性脑梗死病人近期预后不良提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020年5月—2022年1月本院收治的179例急性脑梗死病人设为研究组，另选取同期在本院体检的163名健康体检者设为对照组。研究组，男102例，女77例；年龄42～78（64.92±9.26）岁。对照组，男85名，女78名；年龄38～76（63.15±8.75）岁。两组性别、年龄比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。研究组纳入标准：1）符合《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2018》［8］中的相关诊断标准：急性起病；一侧面部或肢体无力、语言障碍等局灶性神经功能缺损，少数表现为全面性神经功能缺损；入院后影像学检查显示责任病灶或症状/体征持续超过24 h；排除非血管性病因；头部CT/磁共振成像（MRI）排除脑出血；2）初次发作；3）于发病后24 h内就诊；4）病人知晓本研究并签署知情同意书。排除标准：1）合并有恶性肿瘤或心血管疾病；2）存在颅内感染、脑出血、颅内肿瘤等其他颅内疾病；3）存在严重的器官功能不全；4）入院前1周使用过抗凝药物；5）既往有意识障碍或精神病史；6）妊娠或哺乳期妇女。本研究经医院伦理委员会审批通过。

1.2 方法

1.2.1 一般资料收集

1）收集病人的年龄、吸烟史、饮酒史、高血压病史、心房颤动病史等资料，询问记录病人的发病至治疗时间，并在病人入院时行神经功能缺损［美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）］［9］评定：量表共11项评估项目，评分范围0～42分，分数越高表示神经功能受损越严重。2）根据病人的头部CT计算梗死体积：梗死体积＝长×宽×层数×π/6。3）抽取病人入院后第2天空腹静脉血5 mL，室温下静置30 min后用离心机离心，转速3 000 r/min，时间10 min，取上清液置于－20 ℃环境中低温保存待测，采用酶联免疫吸附法检测血清中的空腹血糖（FBG）、血肌酐（Scr）、胱抑素C（CysC）水平，试剂盒由上海机纯实业有限公司提供。

1.2.2 血清miR-25表达水平检测

采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）法检测两组受试者的血清miR-25表达水平。提取待测血清中的总RNA，测定RNA的浓度及纯度；反应体系：PrimeScript RT Enzyme Mix 1 μL，5×PrimeScript Buffer 7 μL，RNA模板6 μL，无RNA酶水2 μL，总反应体积25 μL，反应条件为40 ℃ 60 min，85 ℃ 4 min；以U6为内参，正向引物0.8 μL，反向引物0.8 μL，合成的cDNA为模板，反应体系为SYRR Green Mix 9 μL，cDNA模板2 μL，无RNA酶水7 μL，Rox Reference Dye 0.4 μL，反应总体积20 μL，反应条件为95 ℃ 10 min，95 ℃ 5 s，60 ℃ 60 s，共40个循环，进行聚合酶链反应。U6正向引物序列为5′-TGACTTACGTGTACTCCGTG-3′，反向引物序列为5′-GGCTAGCGTGCATAGGAGTC-3′；miR-25正向引物序列为5′-GCGGCACGTGATATCCCGTG-3′，反向引物序列为5′-CCGCTGATCACGTACATGCA-3′。采用2－△△CT法计算血清miR-25相对表达量。

1.2.3 研究方法

依据《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2018》中的治疗流程统一给予入院病人吸氧、心电监护、血压及血糖控制等基础治疗，并给予改善脑循环、降脂及神经保护等特异性治疗。于病人入院后90 d应用改良Rankin（mRS）量表［10］评价病人的预后情况，≤2分者纳入预后良好组，＞2分者纳入预后不良组。比较研究组与对照组、预后不良组与预后良好组血清miR-25表达水平。

1.3 统计学处理

采用SPSS 25.0软件进行统计分析。符合正态分布的定量资料以均数±标准差（x±s）描述，采用t检验进行统计分析；定性资料以例数、百分比（%）表示，采用χ2检验进行统计分析；采用Logistic多元回归分析急性脑梗死病人近期预后不良的影响因素；采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-25表达水平对急性脑梗死病人近期预后不良的预测价值。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 研究组与对照组血清miR-25表达水平比较

研究组血清miR-25表达水平低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。

表1 研究组与对照组血清miR-25表达水平比较（x±s）

组别样本量miR-25

研究组1790.64±0.05

对照组1630.88±0.12

注：两组比较，t＝－24.525，P＜0.05。

2.2 预后不良组与预后良好组一般资料及血清miR-25表达水平比较

179例急性脑梗死病人中，预后不良76例，发生率为42.46%。預后不良组年龄、心房颤动比例、入院NIHSS评分、梗死体积、发病至治疗时间、血清CysC水平均高于预后良好组，血清miR-25表达水平低于预后良好组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。详见表2。

2.3 急性脑梗死病人近期预后不良的影响因素

以年龄、性别、吸烟史、饮酒史、高血压、心房颤动、入院NIHSS评分、梗死体积、发病至治疗时间、FBG、CysC、Scr、miR-25为自变量，以近期预后不良为因变量，变量赋值见表3。Logistic回归分析结果显示：年龄、心房颤动、入院NIHSS评分、梗死体积、发病至治疗时间、血清CysC水平、血清miR-25表达水平均是急性脑梗死病人近期预后不良的影响因素（P＜0.05）。详见表4。

2.4 血清miR-25表达水平对急性脑梗死病人近期预后不良的预测价值

血清miR-25表达水平预测急性脑梗死病人近期预后不良的最佳截断值为0.640，敏感度为72.37%，特异度为65.05%，AUC为0.731［95%CI（0.659，0.794］。详见图1。

3 讨 论

近年来，随着生活习惯、社会环境等变化，急性脑梗死在40～80岁的中老年人群中呈高发状态。既往调查发现，急性脑梗死难以治愈且病情发展较快，若不及时诊治，病死率可达25%左右，且多数病人预后不良，致残率较高［11］。本研究中急性脑梗死病人近期预后不良的发生率为42.46%，与段庆希等［12］报道的41.67%相当，提示急性脑梗死病人近期预后不良比例较高，探讨其影响因素及相关预测因子十分必要。

本研究中，研究组血清miR-25表达水平低于对照组，提示急性脑梗死病人miR-25含量降低。miRNA是一类长度在21～25个核苷酸之间的非编码微小RNA，其通过控制转录和翻译参与了机体内几乎所有的生物过程，既往研究显示，miRNA在脑动脉的生理和病理调节中发挥着重要作用［13］，因此，miRNA可能为急性脑梗死的生物标志物。miR-25是常见的癌症相关调节因子，在胃癌、肺癌、食管癌、乳腺癌等多种癌症的发展中均起着促进作用［14］。miR-25在急性脑梗死中的作用机制尚不明确，但Cao等［15］通过体外实验，用大黄素升高了miR-25的表达水平，从而减弱了因缺氧引发的细胞损伤，推测miR-25对脑组织具有保护作用。此外，本研究发现预后不良组血清miR-25表达水平低于预后良好组，且经进一步Logistic回归分析发现，血清miR-25表达水平为急性脑梗死病人近期预后不良的影响因素。急性脑梗死预后不良主要为脑组织损伤所致，而Zhou等［16］研究报道，miR-25可通过抑制组蛋白去乙酰化酶3（HDAC3）和Ataxin-3（ATXN3）来预防脑卒中模型大鼠的神经元损伤并能促进神经功能恢复，所以miR-25有助于改善急性脑梗死病人预后。ROC曲线分析发现血清miR-25表达水平预测急性脑梗死病人近期预后不良的敏感度为72.37%，特异度为65.05%，AUC为0.731，提示血清miR-25表达水平对急性脑梗死病人近期预后不良具有一定的预测价值。因此，对于急性脑梗死病人，临床可采用生物标志物预测的方式对其病情进行监测，及时诊治，降低其预后不良的风险。

此外，本研究發现，年龄、心房颤动、入院NIHSS评分、梗死体积、发病至治疗时间、CysC均是急性脑梗死病人近期预后不良的影响因素。机体各项功能随着年龄的增加逐渐减退，使得病人在发生急性脑梗死后恢复所需时间更长且预后较差。心房颤动易产生房内血栓，血栓通过血液循环进入脑血管造成血管阻塞，发生脑梗死，既往调查显示，心房颤动病史的人群发生急性脑梗死的概率更高且易复发［17］。NIHSS评分能反映急性脑梗死病人神经功能的受损程度，NIHSS评分越高，说明受损越严重，预后越差。梗死体积越大的病人在急性期越易出现脑水肿、颅压升高、梗死后出血等症状，病人死亡率较高且预后较差［18］。急性脑梗死病情进展迅速，病人预后情况与是否能接受及时诊治关系密切，发病至治疗时间间隔越长，病人病情越严重，预后效果越差。CysC可通过促进炎症反应和血管损伤来参与急性脑梗死的发生发展，已有研究显示

，重症急性脑梗死病人体内CysC水平升高［19］。因此，建议临床加强上述影响因素中可调控因素的监控，以降低急性脑梗死病人近期预后不良的比例。

综上所述，急性脑梗死病人的血清miR-25表达水平低于健康者，对于近期预后不良的病人其水平更低，且为急性脑梗死病人近期预后不良的影响因素，并对急性脑梗死病人近期预后不良有一定的预测价值，可作为临床监控指标，指导预后不良的判断和治疗。

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（收稿日期：2022-08-10）

（本文編辑王丽）