生泰尔驯蓝方案的临床应用效果评价

杨业民,邱存义,张益宁,李 慧,王兴龙

(西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌 712100)

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的一种病毒性疾病,由于受感染的母猪和仔猪耳朵呈现出明显的特征性病变“蓝紫色”,因此PRRS被称为“猪蓝耳病”[1]。该病主要引起妊娠母猪繁殖障碍和不同年龄猪的呼吸道症状。20世纪80年代末首次在美国和加拿大报道后[2],90年代初,在德国明斯特附近也报告了与美国相似的暴发,随后迅速在各地蔓延,直至席卷了整个西欧国家。PRRS给全球范围内的养猪业带来了灾难,造成了巨大的经济损失,仅在美国PRRS每年造成的总经济损失约为5.6亿美元,因此PRRS被认为是世界范围内养猪业中最具有经济意义的猪病之一[3]。1991年郭宝清等人用猪肺巨噬细胞和Marc-145细胞系分离出4株PRRSV (CH-la,CH-lb,CH-lc,CH-ld),首次证明我国猪群中有PRRSV感染的存在[4]。2006年我国多省(直辖市、自治区)大规模暴发了一种不为人知的 “高热”疾病,受此疾病影响的猪超200万头,死亡病例约40万头,并摧毁了中国的许多养猪场,最后确诊为高致病性PRRSV变株造成了非典型PRRS大流行[5]。2013年又出现新的HP-PRRSV变种NADC-30样毒株在我国流行[6-7]。大多数市售PRRSV疫苗无法针对从农场分离的遗传多样性毒株提供全面保护,以致养猪业一直受到该病的威胁[8]。中药作为一种天然的、可持续的治疗方式,已被广泛用于治疗各种临床病症。在过去的几十年中,越来越多的研究证明中药对PRRSV具有一定的抗病毒作用[9-10]。

驯蓝方案由北京生泰尔科技股份有限公司提出,其方案组方由生泰蓝(板蓝根颗粒)、芪黄素(黄芪多糖粉)、天然康(银黄可溶性粉)3种中药组成。组方中的中药成分均采用先进的生物技术和提取工艺,从纯天然中药材板蓝根、黄芪、金银花和黄芩中提取。有效成分具有高纯度、高活性等优点,能够更好地发挥中药抗病毒的功效。该组方已经经过多次试验和上百家猪场的临床验证,证明了其科学性和安全性。驯蓝方案的提出旨在利用中药,以其安全、有效、无毒无副作用及无残留的特点,科学防控猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验用动物 母猪由山西省某养殖场提供,选取18头怀孕100 d的二元经产母猪,分成试验组和对照组,2组各9头。

1.1.2 药品 生泰蓝(板蓝根颗粒),芪黄素(黄芪多糖粉),天然康(银黄可溶性粉),北京生泰尔科技股份有限公司产品。

1.1.3 主要试剂 猪繁殖与呼吸综合症病毒ELISA抗体检测试剂盒,北京金诺百泰生物技术有限公司产品。

1.1.4 主要仪器 电子台秤,永康市永州衡器有限公司产品;电子天平,余姚市金诺天平仪器有限公司产品;漩涡混合仪,江苏海门其林医用仪器厂产品;酶标仪Bio-rad 680,美国伯乐公司产品。

1.2 方法

1.2.1 试验用动物分组设计 选择18头正常妊娠100 d二元经产母猪,按随机分成试验组和对照组各9头,于母猪妊娠100 d开始饲养试验,对照组投放基础日粮,试验组在基础日粮中添加板蓝根颗粒、银黄可溶性粉和黄芪多糖粉,将3种药物按(5∶1∶1)混合均匀,10 g/头拌料投喂,直至母猪产后7 d停止投药。

1.2.2 饲养管理 2个组试验用母猪均采用限位栏饲养,饲养管理方法相同,每天定期清扫粪便,不定期通风,保持室内干燥、干净且通风良好,室内温度保持在15～20 ℃,进出均要进行严格消毒措施方可进入。每日早、中、晚各投料1次,每次1.5 kg/头,母猪分娩当天不投料,第2天少量投喂,根据母猪采食状态适当增加投喂量,第3天后恢复到母猪分娩前的投喂方式及投喂量。

1.2.3 母猪繁殖性能指标的测定 试验母猪分娩后24 h内,记录母猪的总产仔数、产活仔数、死胎数、木乃伊数、弱仔数和初生仔猪个体初生重。仔猪出生21 d时断奶,记录断奶总头数、断奶仔猪个体重、断奶窝重。

1.2.4 母猪PRRSV抗体水平变化的监测 两组试验母猪均在试验开始前1 d和产后7 d时通过耳缘静脉采血4～5 mL,收集血清,用PRRSV抗体检测试剂盒按照使用说明书检测PRRSV抗体水平。

1.2.5 仔猪出生14 d、21 d PRRSV抗体水平变化监测 每窝仔猪随机挑选2头分别在14 d、21 d通过前腔静脉采血1～2 mL,收集血清,测定其血清中PRRSV抗体水平变化。

1.2.6 哺乳仔猪腹泻情况 试验期间观察和记录21 d内两组试验仔猪有无发生腹泻情况。

1.2.7 数据统计及分析方法 应用GraphPad Prism 8软件对所收集的各试验组数据进行统计及分析,P<0.05表示差异显著(*),P<0.01表示差异极显著(**),P<0.001也表示差异极显著(***)。

2 结果

2.1 驯蓝方案对围产期母猪繁殖性能的影响

对2组试验母猪产仔情况进行统计,健仔数=(总产仔数-(产死胎数+产木乃伊胎数+弱仔数))。统计结果显示,用药组窝平均健子数较对照组多1.22头/窝,用药组总健仔率高于对照组4.3%;仔猪出生个体均重高于对照组0.08 kg,用药组个体均重≥1.4 kg的占总产活仔数的58.3%,高于对照组51.2%;出生仔猪窝均重,用药组高于对照组1.49 kg。对出生仔猪追踪到21 d断奶时,用药组仔猪个体均重高于对照组1.19 kg,差异极显著(P<0.001),窝均重高于对照组18.9 kg,差异极显著(P<0.001)(图1);仔猪日均增重,试验组和对照分别为208.71 g、159.06 g,差异极显著(P<0.001);每窝日均增重,试验组和对照组分别为2.53 kg,1.70 kg,差异极显著(P<0.001)(图2);21 d断奶仔猪成活数和断奶仔猪成活率分别为113头、104头和95%、96%,差异不显著(P>0.05)。

图1 21 d断奶仔猪个体均重(a),21 d断奶仔猪窝重(b)

图2 仔猪21 d日均增重(a),仔猪21 d窝日均增重(b)

2.2 驯蓝方案对围产期母猪PRRSV抗体水平的影响

用ELISA抗体检测试剂盒对两组试验母猪试验前后血清中PRRSV抗体水平变化进行测定,结果显示,试验组添加药物后血清中PRRSV抗体下降,S/P值≥1.5高抗体水平由试验前7头下降至4头,下降了33.4%,而对照组血清中PRRSV抗体呈现上升趋势,S/P值≥1.5高抗体水平前后持平(图3)。

图3 妊娠母猪试验前后PRRSV抗体变化(a),妊娠母猪试验前后PRRSV抗体S/P值≥1.5的头数(b)

2.3 驯蓝方案对仔猪出生14 d、21 d PRRSV抗体水平的影响

用ELISA抗体检测试剂盒检测14 d、21 d哺乳仔猪血清中PRRSV抗体。结果显示,试验组仔猪在出生后14 d PRRSV抗体水平处于高水平,14 d后至21 d PRRSV抗体全部呈现下降趋势;对照组部分仔猪在出生14 d时达到较高水平,其余仔猪在21 d时仍处于上升趋势(图4a、图5); 14 d、21 d仔猪血清中PRRSV抗体S/P值≥1的头数,试验组由14 d的13头降至21 d的 8头,从72.2%下降至44.4%,对照组14 d的10头到21 d时降至7头,从55.6%降至38.8%(图4b)。

图4 仔猪14～21 d PRRSV抗体水平检测(a);S/P值≥1的头数(b)

图5 14 d仔猪PRRSV抗体达到顶峰后直至21 d下降的头数

2.4 哺乳仔猪腹泻情况

前期研究证明仔猪感染类NADC-30 PRRSV毒株后会导致仔猪腹泻,对整个试验期间出生哺乳仔猪腹泻情况进行了统计,结果显示,试验组试验期间有6.7%的哺乳仔猪发生腹泻,而对照组中有44.4%的哺乳仔猪发生腹泻(表1)。

表1 2个组仔猪腹泻情况统计

3 讨论

猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV) 是全球养猪业中最重要的猪病病原体,引起母猪繁殖障碍和生长猪呼吸系统疾病,该病一旦传入养猪场,造成暴发,会给养猪企业带来巨大的经济损失[3]。近年来,与2008年在美国报道的NADC-30 PRRSV毒株有着高度亲缘关系的类NADC-30 PRRSV毒株在我国流行,该类毒株具有变异快和高重组率等新的特点,且商业化的PRRSV疫苗对该类毒株提供的保护效果有限。目前有大量研究证明板蓝根、黄芪、黄芩和金银花等中药材在临床应用中均具有较好的抗病毒效果[11-12]。有望今后在防控类NADC-30 PRRSV中发挥重要的作用。

本研究所选猪场为前期研究证明存在类NADC-30 PRRSV感染的猪场,该猪场未进行PRRSV疫苗免疫,抗体阳性率约为50%,满足本次研究开展的条件。试验通过检测用药组与对照组猪只血清中的PRRSV抗体水平,发现驯蓝方案能降低围产期母猪和14 d至21 d仔猪血清中PRRSV抗体水平。这一研究结果与王慧[13]关于板蓝根颗粒配合黄芪多糖作为免疫调节剂,可以降低S/P值强阳性猪只抗体水平(S/P值>2.8)的研究结果一致。因类NADC-30 PRRSV毒株能引起感染仔猪腹泻,因此在本研究过程中,对整个试验周期试验仔猪进行了观察和记录。结果显示,未用药组在试验期间仔猪腹泻率为44%,而用药组仔猪腹泻率为6.7%。此外,通过测定各项生产指标,发现驯蓝方案在一定程度上能提高窝均出生仔猪健仔头数、个体均重和窝均重;能显著提高21 d断奶仔猪个体均重、窝均重、日均增重及窝均增重。这一研究结果再次证明了在日常饲料中添加中药复方制剂能显著提高繁殖母猪窝产活仔数、仔猪出生窝重及断奶仔猪窝重[14]。

综上所述,驯蓝方案能降低围产期母猪和14 d至21 d仔猪血清中PRRSV抗体水平,增强围产期母猪的繁殖性能,同时具有提高仔猪整体健康度和增强仔猪抗病的能力。但驯蓝方案中的3种中药单用或者其他配伍其抗病毒效果如何,是否对围产期母猪繁殖性能产生积极影响,还缺乏相关数据证明,有待后续继续研究。