无防腐剂复方托吡卡胺滴眼液的兔散瞳效果实验

张志刚，赵 寅，盛小莉，吴文娟，郑 炜

（汇禹远和< 海南> 药业有限公司，海南 澄迈 571900）

屈光不正是影响视力发育的重要因素，屈光检查前一般需散瞳验光。复方托吡卡胺滴眼液含托吡卡胺与盐酸去氧肾上腺素，临床主要用于以诊断及治疗为目的的散瞳及调节麻痹，其作用迅速，药效维持时间短［1］；且可联合其他药物治疗假性近视，能有效改善视力和眼调节幅度［2］。复方托吡卡胺滴眼液（商品名美多丽，即参比制剂）含防腐剂苯扎氯铵，长期使用可引起变态反应性结膜炎、视力减退、接触性皮炎等不良反应［3］。本研究中对比分析了不含防腐剂的复方托吡卡胺滴眼液（受试制剂）与参比制剂对实验兔的散瞳效果，为评价二者药物效应动力学（简称药效学）的一致性提供参考。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 仪器、试药与动物

仪器：HL-GTC 型兔瞳孔尺（北京合力科创科技发展有限公司）；ES - 8000H 型电子天平（长沙湘平科技发展有限公司，精度为0.1 g）；KJ5S1 型手持裂隙灯显微镜（苏州康捷医疗股份有限公司）。

试药：受试制剂（天津金耀集团河北永光制药有限公司，规格为每瓶0.4 mL∶托吡卡胺2 mg∶盐酸去氧肾上腺素2 mg，批号为Y0542301）；参比制剂（Santen Pharmaceutical Co.，Ltd. Shiga Plant，规格为每瓶10 mL∶托吡卡胺50 mg∶盐酸去氧肾上腺素50 mg，批号为MP2250）；0.9%氯化钠注射液（湖南康源制药有限公司，批号为22101901D）。

动物：普通级新西兰兔，雌雄各半，体质量2.4～3.4 kg，购于湖南太平生物科技有限公司，实验动物生产许可证号SCXK（湘）2020-0005，实验动物质量合格证号430730231100024282，饲养于湖南普瑞玛药物研究中心有限公司的普通环境动物实验室E区，实验动物使用许可证号SYXK（湘）2020-0015。本研究经湖南普瑞玛药物研究中心有限公司实验动物管理伦理委员会批准［审批号IACUC-2023（2）004］。

1.2 分组与给药

取实验兔30只，按体质量随机分为空白对照组（予等体积0.9%氯化钠注射液），参比制剂组（予参比制剂50 μL），受试制剂组（予受试制剂50 μL），各10只。各组实验兔单眼均予相应药物或0.9%氯化钠注射液1次。

1.3 观察指标

分别于给药后0（即给药前），0.25，0.5，1，2，4，8，12，24 h 采用兔瞳孔尺检测实验兔的双眼瞳孔最大直径［4］，计算给药前后的最大直径差；测量双眼正向（0°、90°）的轴线直径A1和B1及斜向（45°、135°）的轴线直径A2和B2，通过公式S=π（A1×B1+A2×B2）/8 计算瞳孔面积［5］。

1.4 统计学处理

采用SPSS 23.0 统计学软件分析。计量资料行正态性和方差齐性检验。若满足正态性，则采用单因素方差分析，并根据方差齐性情况行LSD + Dunnet-t检验或Tamhane's T2 检验；若不满足正态性，则行Kruskal -Wallis 检验和Mann - WhitneyU检验。P< 0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

与空白对照组比较，参比制剂组与受试制剂组实验兔给药后除24 h 外其余时间点的瞳孔最大直径差均显著增大（P< 0.01），给药后24 h 基本恢复正常；参比制剂组给药后各时间点、受试制剂组实验兔给药后除24 h 外的其余时间点瞳孔面积均显著增大（P<0.05 或P<0.01）。与参比制剂组比较，受试制剂组实验兔给药后各时间点的瞳孔最大直径差及瞳孔面积均无显著差异（P>0.05）。详见表1、图1。

a. 受试制剂组 b. 参比制剂组 c. 空白对照组A. 瞳孔直径（部分） B. 瞳孔面积（部分）图1 实验兔瞳孔a.Test preparation group b.Reference preparation group c.Blank control groupA.Pupil diameter（partial） B.Pupil area（partial）Fig.1 Pupils of experimental rabbits

表1 各组实验兔瞳孔最大直径差及面积比较（±s，n=20）Tab.1 Comparison of difference in maximum pupil diameter and pupil area in each group（±s，n = 20）

表1 各组实验兔瞳孔最大直径差及面积比较（±s，n=20）Tab.1 Comparison of difference in maximum pupil diameter and pupil area in each group（±s，n = 20）

注：与空白对照组比较，*P < 0.05，**P < 0.01。Note：Compared with those in the blank control group，*P < 0.05，**P < 0.01.

给药后时间点0 h 0.25 h 0.5 h 1 h 2 h 4 h 8 h 12 h 24 h瞳孔最大直径差（mm）空白对照组0.0±0.8 0.1±0.6 0.2±0.8 0.3±0.7 0.2±0.5 0.1±0.7 0.1±0.8 0.1±0.6参比制剂组2.6±0.9**2.8±0.8**3.5±0.8**2.8±0.9**2.6±0.7**2.1±0.5**1.4±0.7**0.3±0.9受试制剂组2.4±0.7**2.7±0.7**3.3±1.0**3.0±1.2**2.5±0.8**2.0±0.9**1.5±0.8**0.4±0.8瞳孔面积（mm2）空白对照组22.9±3.9 22.5±4.3 22.3±4.3 22.7±3.5 23.1±4.1 22.3±3.3 22.1±4.8 22.2±3.8 20.9±4.2参比制剂组22.7±2.5 45.8±4.8**47.0±6.8**53.0±7.6**46.1±8.9**43.8±7.2**38.6±4.4**31.4±7.0**24.3±4.3*受试制剂组22.3±2.8 43.5±5.0**44.6±5.6**48.4±6.8**47.4±8.9**44.0±6.3**38.2±9.1**30.1±5.1**23.5±4.4

3 讨论

近年来，近视发病率逐渐升高，且低龄化趋势明显［6-10］。矫正屈光不正的方法包括佩戴框架眼镜、角膜塑形镜、软性角膜接触镜等，但效果依赖于屈光检查的精准度［11-12］。散瞳是眼科手术前及屈光检查前的重要准备工作，会直接影响手术质量；在临床实践中，部分患者的术前散瞳效果欠佳，一定程度上增加了手术风险［13］，故需根据患者的病情，科学选择合适的散瞳药物。与硫酸阿托品滴眼液、盐酸环喷托酯滴眼液等散瞳药物相比，复方托吡卡胺起效迅速、恢复快，但参比制剂含防腐剂，长期使用会引起眼表不良反应［14-15］，故需开发不含防腐剂且与参比制剂等效的散瞳药物。

本研究中，受试制剂不含防腐剂，装量由10 mL 调为0.4 mL，可避免多人多次使用，降低眼用制剂反复开启带来的微生物污染风险。结果表明，与空白对照组比较，受试制剂组与参比制剂组实验兔给药后除24 h 外其余时间点的瞳孔最大直径差均显著增大，且参比制剂组给药后各时间点、受试制剂组除给药后24 h 外的其余时间点的瞳孔面积均显著增大；散瞳起效时间均为给药后0.25 h，药效均在给药后1 h达峰值，且瞳孔面积在该时间点的差异不显著（P= 0.085）；受试制剂组给药后各时间点的瞳孔最大直径差和瞳孔面积与参比制剂组比较均无显著差异。

综上所述，复方托吡卡胺滴眼液受试制剂与参比制剂均能发挥增大实验兔的瞳孔最大直径差和瞳孔面积的作用，表明二者的散瞳效果基本一致，可为其药效学研究提供数据支持。