人类免疫缺陷病毒抗体初筛中采取胶体层析法与酶联免疫吸附试验检测的价值对比

【摘要】 目的 对比胶体层析法与酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）应用于人类免疫缺陷病毒

（human immunodeficiency virus，HIV）抗体初筛中的临床价值。方法 回顾性分析2019年6月—2022年6月信丰县疾病预防控制中心60例接受HIV感染筛查者的临床资料，所有入选病例均接受胶体层析法与ELISA法进行HIV抗体初筛，并经过免疫印迹法检测最终确认。比较2种方法检测HIV抗体的效能。结果 60例筛查者经免疫印迹法确认HIV抗体阳性25例（41.67%），HIV抗体阴性35例（58.33%）。胶体层析法检测HIV抗体的符合率为83.33%、灵敏度为76.00%、特异度为88.57%、阳性预测值为82.61%、阴性预测值为83.78%；ELISA法检测HIV抗体的符合率为91.67%、灵敏度为92.00%、特异度为91.43%、阳性预测值为88.46%、阴性预测值为94.12%；胶体层析法与ELISA法比较，ELISA法检测HIV抗体的灵敏度、阴性预测值均高于胶体层析法，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 ELISA法检测HIV抗体的效能高于胶体层析法，主要表现在ELISA法具有更高的灵敏度与阴性预测值，有助于提高HIV感染筛查准确率。

【关键词】 人类免疫缺陷病毒；抗体初筛胶体层析法；酶联免疫吸附试验

文章编号：1672-1721（2024）04-0115-03     文献标志码：A     中国图书分类号：R512.91

获得性免疫缺陷综合征（acquired immune deficiency syndrome，AIDS）已成为全球性公共卫生难题，具有病死率高、患者预后差、传染性强等特点，严重影响患者身心健康[1]。HIV是引起AIDS的病原微生物。性接触与血液是HIV主要传播途径。通过控制传播途径与早期病毒感染检测能够有效降低AIDS发生风险，并为AIDS患者的早期治疗提供参考依据[2]。HIV抗体检测技术是临床筛查AIDS的重要手段，但不同检测方法诊断效能有所差异。胶体层析法是临床HIV抗体初筛中应用最广泛的检测方法，具有操作简单、迅速且经济适用性好的优势，尤其适用于HIV急诊检测中，但胶体层析法特异度较低，存在一定假阳性与假阴性率，筛查精度仍存在不足[3]。ELISA检测HIV抗体的准确率在一代试剂基础上得到了大幅提高，具有操作简单、准确度高、可大范围检测等优势[4]。目前关于胶体层析法与ELISA法在HIV抗体初筛中的优劣势仍存在争议。本研究以60例接受HIV感染筛查者为研究对象，进一步对比了二者的检测效能，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2019年6月—2022年6月信丰县疾病预防控制中心60例接受HIV感染筛查者的临床资料，男性33例，女性27例；年龄16～68岁，平均（30.16±11.35）岁；体质量指数17～29 kg/m2，平均（22.35±4.69）kg/m2。

纳入标准：因身体不适、与HIV患者存在血液或性接触等原因进行HIV抗体检测；均接受胶体层析法、ELISA法进行HIV抗体初筛，并经过免疫印迹法检测确认；入院检测期间依从性良好；临床资料完整。

排除标准：合并肢体创伤；合并血流感染；合并严重内分泌疾病；合并精神疾病。

1.2 方法

1.2.1 仪器与试剂

全自动生化分析仪（德国西门子公司，ASVIA1800型），高速台式离心机（美国贝克曼库尔特有限公司，Avanti型），酶标仪（美国赛默飞世尔科技公司，MULTISKAN MK3型），化学发光全自动免疫分析仪（美国雅培公司，i2000型），实时荧光定量PCR仪（济南程腾生物技术有限公司，MA-6000型），洗板仪（北京拓普分析仪器有限公司，DEMⅢ型），HIV质控品（北京康彻思坦生物技术有限公司，批号201810203），HIV校准品、HIV抗体诊断试剂（北京康彻思坦生物技术有限公司），ELISA抗体诊断试剂盒（上海晶抗生物工程有限公司），胶体层析法抗体诊断试剂盒（上海晶抗生物工程有限公司），免疫印迹法检测试剂盒（广州达安基因股份有限公司）。

1.2.2 检测方法

所有受检者均采集外周静脉血样5 mL，将部分血样（2～3 mL）采用高速台式离心机常规离心后分离血

清，将血清标本采用恒温冰箱保存，2 h内采用胶体层析法与ELISA法进行HIV抗体检测，同时将剩余血样进行抗凝处理并留取血浆冷藏备用，以待后期进行免疫印迹法检测。（1）胶体层析法检测方法及结果判定。取胶体层析法抗体诊断试剂盒，采用移液枪将60 μL待测样本置于试剂卡加样处，应用免疫层析原理进行HIV抗体定性检测。结果判读，试剂卡对照区与检测区均出现紫红色条带即判定HIV抗体阳性。（2）ELISA检测方法及结果判定。采用ELISA抗体诊断试剂盒检测HIV抗体，设置阴性、空白对照、阳性各2孔，待测样孔、酶孔分别加样本稀释液10 μL、100 μL，37 ℃环境下孵育60 min，洗板加100 μL酶结合物后37 ℃环境下孵育30 min，洗板加100 μL显色液后继续37 ℃环境下孵育30 min，洗板加50 μL终止液。结果判读，ELISA法比色主、副波长分别为450 nm、630 nm，Cutoff值以阴性对照孔均值+0.12计，S/CO＞1为阳性[5]。（3）免疫印迹法检测方法及结果判定。所有待测者均接受免疫印迹法进行HIV感染确认，取受检者备用血液样本，采用免疫印迹法检测试剂盒进行确认试验，根据条带显色情况进行结果判读。gP160、gP120、gP41中同时出现≥2条膜带，或gP160、gP120、gP41中出现1条膜带且同时出现P24带即判定为阳性。

1.3 观察指标

以免疫印迹法检测结果作为金标准，对比胶体层析法与酶联免疫吸附试验在HIV感染筛查中的检测效能，包括符合率、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0统计学软件分析数据，计数资料以百分比表示，行χ2检验，P＜0.05为差异有统计意义。

2 结果

2.1 胶体层析法与ELISA法检测HIV抗体结果比较

免疫印迹法检测结果显示，60例筛查者中共确诊HIV抗体阳性25例（41.67%），HIV抗体阴性35例（58.33%）。胶体层析法检测HIV抗体阳性23例（38.33%）、阴性37例（61.67%），ELISA法检测HIV抗体阳性26例（43.33%）、阴性34例（56.67%），见表1、表2。

2.2 胶体层析法与ELISA法检测HIV抗体的效能比较

ELISA法与胶体层析法比较，ELISA法检测HIV抗体的灵敏度、阴性预测值均高于胶体层析法，差异有统计学意义（P＜0.05）；2种方法的特异度、阳性预测值、符合率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表3。

3 讨论

AIDS是临床常见传染病。大量研究已证实[6-7]，AIDS会使患者免疫系统功能损伤，而免疫功能的破坏极易导致多重感染、恶性肿瘤等严重并发症，危害患者生命安全。HIV感染是引起AIDS的直接原因。HIV是一种传播途径多样的逆转录病毒，其传播途径包括血液、母婴和性传播等[8]。AIDS呈全球分布趋势，截至2019年，世界范围内AIDS患者已超过3 800万例，其中仅2019年全球AIDS新发病例就超过了170万例。我国AIDS患者人数较多，一项关于中国1990—2017年的AIDS疾病相关研究显示[9]，1990—2017年中国的AIDS疾病负担呈逐年升高趋势，1990—2017年中国的AIDS年龄别标化伤残调整寿命年率为（1.61～9.13）/10万，年龄别标化病死率为（0.03～0.20）/10万。HIV感染防控形势严峻，给我国公共卫生医疗体系带来了沉重负担。利用HIV抗体检测技术能够对AIDS风险人群进行早期筛查与诊断，从而为AIDS的预防与控制提供参考。

HIV抗体检测技术发展至今已有数十年历史，是临床HIV感染快速筛查以及早期诊断的主要方式。胶体层析法因价格实惠且操作简单的优势被普遍应用，但有学者研究指[10]出，胶体层析法在HIV感染早期存在灵敏度低、假阳性率高等不足。ELISA法的运用为HIV抗体筛查提供了新的选择，但其临床接受度相对较低，关于胶体层析法和ELISA法在HIV抗体筛查中的价值仍不明确。本研究分别采用胶体层析法与ELISA法进行HIV抗体检测，结果显示胶体层析法检测HIV抗体的符合率为83.33%、灵敏度为76.00%、特异度为88.57%，而ELISA的符合率为91.67%、灵敏度为92.00%、特异度为91.43%，与苗岳等[11]的研究相似，表明胶体层析法与ELISA在HIV抗体检测中均具有较高的准确率。比较胶体层析法与ELISA检测HIV抗体的效能，结果显示，ELISA检测HIV抗体的灵敏度与阴性预测值均高于胶体层析法，差异有统计学意义（P＜0.05），与钟秀琴[12]的研究基本对应，表明ELISA法在HIV抗体检测中的效能高于胶体层析法。分析原因，ELISA法检测时可将HIV抗原于固相载体包被，利用酶催化底物反应显色后经酶标仪测定结果，不受样本溶血及脂血的影响，稳定性高且灵敏度增加，保证了检测结果的准确性。ELISA法对于检测条件的要求相对较低，不仅能够在室内常规温度下进行检测，还无需价格昂贵的特种设备，操作简单、便捷，极大地降低了HIV抗体检测过程中对于设备与操作者水平的要求。ELISA法能一次性检测多个待测样本，在广泛性HIV感染筛查过程中具有显著优势，能够为HIV抗体检测提供客观、科学的参考依据，提高HIV筛查诊断准确率。

综上所述，ELISA法检测HIV抗体的效能高于胶体层析法，主要表现在ELISA法具有更高的灵敏度与阴性预测值。ELISA法不仅可以进行单份标本检测，还可以一次性进行多样本检测，对于提高HIV感染筛查准确率具有重要价值。

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（编辑：郭晓添）

作者简介：刘小莲，女，大专。