益心健脑膏方的制备工艺研究 *

宣志红 李小芳 宣碧霞 梁卫青 浦锦宝

（1.诸暨市中医医院中药房，浙江 诸暨 311800；2.浙江省中医药研究院药用资源研究中心，浙江 杭州 310007）

心脑血管疾病（CVD）是包括冠状动脉粥样硬化性心脏病（CHD）、脑血管病、外周动脉疾病和心力衰竭在内的一类疾病，具有高患病率、高致残率和高病死率的特点［1］。近年来心脑血管疾病在我国居民死亡原因中始终位列第一，其发病率逐年递增，且愈加年轻化。研究［2］显示，2005 年我国死于心脑血管疾病的居民为309.11 万，2010 年为347.93 万，2015 年为384.33 万；2020年则增加至457.66万；与2005相比，总病死率增加了48.06%。《中国心血管健康与疾病报告2021：英文版》［3］数据显示，目前心血管病现患人数约3.3亿，其中脑卒中1300万、冠状动脉粥样硬化性心脏病1139万、心力衰竭890万、肺源性心脏病500万、房颤487万、风湿性心脏病250万、下肢动脉疾病4530万、高血压病2.45亿。《中国中青年心脑血管健康白皮书》显示，20岁～39岁的患病/高风险人群占比为44.3%，其中20～29岁的患病/高风险人群占比已经达到15.3%，且患病/高风险的中青年治疗状况并不理想，心脑血管疾病风险正在逼近年轻人［4］。Moran A等［5］预计2010年—2030年，我国人群中心肌梗死和脑卒中等心血管事件的发生还将迅猛上升，其所占比重在所有慢性病负担中将超过50%。心脑血管疾病无疑会成为实现《“健康中国2030”规划纲要》目标的主要障碍。

益心健脑膏方来源于诸暨市中医医院名老中医的经验方，临床使用多年，本方以黄芪生脉饮合四物汤为基础方，全方由党参、川芎、丹参、麦冬、五味子、黄芪、当归、白芍、熟地黄、灵芝、石菖蒲、益智仁、陈皮、炙甘草、大枣等药组成，方中党参健脾益肺、养血生津，川芎活血止痛、燥湿开郁，丹参活血祛瘀、通络止痛，麦冬养阴生津、润肺清心，五味子收敛固涩、益气生津、补肾宁心，黄芪补气固表、扶正固本，当归补血活血、调经止痛、润肠通便，白芍养血调经、敛阴止汗、柔肝止痛、平抑肝阳，熟地黄补血滋阴、益精填髓，灵芝补气安神、止咳平喘，石菖蒲开窍豁痰、醒神益智、化湿开胃，益智仁暖肾固精缩尿、温脾止泻摄唾，陈皮行气健脾，炙甘草补脾和中、调和诸药，大枣补中益气、养血安神。本方具有益气养阴、养血活血、益心健脑的作用，经临床实践证实，对多种心脑血管病证有较好的治疗效果［6，7］。

膏方属于中华传统八大药剂之一，以其“阴平阳秘，以衡为补”的理论，兼具补虚和治病两大特点，广泛应用于老年人群，市场前景广泛［8］。膏方是将中药处方药材加水煎煮、浓缩，再加辅料制成的半流体制剂，用于预防和治疗疾病，临床疗效显著。然而膏方的制作工艺良莠不齐，其成分控制的缺失严重影响了膏方质量的客观评价［9］。而原料药种类、浸泡、煎煮工艺也是影响膏方质量的重要因素［10］。通过分析诸暨市中医医院数十年加工膏方的经验，我们发现一些共性指标可作为膏方成分质控的评价依据，如得膏率、相对密度、含水量等。而建立膏方成分指标含量检测方法，使膏方生产工艺更有据可依，可进一步提高膏方制备工艺的科学合理性，同时使膏方质量更加稳定可控。

1 仪器与材料

高效液相色谱仪（1260，Agilent）；电子天平（BP211D，Sartorius）；旋转蒸发仪（R-210，BUCHI）；粘度计（NDJ-1，上海精密科学仪器有限公司）；电热恒温鼓风干燥箱（DHG-9240A型，上海一恒科学仪器有限公司）；超声波清洗器（KQ3200DB，昆山超声波仪器有限公司）；超纯水仪（611UV，Sartorius）。

所用药材饮片党参、川芎、丹参、麦冬、五味子、黄芪、当归、白芍、熟地黄、灵芝、石菖蒲、益智仁均购自浙江省诸暨市天寿中药材有限公司，各味中药饮片均符合2020年版《中华人民共和国药典：一部》［7］项下规定。阿魏酸（批号：110773-201915）购自中国食品药品检定研究院。甲醇为色谱纯（Merck），水为自制超纯水，磷酸、乙酸乙酯均为分析纯（杭州高晶精细化工有限公司）。

2 方法与结果

2.1 益心健脑膏方处方组成党参250 g，川芎150 g，丹参180 g，麦冬200 g，五味子90 g，黄芪250 g，当归200 g，白芍250 g，熟地黄300 g，灵芝250 g，石菖蒲150 g，益智仁150 g。

2.2 工艺路线设计膏方制作过程：如根据处方中药材的性质，确定本品工艺路线：将党参、川芎、丹参等药材加水煎煮并浓缩为稠膏，加入阿胶，收膏，包装即得益心健脑膏方。

2.3 提取工艺优化采用正交实验设计对水提取工艺进行优化，其中加水倍数（A）、提取时间（B）、提取次数（C）是对提取效果影响较大的因素，故本实验针对这3个因素进行考察，采用L9（34）正交实验进行实验，每个实验设3 水平。见表1。按正交实验设计表进行提取，滤过，合并提取液，浓缩并定容至400 mL。

表1 正交实验因素水平

2.4 评价指标的测定

2.4.1 阿魏酸的含量测定方中川芎和当归的主要有效成分为阿魏酸，具有消炎止痛之功效。

2.4.1.1 色谱条件色谱柱为YMC C18柱（250 mm×46 mm，5 μm），流动相：甲醇-0.5%磷酸（38∶62）为流动相，检测波长320 nm，流速1.0 mL/min，柱温：35 ℃。色谱图见图1。

图1 阿魏酸对照品溶液（A）和供试品溶液（B）色谱图

2.4.1.2 对照品溶液的制备取阿魏酸对照品适量，加甲醇制成36 μg/mL的溶液，摇匀，即得。

2.4.1.3 供试品溶液的制备取2.3 项下各提取液适量，12 000 r/min 离心10 min（离心半径6 cm），上清液作为供试品溶液。

2.4.1.4 测定精细吸取对照品溶液10 μL 和供试品溶液5～10 μL，注入液相色谱仪，进样检测，以峰面积计算阿魏酸含量。见表2。

表2 L9（34）正交实验设计与结果

2.4.2 干膏得率测定取各提取液20 mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴挥干后，于105 ℃干燥5 h，取出，置干燥器中冷却30 min，称重，计算干膏得率。结果见表2。干膏得率（%）=干膏质量/饮片总质量×100%。

2.5 正交实验结果干膏得率虽是提取效率的重要参数，但与其药效强度不构成量效关系，故权重设定为0.4，阿魏酸含量作为水提取工艺筛选的主要指标，设定权重为0.6。

以阿魏酸含量和出膏率为评价指标，进行加权评分， 公式如下：正交实验结果见表2，方差分析结果见表3。

表3 方差分析

结果表明，加水量、提取次数、提取时间均无显著性差异，影响因素分别是加水量＞提取次数＞提取时间。直观分析，加水量为8 倍量、提取次数为3 次、提取时间为60 min时提取效率最佳。

2.6 验证实验称取3 份处方量药材，按照上述筛选的最优提取工艺条件进行3 次平行验证实验，结果见表4。验证实验结果表明，3 次平行实验所得干膏率、阿魏酸含量相对标准偏差（RSD）值分别为1.49%和1.86%，说明该水提取工艺稳定可行。

表4 验证实验结果

2.7 收膏工艺考察

2.7.1 收膏工艺按优选的提取工艺提取、过滤，得到提取液，加热浓缩，待药液转浓稠时，改用小火加热，不断搅拌，避免焦糊，并加入8%～10%经粉碎后的阿胶，边加边搅拌，取适量检测相对密度，浓缩至相对密度1.38～1.40（80 ℃测定），停止加热，收膏完成。

2.7.2 相对密度测定取适量2.7.1 项下得到的成品膏，精密称定，加入2倍量超纯水，搅匀稀释，作为供试液，按2020 年版《中华人民共和国国药典：四部》［11］相对密度测定法项下比重瓶法进行测定，计算相对密度。结果见表5。

表5 收膏工艺考察结果

2.7.3 得膏率测定将冷至室温的成品膏称重，按下式计算相应得膏率，得膏率=成品膏质量/膏方饮片总质量×100%。见表5。

2.7.4 含水量测定取5 g 成品膏置称量瓶内，精密称定，置恒温干燥箱内105 ℃干燥至恒重，盖上瓶盖。移至干燥器中，冷却至室温后精密称定质量。按下式计算其含水量：膏方含水量=（烘干前质量-烘干后质量）/烘干前质量×100%。见表5。

2.7.5 动力黏度测定在膏方即将出锅时（≥85 ℃），用旋转式粘度计进行测定。具体方法：选择4 号转子浸入成品膏中，选择转速为60 r/min 时直接读出膏方的动力黏度值。见表5。

2.7.6 实验结果分析随着膏方相对密度的增大，膏方的得膏率和含水量均降低，黏度增大。当膏方相对密度为1.36 时，膏方的含水量较大，成品膏方较稀；当膏方相对密度为1.45 时，膏方开始出现焦煳味。因此膏方相对密度应该控制在1.38～1.42为宜。

3 讨论

3.1 膏方提取工艺考察指标的选择阿魏酸是当归、川芎等中药材水溶性提取物中的主要单体活性成分之一，具有明确的药理活性，故以阿魏酸含量作为膏方提取工艺的质控指标［7］。采用高效液相色谱法对阿魏酸含量进行测定，该方法准确、可靠［12］，为益心健脑膏方的质量控制提供了科学的评价方法。

3.2 膏方质量的判断膏方的外观质量一般通过眼看、鼻闻进行直接判断，大多数的医疗机构对成品膏方的质量控制也主要是从外观性状来判断。收膏过程中往往通过观察“挂旗”“滴水成珠”“牛眼泡”等现象来判断收膏最佳时机，虽不失为一种快速、简单的方法，但仅凭主观意识和经验操作，缺乏重复性和标准性［12，13］。本研究通过膏方相对密度、出膏率、膏方含水量、膏方动力黏度等多指标设计实验，综合评价益心健脑膏方成型性，保障膏方质量稳定性和均一性。

3.3 膏方的应用前景膏方并非单纯补剂，有治病纠偏、固本清源、调节脏腑气血阴阳的功能，而且在干预多种慢性和复杂性疾病方面有着独特优势［14-16］。目前膏方应用广泛，市场前景较好，受广大患者的青睐，而在膏方未来的发展中，其质量评价体系的构建势必也会越来越完善［17］。