血清高迁移率族蛋白B1、人β防御素2与腺病毒肺炎患儿闭塞性细支气管炎发生的关系

程佳敏，谭志军，蒙勇球，梁宙，赵玉莲，郑凤丽

贵港市人民医院（广西医科大学第八附属医院）儿科，广西 贵港 537100

腺病毒肺炎（AP）是人腺病毒（HAdV）感染引起的肺炎，是一种常见且严重的儿童急性呼吸道感染。临床上近1/3 的AP 患儿可发展为重症肺炎，且在存活患儿中14%～60%会遗留不同程度的呼吸系统并发症或后遗症，其中以闭塞性细支气管炎（BO）最为常见，严重影响患儿身心健康［1-2］。研究表明，气道炎症反应参与AP 患儿发生BO 进程［3-4］。高迁移率族蛋白B1（HMGB1）是一种多功能核蛋白，抑制HMGB1 能改善呼吸道合胞病毒支气管肺炎患儿的支气管炎症反应［5-6］。人β 防御素2（hBD-2）是一种阳离子多肽，当机体受到病原体感染时其血液水平可急剧升高，升高程度与肺炎支原体感染以及急性下呼吸道感染严重程度相关［7-8］。本研究探讨血清HMGB1、hBD-2 水平与AP 患儿BO 发生的关系，旨在为降低BO发生提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2021 年1 月—2023 年1 月本院收治的AP 患儿193 例，男108 例，女85 例，年龄1～57 个月。纳入标准：①符合《儿童腺病毒肺炎诊疗规范（2019 年版）》［9］AP 诊断标准；②初次确诊AP；③临床表现（反复高热、呼吸困难、低氧血症）、影像学表现（阶段性肺实变、肺不张、胸腔积液）、实验室指标（白细胞计数、血红蛋白、血小板计数、天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、C 反应蛋白、降钙素原）和机械通气资料完整。排除标准：①合并遗传或染色体疾病；②合并先天性呼吸系统发育畸形、支气管肺发育不良、先天性心脏病；③合并支气管哮喘；④近1 个月内使用激素治疗；⑤合并自身免疫系统疾病、恶性肿瘤、血液系统疾病；⑥合并肺炎支原体、细菌等其他感染。本研究经贵港市人民医院医学伦理委员会批准进行，患儿家属或监护人签署书面知情同意书。

1.2 血清HMGB1、hBD-2 检测 入院时采集AP 患儿静脉血5 mL，3 000 r/min 离心15 min（离心半径8 cm）；留取上层血清，用本生（天津）健康科技有限公司提供的酶联免疫吸附试验试剂盒检测HMGB1、hBD-2。

1.3 BO诊断与分组 患儿出院后通过门诊复查或电话随访3个月，参考《儿童闭塞性细支气管炎的诊断与治疗建议》［10］将AP 患儿分为BO 组58 例和非BO 组135 例。主要诊断标准包括：①发病前有感染或其他原因所致细支气管损伤史；②持续或反复喘息，或呼吸困难、呼吸急促、咳嗽，运动不耐受，双肺可闻及广泛湿啰音、喘鸣音，以上表现持续6 周以上，且对支气管舒张剂反应差；③肺功能检测显示混合性通气功能障碍或小气道阻塞性通气功能障碍、支气管舒张试验多为阴性，胸部高分辨率CT检查显示支气管壁增厚、支气管扩张、马赛克灌注征；④排除弥漫性泛细支气管炎、肺结核、各种先天支气管肺发育畸形、支气管哮喘、呼吸道感染等其他原因引起的咳喘。

1.4 统计学方法 采用SPSS28.0 统计软件。符合正态分布计量资料以±s表示，不符合正态分布计量资料以M（P25，P75）表示，组间比较分别采用t检验、Z检验；计数资料以例（%）表示，组间比较采用χ2检验；采用多因素Logistic回归分析AP患儿BO 发生的影响因素；用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清HMGB1、hBD-2 对AP 患儿BO 发生的预测价值。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清HMGB1、hBD-2对AP患儿发生BO的影响

2.1.1 单因素分析结果 BO组月龄小于非BO组，热程长于非BO 组，低氧血症、机械通气比例和血液白细胞计数、血小板计数、C 反应蛋白、降钙素原、HMGB1、hBD-2 高于非BO 组（P均＜0.05），两组性别、早产儿构成、影像学表现、反复高热、呼吸困难以及血液血红蛋白、天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶比较差异无统计学意义（P均＞0.05）。见表1。

表1 影响AP患儿发生BO的单因素分析结果

2.1.2 多因素分析结果 以单因素分析差异有统计学意义的月龄、热程、低氧血症、机械通气以及血液白细胞计数、血小板计数、C 反应蛋白、降钙素原、HMGB1、hBD-2 为自变量（所有连续变量均原值录入），是否发生BO（赋值：是/否=1/0）为因变量。多因素Logistic 回归分析显示，低氧血症、机械通气和HMGB1、hBD-2 为AP 患儿发生BO 的独立危险因素（P均＜0.05）。见表2。

表2 影响AP患儿发生BO的多因素Logistic回归分析结果

2.2 血清HMGB1、hBD-2 对AP 患儿发生BO 的预测价值 血清HMGB1、hBD-2 联合预测AP 患儿发生BO 的曲线下面积大于二者单独预测的曲线下面积，比较差异有统计学意义（P均＜0.05）。见表3。

表3 血清HMGB1、hBD-2对AP患儿发生BO的预测价值

3 讨论

AdV 为腺病毒科哺乳动物腺病毒属，根据其基因和生物特性等分为多个亚属，其中部分AdV 亚型对人类呼吸道有较强的组织嗜性，可侵入肺部导致AP，儿童由于免疫系统功能较弱成为AP 的主要人群［11］。BO 是指细支气管炎性损伤导致的一种以反复或持续气流受阻、呼吸困难为主要表现的慢性气流受限综合征，AP 患儿易发，目前尚无特效治疗药物，常导致患儿出现严重呼吸窘迫甚至多器官功能不全，严重威胁生命安全［12］。

HAdV 感染引起气道上皮细胞损伤并释放炎性介质和募集炎症细胞，可引起免疫细胞异常活化、浸润，导致炎症反应增强促进BO 发生［13］。HMGB1 是真核细胞内广泛存在的一种非组蛋白结合蛋白。生理状态下HMGB1 能充当DNA 伴侣在细胞核内结合染色质，以维持基因组稳定和DNA 损伤修复；当细胞受到刺激和损伤坏死时HMGB1 能主动或被动释放至细胞外，胞外HMGB1能特异性结合RAGE激活多条炎症信号通路，促进炎症发生发展［14］。既往研究证实，HMGB1 在HAdV 感染后表达上调，能结合RAGE 激活核因子-κB（NF-κB）信号通路，增强肺部炎症损伤［15］。同时研究结果显示，抑制HMGB1/Toll样受体4（TRL4）/NF-κB 信号通路可缓解哮喘模型气道炎症［16-17］。血清HMGB1 水平升高能激活TRL4/NF-κB 信号通路，增强细支气管上皮细胞炎症反应，刺激胶原沉积、纤维增殖、组织重构等导致BO发生［18］。

hBD-2 是人体内首个被发现的诱导性抗菌肽，受到感染炎症刺激后能迅速被激活以趋化免疫细胞发挥免疫功能［19］。既往研究指出，hBD-2 在HAdV感染后过表达，并能够调控炎症反应参与支气管肺发育不良［20］。ROSS 等［21］报道，hBD-2 在气道炎症条件下大量表达，能招募未成熟的CD34 树突状细胞和记忆T 淋巴细胞引发适应性免疫反应。hBD-2 作为一种诱导性抗菌肽，在受到炎症刺激时被激活且大量表达，故hBD-2 水平越高反映机体炎症反应越强，BO 发生风险也就越高。同时研究指出，人气管支气管上皮中大量表达的hBD-2 还能与TRL4 复合以激活NF-κB信号通路，从而促进促炎因子表达［22］，增强细支气管上皮细胞炎症反应导致BO 发生风险增加。

总之，AP 患儿血清HMGB1、hBD-2 水平升高与BO发生密切相关，为AP患儿发生BO的独立危险因素，血清HMGB1、hBD-2 水平联合检测对AP 患儿发生BO的预测价值较高。