金贝散结颗粒制粒工艺研究

余利珊，袁伟彬，吴涵

广州中医药大学第三附属医院药学部，广东 广州 510378

中药颗粒剂是在中医理论指导下，遵循传统用药经验，以临床疗效为向导，结合现代制药技术对中药材及饮片进行特殊加工的一种新剂型，其具有质量稳定、用药依从性高，携带、保存方便等优点。金贝散结颗粒处方是根据广州中医药大学第三附属医院妇科李坤寅教授的临床经验方拟定，方由生牡蛎、荔枝核、鸡内金、青皮等组成，有行气散结、活血化瘀、软坚化结的功效。目前，广州中医药大学第三附属医院妇科临床多用其治疗寒凝血瘀、痰瘀互结、阻滞经络所致子宫肌瘤、乳腺增生、卵巢囊肿等疾病，疗效突出，患者用药后反馈良好。本研究为了服药方便，提高患者服药依从性，便于携带和保存，考虑将汤剂制成颗粒剂。当前，颗粒剂通常采用干法制粒、湿法制粒等方法制备，因湿法制粒的产物具有外形美观、流动性好、耐磨性较强等优点，在中药制剂制备中被广泛应用[1-2]。另外，根据需求不同，颗粒剂可加入不同种类的多种或单一辅料，如稀释剂、粘合剂、分散剂、着色剂以及矫味剂等[3]。故本研究对金贝散结颗粒制备工艺进行研究，筛选出最佳辅料种类和用量，确保质量稳定、疗效确切，从而更好地服务于临床。

1 材料与仪器

1.1 材料生牡蛎（生产批号201101）、荔枝核（生产批号210101）、青皮（生产批号201101）、鸡内金（生产批号210101）、醋鳖甲（生产批号201001）、化橘红（生产批号200301）、浙贝母（生产批号201201）、黄芪（生产批号201101）、续断（生产批号2010001）均购自广州至信中药饮片有限公司，醋莪术（生产批号2103001）、乌药（生产批号2012001）购自岭南中药饮片有限公司。糊精（生产批号20201201，湖南九典宏阳制药有限公司）、可溶性淀粉（生产批号201101，安徽山河药用辅料股份有限公司）和糖粉（生产批号20201105，广州市耀宏食品有限公司），95%乙醇（生产批号20210104，天津市大茂化学试剂厂）。

1.2 仪器设备千分之一分析天平（JA1103，上海民桥电子仪器厂），恒温烘箱（DHG-9140，上海科哲生化科技有限公司），旋转蒸发仪冷却循环系统（RC 2B SO25，IKA 集团），标准样筛（浙江上虞市道墟五四仪器沙筛厂）。

2 方法与结果

2.1 中药清膏的制备处方：生牡蛎30 g，荔枝核20 g，醋莪术、浙贝母、黄芪、醋鳖甲、续断、乌药各15 g，鸡内金、化橘红、青皮各10 g。根据处方准确称取：生牡蛎3 g，荔枝核2 g，醋莪术、浙贝母、黄芪、醋鳖甲、续断、乌药各1.5 g，鸡内金、化橘红、青皮各1 g。置圆底烧瓶，每次加5 倍水，加热回流提取3 次，时间分别为1 h、45 min、45 min，合并提取液，置蒸发皿中浓缩至相对密度约为1.10，停止加热，放冷，加入适量95%乙醇，快速搅拌，使含醇量达到55%，置阴凉间静置48 h，取上清液，至旋转蒸发仪回收乙醇至提取液无醇味，提取液继续浓缩至相对密度1.30～1.35（测定温度50～60 ℃），待用。

2.2 湿法制粒根据实验设计，取2.1 项下的清膏与辅料糊精、淀粉和糖粉混合均匀，以乙醇作为湿润剂，适量喷洒，直至软材达到“手握成团，轻触即散”的状态，用14 目筛手动挤压制粒，置恒温烘箱65 ℃干燥2.5 h，用于指标测定。

2.3 测定指标参考文献[4-5]，通过成型率、堆密度、休止角3 项指标来评价成型颗粒的质量，运用加权评分法分析实验结果，定义成型率加权系数为0.4，休止角、堆密度加权系数分别为0.3，加权总评分值=（成型率/最大成型率×0.4+最小休止角/休止角×0.3+堆密度/最大堆密度×0.3）×100。

2.3.1 成型率测定依据中国药典，采用双筛分法[6]，将干燥后的颗粒收集称重，记m1；先过一号筛，将全部通过一号筛的颗粒再过五号筛，收集能过一号筛不能过五号筛的颗粒，称重，记为m2。颗粒的成型率（%）=m1/m2×100%。

2.3.2 堆密度测定参考文献[7]，准确称取样品颗粒10 g，置于干燥的25 mL 量筒中，轻敲震动一定时间，使颗粒体积不再变化，读出其体积毫升数（mL），记为v。堆密度（g/mL）=10/v。

2.3.3 休止角测定采用固定漏斗法[8]测定休止角。利用铁架台，将3 只相同干燥玻璃漏斗串联固定，前两个漏斗的出口端口要接触到下一个漏斗的壁上，使颗粒可以连续滑落，最下面漏斗的出口设置离桌面2 cm，桌面上铺好画有刻度的坐标纸，将试验制备好的颗粒缓慢匀速从最上面的漏斗加入，观察下面颗粒的堆积高度，直到颗粒的顶部接触到最下面的漏斗口时停止。测量坐标纸上圆锥形颗粒的底部直径，计为L。休止角α 按公式计算，tanα=4/L。

2.4 辅料用量筛选辅料的用量，应根据清膏的相对密度、黏性强弱相应作出调整。选择清膏与辅料配比分别为1∶1、1∶2、1∶3，用2.2 项下方法制粒，并进行评价。结果显示，当辅料为单一品种时，不管是以糊精还是糖粉做辅料，清膏与辅料比例小于1∶3 时，软材都有相似状态：湿度大，黏性大，制粒时粘连筛网，难以制粒。当比例达到1∶3 时，软材湿度达到“手握成团，轻触即散”要求，易通过筛网、制粒容易、颗粒成型率较高。见表1。

表1 辅料用量考察

2.5 辅料种类考察参考文献[9]，水溶性颗粒成型工艺常用的辅料有糊精、糖粉、可溶性淀粉。按照2.4 项下清膏与辅料的比例，改变任意2 种辅料的用量配比，用2.2 项下方法制粒，进行成型状态考察。结果显示，辅料糊精用量配比大时，制得软材硬度大、黏性大、结块、制粒困难、颗粒成型率低。随着糊精用量减少，硬度和黏性均有改善，故选择糖粉和可溶性淀粉作为辅料。见表2。

表2 辅料种类筛选

2.6 正交试验

2.6.1 正交设计根据2.4、2.5 项下结果，以清膏∶辅料、辅料A（可溶性淀粉）∶辅料B（糖粉）、乙醇浓度、乙醇用量（乙醇重量∶辅料重量）为考察因素，进行四因素三水平L9（43）正交试验，设计表见表3。

表3 正交设计表

2.6.2 正交试验结果见表4。按正交设计工艺依次进行试验，计算综合得分。

2.6.3 正交数据处理正交试验的结果采用SPSS17.0软件处理数据，对正交结果进行直观分析和方差分析，直观分析见表5～8。通过直观分析，可见A3＞A2＞A1、 B1＞B3＞B2、 C3＞C1＞C2、 D3＞D1＞D2。方差分析显示，因素A、B、C、D 的P值均小于0.05，故最佳组合是A3B1C3D3。因为A2 与A3均值分别是87.332 与88.571，差异不大，从含药量角度考虑，要求尽可能提高含药量，保证疗效，故考虑将浸膏与辅料比例设定为1∶3，即最优工艺组合为A2B1C3D3，即清膏∶辅料为1∶3，辅料A∶辅料B 为1∶1，95%乙醇用量5%。

表6 辅料A∶辅料B（B）

表7 乙醇用量（C）

表8 乙醇浓度（D）

2.7 验证实验见表9。对所确定的制粒工艺参数即清膏∶辅料为1∶3；辅料A∶辅料B 为1∶1；95%乙醇用量为5%的可靠性与重现性进行验证，计算得分，并与正交9 组试验进行比较。验证实验平行制备3 份。结果可见，优选工艺验证试验3 组制得颗粒评价综合得分均高于正交9 组试验，故而优选制粒工艺可靠，且重现性好。

表9 验证试验

2.8 溶化性考察参照2020 年版《中华人民共和国药典》[6]可溶性颗粒检查法，取2.7 项下颗粒3 份，每份10 g，加热水200 mL，搅拌5 min，立即观察，可溶性颗粒全部溶化。

3 讨论

颗粒剂制备工艺直接影响颗粒的成型质量，实验结果表明，金贝散结颗粒工艺为清膏∶辅料为1∶3、辅料A∶辅料B 为1∶1、95%乙醇用量为5%。在此工艺项下制得的颗粒成型率、流动性都是正交各组实验中得分最佳，且溶化性考察符合药典要求，并且通过3 组验证实验，重现性和稳定性都好，故实验所得工艺稳定可靠。

影响颗粒成型的众多因素中，辅料的种类是颗粒剂制粒工艺的关键因素之一。目前，颗粒剂最常用的辅料为糖粉和糊精。本实验中，由表2 直观可得，选取糊精与淀粉或糊精与糖粉作混合辅料时，糊精在辅料中占比越大，制得软材硬度越大，黏性也越大，更易结块，制粒越困难，颗粒成型率越低；随着糊精用量减少，硬度和黏性均有改善。这是因为实验中水提醇沉工艺下，醇沉乙醇浓度低，所得清膏中仍然含有大部分的多糖和鞣质、蛋白质等物质，黏性非常大，而糊精是淀粉的水解产物，黏性比其他辅料都大很多，故而导致制得软材黏、硬结，达不到制粒要求，因此不选择糊精作为本实验的辅料。而可溶性淀粉的流动性较好、粘性较小，故而用可溶性淀粉为辅料之一。中药颗粒剂的制备中，辅料的用量和种类可根据清膏的相对密度、黏性强弱做适当调整，一般清膏、辅料比例为1∶4，辅料总量一般不超过清膏量的5 倍。本实验结果表明，从含药量角度考虑，在颗粒成型性好的前提下，辅料用量越少，含药量越高。当实验中清膏∶辅料为1∶3 时，制粒成型率高，选择清膏与辅料的比例在1∶3 左右进行正交试验。

水提醇沉是颗粒剂制备过程中纯化的关键步骤，所用醇沉的乙醇浓度极大地影响有效成分的含量。因金贝散结颗粒处方中有牡蛎、鳖甲、鸡内金，其有效成分无机盐和蛋白质与疗效密切相关。有实验表明，当含醇量为50%～60%时可除去淀粉等杂质；含醇达60%时，无机盐开始被沉淀[10]。故本实验醇沉工艺乙醇浓度设定为55%，既能沉淀大量淀粉提高含药量，又能尽可能保存无机盐、蛋白质等有效成分，保证疗效。醇沉操作时，应将乙醇缓慢加入清膏中，并快速搅拌，避免有效成分被杂质颗粒包裹而被一起沉出，影响药效。在生产中，水提醇沉操作时，调整清膏乙醇含量时，常规操作是将一定浓度的乙醇加入清膏中，搅拌均匀静止后用乙醇计测定乙醇浓度。但是，因为乙醇计的使用标准温度为20 ℃，测量药液乙醇浓度时，如果温度不是20 ℃，就必须作温度校正[11]。因而用乙醇计直接在含醇的药液中直接测量的方法不太方便且有误差。同时考虑到实际生产中对清膏和浓乙醇体积的用量取法很不方便，因而本实验基于生产操作便利，乙醇用量改以重量计，以乙醇与辅料总重的比例设置正交试验。

因实验室条件限制，未对现有的不同的制粒方法进行考究，只选取了最常用的湿法制粒来研究。金贝散结颗粒湿法制粒的最佳工艺为清膏∶辅料为1∶3、辅料A∶辅料B 为1∶1、95%乙醇用量为5%。后期应继续完善干法制粒、喷雾制粒等制粒方法的工艺筛选，进行对比实验。