艾滋病合并机会性感染患者血清内毒素、淀粉样蛋白、CD4+T细胞水平变化及其与病毒载量的关系

栾伶俐 于保平 李苏华 河南省项城市第一人民医院感染二科 466200

艾滋病是人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的慢性传染性疾病,会造成患者免疫功能缺陷,增加对机会性感染的易感性[1]。艾滋病合并机会性感染是患者就诊及死亡的重要原因,临床表现复杂且无典型性,诊断难度高,治疗效果差。因此,早期检测及诊断艾滋病合并机会性感染对改善患者预后具有重要价值。机会性感染病原谱中真菌及细菌感染较为常见,对艾滋病合并机会性感染患者进行内毒素(Endotoxin,ETX)检测有利于诊断不同感染性疾病。有报道显示,淀粉样蛋白(Serum amyloid A,SAA)在艾滋病合并感染疾病中表达水平升高[2]。既往研究显示,CD4+T细胞及HIV病毒载量是临床判断艾滋病病情严重程度、预计疾病进展及评估疗效的参考指标[3]。本文检测艾滋病合并机会性感染患者血清ETX、SAA、CD4+T细胞水平,分析其与病毒载量的关系,以期为诊疗提供参考,现报告如下。

1 对象与方法

1.1 观察对象 选取我院2019年3月—2021年9月103例艾滋病患者作为观察对象。(1)纳入标准:①符合《中国艾滋病诊疗指南》[4]中诊断标准,HIV抗体试验阳性,并经蛋白印迹试验确证;②年龄不低于18岁;③首次确诊;④近期未接受抗病毒及免疫调节剂治疗;⑤临床资料完整;⑥思维及精神正常,能完成相关检查。(2)排除标准:①合并原发性免疫功能缺陷、恶性肿瘤者;②合并慢性阻塞性肺疾病、高血压及糖尿病等基础性疾病者;③肾、心、肺等器官严重损伤者;④急性或慢性疾病感染者;⑤妊娠或哺乳期妇女;⑥认知功能严重障碍者。根据机会性感染情况分为感染组(n=48)及非感染组(n=55),两组一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),见表1。机会性感染诊断标准标准参考《中国艾滋病诊疗指南》[4]中机会性感染诊断标准。本研究经医院伦理委员会批准,所有患者均知情并签署同意书。

表1 两组患者一般资料比较

1.2 方法

1.2.1 血清ETX、SAA、CD4+T细胞水平检测:于入院当日采集所有患者两份静脉血样本,其中一份以普通采血试管收集,在3 000r/min速率下离心10min,取上清液待测,使用鲎试剂动态浊度法检测血清ETX水平(试剂盒购于英国Abcam公司),采用免疫透射比浊法检测SAA水平。另一份样本使用含有EDTA抗凝管收集,并采用美国贝克曼库尔特公司生产的Cyto FLEX型全血流式细胞仪检测CD4+T细胞水平。

1.2.2 病毒载量检测:于入院当日取感染组患者EDTA-K2抗凝全血,以3 000r/min离心10min,分离血浆,采用Roche公司生产的OBASAmpliPrep/COBAS TapMan病毒载量仪检测血浆样本中HIV RNA表达量,严格按照说明书操作规范进行,病毒载量拷贝数取绝对值(log/ml)。感染组患者根据HIV RNA表达量分为低拷贝组(<103copies/ml)、中拷贝组(103～105copies/ml)、高拷贝组(>105copies/ml)。

2 结果

2.1 感染组及非感染组血清ETX、SAA、CD4+T细胞水平比较 感染组血清ETX、SAA水平均高于非感染组,CD4+T细胞水平低于非感染组,差异有统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 感染组及非感染组血清ETX、SAA、CD4+T细胞水平比较

2.2 血清ETX、SAA、CD4+T细胞水平对艾滋病合并机会性感染的诊断价值 由ROC曲线可知,血清ETX、SAA、CD4+T细胞水平联合诊断艾滋病合并机会性感染的AUC为0.900,高于三者单独诊断的0.739、0.748、0.752,差异有统计学意义(P<0.05),见图1及表3。

图1 血清ETX、SAA、CD4+T细胞水平诊断艾滋病合并机会性感染的ROC曲线

表3 血清ETX、SAA、CD4+T细胞水平对艾滋病合并机会性感染的诊断价值

2.3 不同病毒载量艾滋病合并机会性感染患者血清ETX、SAA、CD4+T细胞水平比较 高拷贝组血清ETX、SAA水平均高于中拷贝组和低拷贝组,CD4+T细胞水平低于中拷贝组和低拷贝组,差异有统计学意义(P<0.05);中拷贝组血清ETX、SAA水平均高于低拷贝组,CD4+T细胞水平低于低拷贝组,差异有统计学意义(P<0.05),见表4。

表4 不同病毒载量艾滋病合并机会性感染患者血清ETX、SAA、CD4+T细胞水平比较

2.4 血清ETX、SAA、CD4+T细胞水平与艾滋病合并机会性感染患者病毒载量的相关性 艾滋病合并机会性感染患者血清ETX、SAA水平与病毒载量呈正相关(r=0.531、0.653,P均<0.001),CD4+T细胞水平与病毒载量呈负相关(r=-0.586,P<0.001)。

3 讨论

艾滋病患者并非直接死于HIV感染,而多由其他并发疾病诱发死亡,其中又以机会性感染最居多。艾滋病合并机会性感染具有混合性、多样性及难治性等特点,临床表现不典型,诊断难度大。及早诊断艾滋病合并机会性感染、明确机会性感染类型对指导后续治疗、改善患者尤为重要。

ETX是革兰氏阴性菌细胞壁结构中的脂多糖,其水平变化对诊断细菌性感染及评估预后具有重要意义。SAA主要由肝细胞分泌,正常血液中含量极少,机体发生炎症反应、大面积组织损伤时其水平升高,特别是病毒或细菌感染后8～24h迅速升高。报道显示,SAA水平随病情进展而变化迅速,在艾滋病合并机会性感染中呈高表达[5]。临床研究发现,HIV侵犯免疫系统后CD4+T细胞、树突细胞及巨噬细胞明显减少,免疫功能处于异常状态[6]。尹科等[7]认为,随着机会性感染时间的增加,CD4+T细胞功能损伤加剧,加重细胞免疫功能缺陷。本研究中,感染组血清ETX和SAA水平均高于非感染组,CD4+T细胞水平低于非感染组,与前述研究结果一致[5-6]。ROC曲线显示,血清ETX、SAA、CD4+T细胞水平诊断艾滋病患者机会性感染的AUC为0.739、0.748、0.752,提示三者对艾滋病合并机会性感染均有一定的诊断价值,但三者联合诊断的AUC高达0.900,表明三者联合能优势互补,提高诊断价值。

HIV病毒载量能反映艾滋病患者体内的病毒复制情况,判断治疗效果,是制定及调整诊疗方案的参考指标[8]。本研究中,高拷贝组血清ETX和SAA水平均高于中拷贝组和低拷贝组,CD4+T细胞水平低于中拷贝组和低拷贝组,提示血清ETX、SAA、CD4+T细胞水平与病毒载量存在密切关系。HIV病毒载量高低代表了体内病毒复制的数量,HIV复制数量越多,免疫功能在病毒间接或直接作用下的损伤越严重,机体炎症反应加剧,血清ETX、SAA水平升高,破坏CD4+T细胞数目也越多,残留的CD4+T细胞越少。进一步相关性分析结果显示,艾滋病机会性感染患者血清ETX、SAA水平与病毒载量呈正相关,CD4+T细胞水平与病毒载量呈负相关,也证实了三者与艾滋病合并机会性感染患者病毒载量存在相关性。

综上所述,艾滋病机会性感染患者血清ETX及SAA水平升高、CD4+T细胞水平降低,三者与病毒载量存在相关性,可作为诊断艾滋病患者机会性感染的参考指标。