不同认知障碍程度和疗效青少年抑郁症患者miR-381-3p、miR-124检测的临床意义

杨振国 陈秀芳 曹世林 汪斌 褚睿 郑春美

抑郁症是一种以情绪低落、思维迟缓、意志活动减退为主的心境障碍，而青少年抑郁症是慢性的、消长变化的过程，持续到成年的风险是正常人的2～4倍[1]。青少年抑郁症患者不仅可出现情绪障碍，也可发生认知障碍，以脑功能全面受损为主，是患者在缓解期仍不能恢复正常社会功能的主要原因[2]。及时评估患者认知障碍严重程度和治疗效果，对患者治疗方案的调整以及后期生活质量的改善均有积极作用。近年来研究发现，miRNA 在抑郁症的发生、发展过程中发挥着重要作用[3]。miR-381-3p、miR-124 是miRNA 家族成员之一，其中miR-381-3p 沉默可保护神经元，对减轻抑郁症患者神经元损伤具有积极作用，或可成为治疗抑郁症的潜在靶点[4]；而miR-124 表达可影响神经元细胞DNA 转录，导致神经元氧化应激反应增加，促进脑功能损伤，在抑郁症患者中的表达明显上调[5]。本研究就miR-381-3p、miR-124 检测对青少年抑郁症患者认知障碍严重程度评估和临床疗效的预测价值作一探讨，以期为临床诊治提供参考，现将结果报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象 选取2020 年1 月至2022 年4 月绍兴市第七人民医院收治的86 例青少年抑郁症患者为研究对象，男49 例，女37 例；年龄12～18（15.49±1.36）岁；病程（6.39±2.13）个月；入院时简易精神状态检查量表评分＜27 分[6]（认知障碍组）31 例，包括轻度14 例、中度12 例和重度5 例；≥27 分（无认知障碍组）55 例。认知障碍组与无认知障碍组患者性别、年龄、病程等一般资料比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05），见表1。纳入标准：（1）抑郁症的诊断符合《精神病诊断与统计手册（第5 版）》相关标准[7]，并结合临床症状、病史等确诊；（2）年龄12～18 岁；（3）入院时汉密尔顿焦虑量表（Hamilton anxiety scale，HAMA）评分≥14 分，汉密尔顿抑郁量表（Hamilton depression scale，HAMD）评分＞17 分[8]；（4）入院前未接受过相关治疗，均为首次发病。排除标准：（1）临床资料不完整；（2）患有其他严重的精神疾病或器质性疾病；（3）因药物、酒精等物质滥用导致的精神障碍；（4）因外伤导致的精神障碍或认知障碍。本研究经绍兴市第七人民医院医学伦理委员会审查通过（批准文号：2019-003-01），所有患者或家属知情同意。

表1 认知障碍组与无认知障碍组患者一般资料比较

1.2 治疗方法 根据患者抑郁程度给予针对性的心理干预、认知疗法、重复经颅磁刺激疗法等，其中心理干预包括鼓励支持、兴趣培养、精神放松、心理想象、冥想等，在此治疗基础上，均予草酸艾司西酞普兰（规格：10 mg/片，国药准字：H20213259，广东东阳光药业有限公司）口服治疗，初始剂量10 mg/d，1周后改为20 mg/d；同时予奥氮平（规格：5 mg/片，国药准字：H20213319，成都苑东生物制药股份有限公司）口服治疗，初始剂量2.5 mg/d，1 周后改为5 mg/d。治疗3 个月为1 个疗程。

1.3 miR-381-3p、miR-124 相对表达量检测 采用RT-PCR法。治疗前抽取患者空腹静脉血3 mL，使用低速离心机进行离心，获得血清后待检。取300 μL血清标本，使用Trizol 总RNA 试剂盒（美国Thermo Scientific 公司）提取样本总RNA，并将总RNA 反转录为cDNA。然后使用RT-PCR 仪（山东博科科学仪器有限公司）进行反应，以甘油醛-3-磷酸脱氢酶为内参基因，采用2-ΔΔCt法计算miR-381-3p、miR-124相对表达量。

1.4 疗效评估 治疗3 个月后评估疗效，HAMA 评分≥7 分或HAMD 评分≥8 分认定为疗效不佳，HAMA 评分＜7分或HAMD评分＜8分认定为疗效良好[9]。HAMA共包含14 个项目，评分越高提示焦虑程度越严重；HAMD共包含17个条目，评分越高提示抑郁程度越严重。

1.5 统计学处理 采用SPSS 20.0 统计软件。计量资料以表示，两组间比较采用两独立样本t检验；多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用SNK-q检验。miR-381-3p、miR-124 单独或联合检测对临床疗效的预测效能采用ROC 曲线分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 认知障碍组与无认知障碍组患者miR-381-3p、miR-124 相对表达量比较 认知障碍组患者miR-381-3p 相对表达量明显低于无认知障碍组，miR-124相对表达量则明显高于无认知障碍组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表2。

表2 认知障碍组与无认知障碍组患者miR-381-3p、miR-124 相对表达量比较

2.2 不同程度认知障碍患者miR-381-3p、miR-124 相对表达量比较 不同程度认知障碍患者miR-381-3p、miR-124 相对表达量比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05），其中miR-381-3p 相对表达量为轻度＞中度＞重度（均P＜0.05），miR-124 相对表达量为重度＞中度＞轻度（均P＜0.05），见表3。

表3 不同程度认知障碍患者miR-381-3p、miR-124 相对表达量比较

2.3 不同疗效患者miR-381-3p、miR-124 相对表达量比较 治疗3 个月后评估疗效，结果显示疗效良好66例，疗效不佳20 例。疗效不佳组miR-381-3p 相对表达量明显低于疗效良好组，miR-124 相对表达量则明显高于疗效良好组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表4。

表4 不同疗效患者miR-381-3p、miR-124 相对表达量比较

2.4 miR-381-3p、miR-124 单独或联合检测对临床疗效的预测效能 miR-381-3p、miR-124 单独预测患者临床疗效的AUC 分别为0.719、0.695，两者联合预测的AUC 为0.782，两者联合检测的效能明显高于单独检测（均P＜0.05），见表5 和图1。

图1 miR-381-3p、miR-124 单独或联合预测临床疗效的ROC曲线

表5 miR-381-3p、miR-124 单独或联合检测对临床疗效的预测效能

3 讨论

临床上认为抑郁症的发生与生物、环境等因素有关，抑郁症早期患者可表现出思维迟缓、心境低落等症状，但随着疾病的进展，患者自伤和自杀发生率明显升高[10]。吴祖勤等[11]研究发现，青少年的认知功能仍处于发育阶段，当发生抑郁症时可对患者认知功能产生不良影响，若合并认知障碍有可能影响患者后期恢复。因此，寻找一种评估患者认知障碍严重程度及预测临床疗效的有效指标，对于临床早期干预与指导治疗具有重要意义。

miRNA 在人体内具有基因调控的作用，在脑组织中表达丰富，可维持神经元功能，同时调节神经的可塑性，促进神经再生。临床研究发现，miRNA 与神经元细胞生长发育、中枢神经炎症反应、突触可塑性等一系列病理及生理过程密切相关。张振华等[12]研究表明，miRNA 与认知障碍的发生密切相关。许鑫等[13]通过建立术后认知障碍小鼠模型，以分析小鼠海马miRNA 表达变化及生物信息，结果显示小鼠海马22 个miRNA 存在差异表达，这些miRNA 可能与术后认知障碍的发病机制有关。本研究结果显示，认知障碍组miR-381-3p 相对表达量明显低于无认知障碍组，而miR-124 相对表达量则高于无认知障碍组，且miR-381-3p 相对表达量随着认知障碍严重程度的增加而降低，而miR-124 相对表达量随着认知障碍严重程度的增加而升高。可见，miR-381-3p、miR-124 相对表达量异常与患者认知障碍密切相关，或可成为评估患者认知功能损伤的参考指标[14-15]。李世利等[16]研究发现，认知障碍的发生与神经胶质细胞激活、海马区促炎细胞表达有关，而miR-381-3p 可靶向调控脑源性神经营养因子，过表达miR-381-3p 可促进脑源性神经营养因子相对表达，从而保护神经元，减轻皮质酮对神经元的损伤。miR-124 的表达上调后可激活NF-KB 信号通路，参与神经元细胞代谢微环境的损害过程，影响其修复能力。

有研究指出，miRNA 可调节蛋白质合成、细胞分化，并重塑神经元结构，从而参与抑郁症的发生、发展过程中[17]。miR-124 在脑组织中表达丰富，可通过降低糖皮质激素受体活性，抑制脑圆形生长因子生长，同时可重塑海马神经结构，影响机体5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）释放，继而引发抑郁症[18]。临床发现首发抑郁症患者miR-124 相对表达量明显增加，且与治疗效果关系密切，对患者诊疗具有重要参考价值[19]。miR-381-3p 可保护神经元，对减轻抑郁症患者神经元损伤具有积极作用[20]。黄文武等[21]研究显示，特异性沉默miR-381-3p 可能通过调节脑源性神经营养因子/磷酸化细胞外信号调节激酶信号通路和磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B 信号通路的蛋白而调控神经细胞凋亡、增殖、迁移、侵袭，进而改善抑郁症大鼠海马神经细胞生物学的异常行为。张茹等[22]评估乌灵胶囊干预抑郁症效果的研究显示，抑郁症患者使用乌灵胶囊治疗有效者miR-381-3p 表达高于无效者，提示miR-381-3p 高表达在保护海马神经元、减轻抑郁症认知损伤中发挥关键作用。本研究结果显示，疗效不佳组miR-381-3p 相对表达量低于疗效良好组，miR-124相对表达量则高于疗效良好组；分析原因可能与miR-381-3p 降低、miR-124 升高促进5-HT 转运体产生，从而抑制5-HT产生，进而加重患者焦虑、抑郁情况，影响抗抑郁效果，导致临床疗效差有关[23]。本研究进一步绘制ROC曲线发现，miR-381-3p、miR-124检测对患者临床疗效均有一定的预测价值，提示在临床治疗中对于miR-381-3p 相对表达量降低、miR-124 相对表达量升高的患者需考虑改变治疗方式。相对于单独预测，miR-381-3p、miR-124联合检测的预测效能更高。

综上所述，miR-381-3p 与miR-124 联合检测有助于青少年抑郁症患者认知障碍严重程度的评估和疗效预测。