血管内皮生长因子、凝血功能指标与食管癌患者预后的关系

朱红艳，胡恩亮，白云，王海峰#

1西安市第三医院检验科，西安 710016

2空军军医大学第一附属医院检验科，西安 7100320

食管癌是常见的消化系统肿瘤，中国是世界上食管癌的高发国家之一，其发病率居所有恶性肿瘤第六位，病死率居所有恶性肿瘤第四位[1]。食管癌发病主要与遗传、生活习惯、癌前病变等有关，但早期食管癌多无特异性症状，确诊时多已进展至中晚期，增加治疗难度，且影响预后转归。因此，寻找有效的评估食管癌进展及预后的指标具有重要意义。在临床实践中，肿瘤标志物检测是评估肿瘤患者临床分期和预后的重要方法。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）作为一种血管通透因子，具有促进新生血管生成的作用，且可抑制肿瘤进展，临床公认其与食管癌细胞侵袭、转移密切相关[2]。研究表明，凝血功能指标异常表达是恶性肿瘤常见的临床表现，其水平会随着恶性肿瘤细胞侵袭、转移而不断升高[3]。但目前国内外探讨凝血功能与肿瘤患者预后关系的研究较少[4]。因此，本研究探讨血清VEGF、凝血功能指标与食管癌患者预后的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019 年7 月至2021 年1 月西安市第三医院收治的食管癌患者。纳入标准：①符合《食管癌规范化诊疗指南》[5]中关于食管癌的诊断标准，经病理学、影像学检查确诊；②未合并血液系统疾病；③病历资料完整。排除标准：①合并心理障碍或精神疾病，不能正常沟通交流；②合并其他器官严重功能障碍。依据纳入和排除标准，本研究共纳入106 例食管癌患者，其中男75 例，女31 例；年龄44～78 岁，平均（62.63±5.66）岁；病理类型：鳞状细胞癌103 例，腺癌3 例；分化程度：低分化19 例，中分化43 例，高分化44 例；体重指数（body mass index，BMI）24～27 kg/m2，平均（25.63±3.74）kg/m2；依据国际抗癌联盟（International Union Against Cancer，UICC）[6]制定的第7 版食管癌TNM 分期标准进行分期：Ⅰ期17 例，Ⅱa 期25 例，Ⅱb 期9 例，Ⅲ期36 例，Ⅳ期19 例，将Ⅰ、Ⅱa 期作为早期（n=42），Ⅱb～Ⅳ期作为中晚期（n=64）。选取同期在西安市第三医院体检中心进行健康体检的99 例健康体检者，其中男70 例，女29 例；年龄42～76 岁，平均（61.95±5.42）岁；BMI 为24～28 kg/m2，平均（25.08±3.52）kg/m2。食管癌患者和健康体检者性别、年龄、BMI 比较，差异均无统计学意义（P﹥0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准通过，所有患者均知情同意。

1.2 检测方法

健康体检者于体检当日、食管癌患者于入院第2 天清晨，抽取空腹静脉血5 ml，3500 r/min 离心15 min，取上清，-20 ℃冰箱保存待检。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测不同受试者VEGF 水平，采用全自动凝血分析仪检测不同受试者凝血功能指标，包括凝血酶时间（thrombin time，TT）、凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、活化部分凝血活 酶 时 间（activited partial thromboplastin time，APTT）、纤维蛋白原（fibrinogen，FIB）、D-二聚体（D-dimer，D-D）。

1.3 随访

食管癌患者出院后，采用电话、上门等方法进行为期12 个月的随访，随访时间截至2022 年6月，记录患者的预后情况，将出现局部复发、远处转移判定为预后不良，无复发转移判定为预后良好。

1.4 统计学方法

采用SPSS 21.0 软件对所有数据进行统计分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验；计数资料以例数和率（%）表示，组间比较采用χ2检验；食管癌患者预后不良的影响因素采用多因素Logistic 回归分析；以P﹤0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同受试者VEGF、凝血功能指标的比较

食管癌患者VEGF、FIB、D-D 水平均明显高于健康体检者，差异均有统计学意义（P﹤0.01）；食管癌患者和健康体检者PT、APTT、TT 比较，差异均无统计学意义（P﹥0.05）。（表1）

表1 不同受试者VEGF、凝血功能指标的比较

2.2 不同分期食管癌患者VEGF、凝血功能指标的比较

中晚期食管癌患者VEGF、FIB、D-D 水平均明显高于早期患者，差异均有统计学意义（P﹤0.01）；早期和中晚期食管癌患者PT、APTT、TT 比较，差异均无统计学意义（P﹥0.05）。（表2）

2.3 食管癌患者预后不良影响因素的单因素分析

随访12 个月，106 例食管癌患者预后良好83例，预后不良23 例。预后良好与预后不良食管癌患者性别、年龄、病变部位、PT、APTT 及TT 比较，差异均无统计学意义（P﹥0.05）。预后良好与预后不良食管癌患者肿瘤直径、分化程度、淋巴结转移情况、TNM 分期、VEGF 水平、FIB 水平、D-D 水平比较，差异均有统计学意义（P﹤0.01）。（表3）

表3 食管癌患者预后不良影响因素的单因素分析

2.4 食管癌患者预后不良影响因素的多因素分析

将单因素分析中差异有统计学意义的肿瘤直径、分化程度、淋巴结转移情况、TNM 分期、VEGF水平、FIB 水平、D-D 水平作为自变量，食管癌患者的预后作为因变量，纳入多因素Logistic 回归分析，结果显示，肿瘤直径﹥3 cm、分化程度为低分化、淋巴结转移、TNM 分期为中晚期、VEGF﹥23 ng/L、FIB﹥4 g/L、D-D≥8 μg/L 均是食管癌患者预后不良的独立危险因素（P﹤0.05）。（表4）

表4 食管癌患者预后不良影响因素的多因素Logistic回归分析

3 讨论

食管癌是常见恶性肿瘤，原发于食管黏膜上皮，其发病隐匿，早期症状不明显，易与其他疾病相混淆，确诊时多已进展为晚期[7]。随着肿瘤细胞的不断浸润，肿瘤细胞极有可能扩散至食管壁或超出该范围，对邻近器官造成侵犯。因此，如何准确评估肿瘤进展，从而改善患者的预后有重要意义。

沿着分子生物学研究的探索，临床认为肿瘤细胞生长、侵袭、转移均需保证有效的血液供应，与新生血管生成、肿瘤微环境密切相关[8]。有研究认为，VEGF、炎症因子、肿瘤坏死因子在肿瘤发生、发展过程中有重要作用，因此，了解血清细胞因子与食管癌发生发展的关系对临床治疗食管癌有一定的参考价值[9]。VEGF 是一种具有高度生物活性的功能性糖蛋白，对新生血管生成有重要作用，同时可以促进血管内皮细胞的增殖和迁移等[10]。有研究指出，VEGF 水平偏高提示可能存在肺腺癌、胃癌等恶性肿瘤[11]。本研究结果显示，食管癌患者的VEGF 水平明显高于健康体检者，且VEGF 水平随着TNM 分期升高而升高，说明血清VEGF 可作为诊断食管癌及评估病情发展的重要指标。这可能是因为新生血管生成能提供一定营养物质，有利于促进肿瘤细胞生长，为肿瘤细胞的扩散提供支持；而VEGF 作为促血管生成因子，可诱导肿瘤新生血管生成，为肿瘤细胞生长提供条件；且VEGF 可降解细胞基质，减小屏障，利用渗透作用促使肿瘤细胞快速进入血液循环，进一步推动肿瘤细胞的浸润转移。此外，肿瘤细胞转移是恶性肿瘤患者死亡的主要原因之一，而淋巴结转移是肿瘤细胞转移的关键环节[12]。有研究显示，预后良好的食管癌患者VEGFC 水平较低，这可能是因为VEGFC 高表达会促进新生淋巴管生成，从而导致肿瘤细胞发生淋巴结转移[13]。另有研究显示，VEGF 水平升高与食管癌患者的生存率较低有一定关系[14]。本研究结果显示，VEGF﹥23 ng/L 是食管癌患者预后不良的独立危险因素，表明VEGF 水平与食管癌患者的预后密切相关，高VEGF 水平代表其预后情况可能不佳。

近年来，临床已经公认肿瘤患者存在凝血功能障碍，肿瘤细胞通过多种机制破坏机体凝血、抗凝系统，导致患者凝血功能出现不同程度的异常，从而引发血液高凝状态，易并发血栓性疾病[15]。王娇等[16]研究显示，食管癌患者凝血功能异常，血液呈高凝状态，且与肿瘤患者临床分期、年龄具有相关性。FIB 是一种急性时相反应蛋白，当机体发生感染、肿瘤、心肌梗死时，FIB 水平升高。研究表明，FIB 可作为肿瘤细胞生长和转移的支架，FIB、血小板及肿瘤细胞可形成微血栓，前两者可协调保护肿瘤细胞免受免疫攻击。D-D 是最简单的纤维蛋白降解产物[17]，目前认为，D-D 水平升高与肿瘤有一定联系，这可能是因为肿瘤细胞易释放促凝物质，而大量促凝物质释放至血液极易导致凝聚、血栓。有研究提出，D-D 水平升高表明机体存在高凝状态、继发性纤维蛋白亢进，故认为D-D 水平升高与淋巴结转移及患者的预后有关[18]。本研究结果显示，中晚期食管癌患者FIB、D-D 水平均明显高于早期患者，且FIB﹥4 g/L、D-D≥8 μg/L 均是食管癌患者预后不良的独立危险因素，表明FIB、D-D对食管癌疾病进展、预后评估具有重要意义，与李攀等[19]的研究结果一致。这可能是因为凝血因子可与肿瘤细胞相互作用，具有促凝活性；且由于肿瘤患者免疫功能下降、器官受损等影响了凝血因子的合成，使获得性凝血因子缺乏，存在继发性出血风险，相反，患者凝血系统发生改变可能对肿瘤的预后造成影响。表明凝血功能指标变化会影响肿瘤患者的预后。但本研究结果显示，不同预后情况食管癌患者PT、APTT、TT 比较，差异均无统计学意义（P﹥0.05），这可能与本研究纳入的样本量较少有关。

综上所述，血清VEGF、FIB、D-D 水平与食管癌患者的预后有关，定期检测上述指标对评估食管癌疾病进展、改善预后有重要意义。