饲料中添加复方中草药对虹鳟幼鱼生长及免疫指标的影响

玄一凡，张艺川，魏凌俊，王茂林

(大连海洋大学，辽宁省北方鱼类应用生物学与增养殖重点实验室，辽宁 大连 116023)

虹鳟是一种适应性较广的冷水性鱼，随着养殖规模的不断扩大和集约化水平的不断提高，虹鳟疾病频发。目前，用化学药剂或抗生素药物治疗虹鳟病害存在成本较高、鱼体质减弱、污染养殖水体和周围环境等缺点。针对该问题，虹鳟免疫技术的研究日渐成熟，各种复杂的免疫技术被逐渐运用到虹鳟养殖过程中。在现有技术中，复方草药免疫方案是目前应用较为广泛的一种方法，通过不同草药的组合发挥综合作用，提高虹鳟的整体免疫力，降低虹鳟免疫系统的失调率。复方中草药不仅在提高虹鳟免疫力方面取得了重要成果，而且在防控虹鳟疾病应用上效果显著。中草药具有促生长、无药物残留、增强机体免疫力、来源广泛等优势，被称为“天然抗生素”，作为添加剂应用到饲料产业上具有广阔的前景。本试验将白芷、枸杞、金银花、广藿香、葛根、五味子6种中草药制成复方中草药加到饲料中，探究其对虹鳟幼鱼生长和免疫酶活性的影响。

一、材料与方法

1.试验用饲料

试验分为T1( 对照)、 T2(1% )、 T3(2% )、T4(3%)4组，其中T1组喂基础饲料，基础饲料主要成分见表1。白芷、枸杞、金银花、广藿香、葛根、五味子6种中草药经超微粉碎后等比例混合成复方中草药粉。将复方中草药粉分别按1%、2%、3%的比例(质量分数，下同)添加于基础饲料作为T2、T3、T4组饲料。

表1 基础饲料主要成分%

2.试验用鱼

试验选用体长、体重相近、平均个体重(10.830±0.140)克的健康虹鳟幼鱼144 尾，暂养7天以适应养殖环境，养殖期间投喂基础饲料。

3.试验设计

试验开始前停止喂食24 小时，将144 尾试验用鱼随机分为4 组，T1(对照)组鱼总重量为(129.869±1.271)克，T2(1%)组鱼总重量为(128.836±2.154)克，T3(2%)组鱼总重量为(130.620±2.140)克，T4(3%)组鱼总重量为(130.493±1.670)克；每组3 个平行，每个平行12 尾。将12 个养殖小网箱放在养殖水槽中，用气泵24 小时充气增氧，并增设水泵模拟流水环境，水温12～15℃，溶氧＞6 毫克/升，pH 6.9。养殖周期为30 天，每天8:00 和17:00 投喂饲料，每天投喂饲料至表观饱食。每天19:30清理剩余饲料及粪便，同时换水，换水量约为1/2。

4.样品采集

试验结束后，停食24 小时，每组随机选取3 尾，取肝脏组织置于离心管中(在低温下操作)，标记后于-80℃冰箱中保存。

5.生长指标及酶活指标测定

取样前称重，用于计算终末均重、特定生长率；免疫酶的测定包括过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)，上述指标试剂盒均采购于南京建成生物工程研究所有限公司，按说明书操作进行测定。

二、结果与分析

1.复方中草药对虹鳟生长指标的影响(表2)

表2 饲料中添加复方中草药对虹鳟幼鱼各项生长指标的影响

由表2可知，各组虹鳟幼鱼的存活率无显著性差异(P≥0.05)，但饲料中添加复方中草药对虹鳟幼鱼其他生长指标影响较为显著(P＜0.05)。T2、T3 和T4 试验组除饲料系数外，其他各项指标均高于T1组(对照组)；其中T3组鱼的终末均重、特定生长率显著高于其他组，而饲料系数显著低于其他组(P＜0.05)；T3和T4组鱼在摄食率上无显著性差异。

2.复方中草药对虹鳟幼鱼免疫指标的影响

试验结果表明，T4组鱼肝脏组织中的CAT活性显著高于T1(对照)、T2 组(P＜0.05)，T3 组与T4 组间无显著性差异。T2、T3 组鱼肝脏组织中的SOD 活性显著高于T1(对照)组(P＜0.05)，T2、T3、T4 组间无显著性差异。T3 组鱼肝脏组织中的T-AOC 水平最高，但各试验组间T-AOC 水平无显著性差异。

三、讨论

1.复方中草药对虹鳟幼鱼生长的影响

试验表明由白芷、枸杞、金银花、广藿香、葛根、五味子制成的复方中草药对虹鳟幼鱼的生长有促进作用。有研究表明，植物多糖主要通过促进与生长相关激素的合成与分泌来促进脂类与糖的代谢，提高机体氨基酸与蛋白质合成，以达到促生长的作用，枸杞多糖可以提高动物的生长性能。陶云开(2022)等研究发现，枸杞多糖可提高罗非鱼的消化酶活性，改善其肠道组织形态，从而影响罗非鱼的生长发育，且以添加剂量为1.5 克/千克的效果最佳。李庆敏(2022)等研究表明，颗粒型全混合日粮中添加5%枸杞渣对育肥滩羊生长性能具有积极作用。王曼(2020)等发现用20%的发酵金银花饲料代替基础饲料，可以有效提高肥育猪的生长性能。刘志勇(2017)等研究表明文昌鸡日粮中添加3%的五味子可以显著提高生长性能及肉质。以上研究与本试验所得结果相似，本试验所添加的复方中草药有效促进了虹鳟幼鱼的生长，且2%的添加量组效果最好；3%的添加量组效果有所降低，可能是复方中草药添加量略多，对虹鳟幼鱼的消化系统造成了一定的影响，继而摄食量有所降低造成的。

2.复方中草药对虹鳟幼鱼非特异性免疫的影响

通过测定虹鳟幼鱼的肝组织抗氧化能力，发现复方中草药具有改善虹鳟幼鱼抗氧化能力的作用。T-SOD、T-AOC和CAT为重要的非特异性免疫指标。CAT 是将过氧化氢分解为水和氧的关键酶之一，是机体抗氧化系统的重要组成部分，过氧化氢酶活性大小体现了机体抗氧化能力的强弱。本试验随着复方中草药添加量的增多，其有效提高了肝脏组织CAT 的活性，添加量为3%时较为显著，而其他组提升不显著。SOD是一种内源性抗氧化金属酶，可以通过清除超氧阴离子自由基的毒性来保护细胞或组织免受伤害，在抗氧化、延缓机体衰老、改善机体免疫力等方面起着至关重要的作用。本试验结果表明饲料中添加复方中草药可以有效增强虹鳟幼鱼肝脏中SOD的活性，说明复方中草药能够有效提高虹鳟幼鱼的抗氧化能力。TAOC是机体内抗氧化能力的总体体现，表示各抗氧化物质和抗氧化酶等构成的总体抗氧化水平。已有研究表明投喂含有复方中草药的饲料可有效提高水产动物的非特异性免疫能力。胡斌(2019)等发现饲料中添加5 克/千克由黄芩、黄柏、大黄、大青叶制成的复方中草药，能提高养殖动物血浆SOD活性，增强机体抗氧化能力。王红涛(2021)等研究表明饲料中添加蒲公英提取物，能有效提高鲤鱼血清中的SOD、T-AOC、CAT活性。本试验发现添加2%的复方中草药可以提升虹鳟肝脏组织中的T-AOC水平，添加量为1%和3%时效果并不显著。

四、小结

饲料中添加由白芷、枸杞、金银花、广藿香、葛根、五味子制成的复方中草药能提高虹鳟幼鱼的生长性能，其中以2%的添加量效果最佳。非特异性免疫力也有所提升，CAT 活性的提升以T4 组效果最显著，T2 和T3 组的SOD 活性显著升高，T3组的T-AOC活性显著高于对照组。综上，复方中草药可显著提高虹鳟幼鱼生长性能，提高鱼体非特异性免疫能力，但过量的复方中草药也会对鱼体造成不利影响，饲料中适宜添加比例为2%。